| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
ТСХ под лампой 365нм? >>>
|
 |
| Автор | Тема: ТСХ под лампой 365нм? | |||||
|
Sarge Пользователь Ранг: 179 |
 20.01.2007 // 1:02:45
Подскажите, пожалуйста будут ли видны отчетливо пятна на ТСХ пластине с люминофором (например Силуфол или Сорбфил) под лампой 365нм? Ведь стандартная лампа 254нм. |
|||||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
||||||
|
SIG Пользователь Ранг: 1214 |
20.01.2007 // 14:43:20
Ежели они сильно поглощают или сами светятся при этой длине волны, то да. Но сама пластина светится не будет, люминофор возбуждается только при 254 нм. |
|||||
|
Garry VIP Member Ранг: 1076 |
22.01.2007 // 10:21:13
Метод ТСХ с использованием пластин с нанесенным сорбентом, содержащем люминофор базируется на поглощении веществами УФ светв длиной 254 нм. Поэтому при облучении такой пластинки УФ светом указанной длины волны фон светится зеленым светом, а пятна веществ , поглощающих УФ свет гасят флуоресценцию в местах локализации пятен и поэтому свечение люминофора в этих местах отсутствует. Т. на светло-зеленом фоне темно-фиолетовые пятна. Лампа 365 нм рассчитана на возбуждение флуоресценции у некоторых других веществ чем люминофор и используется для учета ну скажем, микотоксинов или веществ у которых химическим образом инициируют флуоресценцию обрабатывая растворами хлорида алюминия или хлорида марганца. В общем если вещества не способны светиться самостоятельно или же не проведена обработка инициаторами флуоресценции, то Вы увидите при 365 нм темную пластинку безо всяких намеков на пятна. |
|||||
|
Вячеслав Пользователь Ранг: 1369 |
22.01.2007 // 15:26:46
Игорь Николаевич, а подскажите,пожалуйста, в целях повышения образованности, как сфотографировать в УФ свете пластину? |
|||||
|
DSP007 VIP Member Ранг: 2228 |
22.01.2007 // 15:35:13
Редактировано 1 раз(а) Если есть спектроденситометр (с видеокамерой) , то вопроса нет.Сам снимет. Если есть хороший цифровой или пленочный фотоаппарат, то тоже не сложно. Необходимо непрозрачное для УФ стекло ( обычно установлено в камере для просмотра), деревянный брусочек, на который положить пластинку, так чтобы угол испускаемых ею лучей к оси фотоаппарата составил 90 градусов. Все. Можно еще сверху наложить пленочку с координатной сеткой, но если рисунок не пойдет на денситометрирование. Хуже если снимается фотоаппаратом с обычной оптикой, или того хлеще мобилой. Избежать геометрических искажений тогда невозможно. |
|||||
|
DSP007 VIP Member Ранг: 2228 |
22.01.2007 // 15:37:35
Извиняюсь,Игорь Николаевич, что пока не отписал Вам. DSP007. |
|||||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|||||
|
Вячеслав Пользователь Ранг: 1369 |
22.01.2007 // 16:42:08
Спасибо, DSP. В принципе как снять на пленку, я только что продумал - много тонкостей... А вот как видок цифровой камеры среагирует - не знаю... |
|||||
|
Sarge Пользователь Ранг: 179 |
22.01.2007 // 20:58:31
Спасибо, но почему-то бывают светлые пятна на флюоресцентном поле? Попробовал, как работает банковский детектор денег в плане идентификации пятен на ТСХ-пластине с лампой 365нм. Вроде все видно и пластина не фиолетовая? |
|||||
|
Garry VIP Member Ранг: 1076 |
23.01.2007 // 9:52:38
Мы фотографировали на цифровую оптику используя стандарный облучатель с визирным окошком. Там в окошке уже стоит УФ фильтр, чтобы глаза не портить. Поэтому задавали угол расположения пластинки по отношению к визирному окошку (параллельно) , прикладывали вплотную объектив цифровика (ну у нас был хороший Олимпус) и снимали без всяких проблем. На пластинках были разогнаны флавоноиды и обработаны хлоридом алюминия. Я устанавливал на фарм.предприятии свой ТСХ-Менеджер, вот и тренировались на их объектах (растительные экстракты). |
|||||
|
Garry VIP Member Ранг: 1076 |
23.01.2007 // 10:28:13
Не, ну фон не может быть особо темным. Такого типа лампы продают на хоз.рынках, устанавливают в летних кафе, на море ... . Заходит девушка в светлом платьице .. А зрители из бара видят еше и ее нижнее белье (если оно белое)... Клас-с-с ! Пластинки с УФ люминофором имеют максимум свечения при 254 нм. Естественно при несколько иной длине волны какое-то остаточное свечение будет, но идентификация пятен веществ по гашению флуоресценции будет затруднена, особенно при малых концентрациях. Если Вы захотите работать в более-менее линейном диапазоне наносимых масс веществ (1-10 мкг) то малые концентрации Вы просто не увидите при детектировании лампой 365 нм. Совсем другое дело будет если для Ваших веществ есть инициаторы флуоресценции (ну например раствор флуоресцеина или родамина Ж, хлориды алюминия, марганца,магния ...., некоторые кислоты). Тогда все пятна будут светиться достаточно ярко и при денситометрии таких пятен линейный диапазон несколько шире и калибровка будет иметь линейный вид ,а не параболы как в предидущем случае (закон Кубелки-Муна). Да приобрести лампу с УФ-254 не проблема. В магазинах медтехники продают лампы для кварцевания помещений. У нее диапазон излучения намного шире, но вот эти пластинки с люминофором светятся достаточно нормально. |
|||||
|
Вячеслав Пользователь Ранг: 1369 |
23.01.2007 // 11:36:04
Понял. Спасибо. Все, как всегда, проще, чем кажется на самом деле... |
| |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
