Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
![]() |
|
ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
![]() |
Пики поменялись местами (ВЭЖХ, С18, спекторофотометрический детектор) >>>
|
![]() |
Автор | Тема: Пики поменялись местами (ВЭЖХ, С18, спекторофотометрический детектор) | ||
Pearsontano Пользователь Ранг: 22 |
![]() Добрый день, коллеги! Работаем по методике ГОСТ EN 12856-2015. Методика обкатанная, верифицированная. На хроматографе LicArt 62, по непонятной причине, пики сорбиновой и безойной кислот начали меняться местами. Сорбиновая всегда выходила первой (молярная масса 112 г/моль), а бензойная второй (122 г/моль). Работаем по этой методике больше 2-х лет, такой проблемы больше не возникало. И тут на хроматограмме резкие изменения, аналит выходит наоборот. Никаких параметров не изменяли, колонка С18, подвижная фаза: 80:15:5 (H2O, ACN, 1%H3PO4). pH всегда постоянная. На другом хроматографе при таких же параметрах выходит все нормально, как и должно быть. В чём может быть проблема? |
||
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|||
vmu Пользователь Ранг: 1303 |
![]() Редактировано 2 раз(а) Элюент смешиваете вручную или насосом? На проблемном приборе раньше порядок был нормальным или сразу на нем другой? Площади пиков и времена удерживания на проблемном приборе стабильны в течение серии из нескольких вводов? Точно порядок поменялся? (Растворы веществ по одному кололи?) Колонка термостатируется? |
||
OldBrave VIP Member Ранг: 1323 |
![]() В ОФХ "...пики сорбиновой и безойной кислот начали меняться местами..." - известное поведение. Секрет прост, рН должен быть не больше 3,5. |
||
Pearsontano Пользователь Ранг: 22 |
![]() Смешивается насосом, градиент. Порядок раньше был нормальным, площади стабильны, время - нет. |
||
Pearsontano Пользователь Ранг: 22 |
![]() По методике pH - 4,3. Попробуем снизить до 3. |
||
vmu Пользователь Ранг: 1303 |
![]() Вы для своей ПФ его измеряли? У вас 0.05 % фосфорной в смешанной ПФ. Считать лень, но сдается мне, что реальный pH там ближе к 3. Ищите проблему с системой подачи ПФ. Амплитуда колебаний давления в норме? У вас именно градиент или просто смешение трех компонентов в изократике? |
||
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
||
OldBrave VIP Member Ранг: 1323 |
![]() Редактировано 1 раз(а) Немного погорячился, рН должен быть 4,5, - стабильные условия: Колонка: Luna 5u C18(2) 100А 150x2,0мм (Phenomenex); Предколонка: SecurityGuard C18 4x2,0мм (Phenomenex); Температура колонки: 50C; Элюент: A = ACN; B = 25 mM AcONa. (3,4г AcONa*3H2O/л + 2,4мл AcOH(лед.), рН = 4,5) Изократически: B - 80%, A - 20%. Время записи хроматограммы: 6-10 мин. Начальное кондиционирование в теч. 15 мин. Поток: 0,4 мл/мин. Объем пробы: 10 мкл. Длина волны детектора: 235 нм. BzOH - 3,2 мин, SorbOH - 4,4 мин. |
||
vmu Пользователь Ранг: 1303 |
![]() Во избежание проблем с формой пиков и временами удерживания в приличных домах принято использовать ПФ с pH, отличающимся от pKa аналитов хотя бы на единицу. pKa сорбиновой 4.76, pKa бензойной 4.20... |
||
OldBrave VIP Member Ранг: 1323 |
![]() Редактировано 2 раз(а) Проходили уже. Вам шашечки или ехать? МВИ аттестована в ЦСМ. Сомневающимся - флаг в руки... |
||
vmu Пользователь Ранг: 1303 |
![]() Мне без разницы. О авторе темы и иных читателях форума я беспокоюсь. Про pH вы завели разговор, сначала предложив разумный pH 3.5 для данных аналитов, а затем переиграв на сомнительный pH 4.5, причем с ацетатным буфером, который на 235 нм, например, даст шум несколько более высокий, чем раствор фосфорной кислоты или фосфатный буфер. Допускаю, что даже с pH 4.5 пики у вас делятся, но выбор такой ПФ для этой задачи не является хорошим примером для начинающих хроматографистов. А у автора целый ГОСТ. Обкатанный, верифицированный. И даже как-то они работают без ацетата. Нафига им пробовать ваш ацетат? Проблема у них все-таки с прибором, а не с ПФ. |
||
Pearsontano Пользователь Ранг: 22 |
![]() Добрый день! Да, измеряли, pH выдерживаем строго 4,3. К насосу у нас тоже есть вопросы и недоверие, прибор - LicArt62. У нас именно градиент. |
|
||
|
ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
Размещение рекламы / Контакты |