| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Разделение методом ВЭЖХ аминокислот и аминов >>>
|
 |
| Автор | Тема: Разделение методом ВЭЖХ аминокислот и аминов | ||
|
irina Пользователь Ранг: 3 |
 11.03.2004 // 18:24:25
Буду очень признательна за советы по разделению методом ВЭЖХ тирозина и тирамина. Колонка С-18, подвижная фаза - метанол/вода. Проблема - аминокислота и амин выходят одновременно. |
||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|||
|
Andrew VIP Member Ранг: 1370 |
11.03.2004 // 20:17:04
Попробуйте вместо воды буфер с разным рН, поскольку гидрофильность аминов зависит от рН удерживание тоже будет существенно меняться и вероятно несинхронно у амина и аминокислоты. Второй вариант - ион-парная хроматография. Применив, к примеру, додецилсульфат натрия Вы увеличите удерживание аминокислоты. |
||
|
Леонид VIP Member Ранг: 5266 |
12.03.2004 // 9:49:18
Редактировано 1 раз(а) Андрей все правильно написал. Только не спешите переходить в ион-парный режим, а то компоненты наверняка разбегутся на километр друг от друга. Думаю, будет достаточно поварьировать рН (3 - 8) и концентрацию фосфатного буфера (обычно в диапазоне 0,01 - 0,1М), чтобы гарантировано растянуть компоненты. |
||
|
Garry VIP Member Ранг: 1076 |
 17.03.2004 // 10:13:03
Почему же для ион-парной хроматографии использовать сразу додецилсульфат натрия? Я этого делать не советую по той причине, что потом восстановить свойства колонки будет весьма и весьма сложно. А вот использование коротких ионов типа пентансульфонат, гексил-, гептил- сульфонатов в буферном растворе с рН <= 5 оч-чень даже замечательно разделит аминокислоту от его амина и с колонкой будет все замечательно. Игорь. |
||
|
vd Пользователь Ранг: 15 |
17.03.2004 // 15:20:58
Не знаю свойства сорбента. Но если он достаточно полярный и устойчив в щелочной среде, то элюирование можно провести в два этапа: сначала в слабощелочном аммиачном буфере (чтобы выгнать тирамин), а затем - в нейтральном или даже слабокислом (чтобы тирозин надолго не зависал). Если имеется в виду не препаративное, а лишь аналитическое использование, может оказаться полезной предварительная химическая модификация с целью понижения полярности и pH-чувствительности (ацилирование, этерифицирование, дезаминирование). |
||
|
Andrew VIP Member Ранг: 1370 |
17.03.2004 // 22:46:00
Упомянутый С18 как раз неполярный и неустойчивый в щелочной среде и притом уже химически модифицированный, увы... |
||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
||
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
20.03.2004 // 14:50:57
Да, Леонид и Со. все сказали верно, а способ... Лучше возьмите вместо воды буфер с 1% три- или ди - этиламином, подкисленным фосфорной к-той (возможно - уксусной) - если позволяет длина волны. Вообще, буфер на основе ацетата триэтиламмония очень дружественнен любому силикагелю, он очень в нем устойчив, в отлисие от неорганических буферов. Максимум буферной емкости рН 4-5, в отличие от фосфата ТЭА - рН 3.5-4. Кроме того - в этих буферах гораздо легче варьировать рН. |
||
|
vd Пользователь Ранг: 15 |
20.03.2004 // 18:44:37
Редактировано 1 раз(а) Не "увы", а тем более. Нужна химическая модификация аналита. |
||
|
irina Пользователь Ранг: 3 |
 23.04.2004 // 21:46:55
Огромное спасибо всем за полезные советы. Тирозин и тирамин удалось разделить в аммиачном буфере рН8,0 (50% MeOH). |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 8 |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
