| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
А нужно ли контролировать pH акриламидного геля? >>>
|
 |
| Автор | Тема: А нужно ли контролировать pH акриламидного геля? |
|
Кирилл Пользователь Ранг: 40 |
 05.03.2007 // 12:26:12
Столь простой вопрос возник как всегда неожиданно. Наставник сначала говорил, чо не надо, теперь говорит что он должен быть 8,3 а другой утверждает, что 5,3. Так кто же прав? Речь идет об SDS-PAAGE |
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|
Urry Пользователь Ранг: 140 |
05.03.2007 // 17:15:28
Конечно надо, рН геля определяется буферной системой, которую Вы используете, а она в свою очередь от метода разделения, который в свою очередь от того что делите. Поэтому рН геля может быть разной в зависимости от задач. Далее смотрите справочную литературу и выбирайте метод разделения подходящий под Вашу задачу |
|
Spectrometrist Пользователь Ранг: 777 |
05.03.2007 // 18:04:27
В обычном Трис глициновом SDS PAGE pH в геле и running buffer около 8.5, если мне память не изменяет, а вот в stacker gel (более "мягкий" гель который наслаивается поверх seaprating gel и в котором, собственно, и делаются sample wells (лунки?))pH около 6.5. Посмотрите: Schagger, H. (2001). Blue-native gels to isolate protein complexes from mitochondria. Methods Cell Biol 65, 231-244. (там не только про Blue Native) или Schagger, H. (2006). Tricine–SDS-PAGE. Nature Protocols 1, 16-22. хотя протоколов для SDS PAGE полно на любой вкус |
|
Кирилл Пользователь Ранг: 40 |
06.03.2007 // 15:56:03
Редактировано 3 раз(а) Сорри, неправильно выразился. Имелось ввиду не pH геля, а pH АКРИЛАМИДНОГО СТОКА |
|
Spectrometrist Пользователь Ранг: 777 |
06.03.2007 // 18:27:57
Какого стока? Если вы имеете ввиду раствор из которого вы и полимеризуете акриламид (АА / бис-АА; SDS, персульфат, темед) то я это и имел ввиду, там должно быть под 8.5 Какой же pH у собственно геля ("твердой" матрицы) - никакого, какой там буфер, такой и рН. Хотя тут можно попридираться, типа если АА не очищенный и там есть акриловая кислота, то гель работает как катионообменник и т.д. но это все хорошо студентов пугать. Купите нормальный алриламид и будет вам счастье |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 4 |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
