Российский химико-аналитический портал  химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов  
карта портала ::: расширенный поиск              
 


ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...
  1. Аналитический форум | Список форумов | Войти в систему | Регистрация | Помощь | Последние темы | Поиск

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

концентрация иммобилизированого пептида. >>>

  Ответов в этой теме: 5

[ Ответ на тему ]


Автор Тема: концентрация иммобилизированого пептида.
kirill.ivanov
Пользователь
Ранг: 2

07.10.2006 // 14:25:45     
здравствуйте!
не подскажите, как можно было бы узнать концентрацию
иммобилизированого тетрапептида на сефарозе. (пептид АК с ароматным ядром не содержит)?
ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
Spectrometrist
Пользователь
Ранг: 777


08.10.2006 // 0:52:27     

kirill.ivanov пишет:
здравствуйте!
не подскажите, как можно было бы узнать концентрацию
иммобилизированого тетрапептида на сефарозе. (пептид АК с ароматным ядром не содержит)?


Гидролизовать в 6н HCl и отдать на аминокислотный анализ? - это если пептид единственный белковый компонент.
knoxchem
Пользователь
Ранг: 515


08.10.2006 // 9:37:48     
А выдержит ли сефароза 6н HCl?
Впрочем, если продукты гидролиза сефарозы не мешают аминокислотному анализу, то это не важно.

Я бы попытался твёрдотельной или отражающей спектроскопией
Spectrometrist
Пользователь
Ранг: 777


08.10.2006 // 15:01:56     
Редактировано 1 раз(а)

Кстати, а почему бы N-концы не померить ТНБСом, без гидролиза. Это если в пептиде после пришивки остались свободные N-концы, конечно.

А цистеина свободного там нет? Если, на счастье, есть, его можно классно реактивoм Эллмана (ДТНБ) зацепить, это очень специфичная реакция.
kirill.ivanov
Пользователь
Ранг: 2


10.10.2006 // 21:37:22     
Редактировано 1 раз(а)


Spectrometrist пишет:
Кстати, а почему бы N-концы не померить ТНБСом, без гидролиза. Это если в пептиде после пришивки остались свободные N-концы, конечно.

А цистеина свободного там нет? Если, на счастье, есть, его можно классно реактивoм Эллмана (ДТНБ) зацепить, это очень специфичная реакция.

извините, не было доступа к Сети.
опыт поставлен так, что пептид поочерёдно пришивается либо С-концом, либо N-концом. поэтому подбирать разные спец. реакции не хочется. К счастю, есть Cys остаток. Попробуем порыть в сторону ДТНБ.
а сефароза точности мешать не будет?
Spectrometrist
Пользователь
Ранг: 777


11.10.2006 // 0:26:22     

kirill.ivanov пишет:

извините, не было доступа к Сети.
опыт поставлен так, что пептид поочерёдно пришивается либо С-концом, либо N-концом. поэтому подбирать разные спец. реакции не хочется. К счастю, есть Cys остаток. Попробуем порыть в сторону ДТНБ.
а сефароза точности мешать не будет?


Нет. Реакция через дисульфидный обмен идет, очень специфично. На всякий случай можно контроль поставить с инактивированной сефарозой. Но будут мешать: окислители / восстановители (любые), и конечно тиолы / дисульфиды.

  Ответов в этой теме: 5

Ответ на тему


ААС, ИСП-АЭС, ИСП-МС - прямые поставки в 2022 году

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU:      [ Все новости ]


ЖУРНАЛ ЛАБОРАТОРИИ ЛИТЕРАТУРА ОБОРУДОВАНИЕ РАБОТА КАЛЕНДАРЬ ФОРУМ

Copyright © 2002-2022
«Аналитика-Мир профессионалов»

Размещение рекламы / Контакты