Форумы ANCHEM.RU: Опасно ли для С18 колонки вкатывать образец в ТХУ?

Российский химико-аналитический портал

химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов

карта портала ::: расширенный поиск

ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Опасно ли для С18 колонки вкатывать образец в ТХУ? >>>

Ответов в этой теме: 9

[ Ответ на тему ]

Автор

Тема: Опасно ли для С18 колонки вкатывать образец в ТХУ?

AA_Alex
Пользователь
Ранг: 372

24.05.2007 // 9:43:04

Подскажите, пожалуйста!
Есть ли опасность для сорбента колонки (Диасфер-С18, рабочий диапазон рН 2-8), если у нас образец растворен в 10% ТХУ (рН около 0.8)? Вкол 10мкл, поток 0.2-0.5 мл/мин, подвижная фаза 0.1% уксусн к-та и 2-10% ацетонитрила (рН 3.4).

ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

Farma
Пользователь
Ранг: 382

24.05.2007 // 10:36:50

AA_Alex пишет:
Подскажите, пожалуйста!
Есть ли опасность для сорбента колонки (Диасфер-С18, рабочий диапазон рН 2-8), если у нас образец растворен в 10% ТХУ (рН около 0.8)? Вкол 10мкл, поток 0.2-0.5 мл/мин, подвижная фаза 0.1% уксусн к-та и 2-10% ацетонитрила (рН 3.4).

Для обычной колонки (с Диасфером я не работал) это не очень хорошо, но и не смертельно. Просто срок её эксплуатации может сократиться при рутинном анализе. Но гораздо хуже это может быть для Вашего образца. Вполне возможен переход из протонированной в депротонированную форму Ваших целевых веществ на колонке, что приведёт к ухудшению разделения.

AA_Alex
Пользователь
Ранг: 372

24.05.2007 // 11:17:03

Спасибо,
а имеет смысл подщелачивать образец до рН 2 аммиаком? Мы экстрагируем биогенные амины из дрозофилы. Раньше это делали 0.1Н хлорной кислотой. Сейчас пытаемся поставить анализ на ВЭЖХ-МС, для которого, как мне сказали, вкалывать образцы в хлорной нежелательно. Поскольку при пробоподготовке необходимо избавиться от белков, перешли на ТХУ. А что может перейти из протонированной формы в депротонированную? В прежнем варианте мы работали с ион-парной системой, рН элюэнта 3.0-3.5, а рН образца в 0.1Н хлорной к-те тоже в р-не 1, было все нормально.

Farma
Пользователь
Ранг: 382

24.05.2007 // 12:26:26

AA_Alex пишет:
Спасибо,
а имеет смысл подщелачивать образец до рН 2 аммиаком? Мы экстрагируем биогенные амины из дрозофилы. Раньше это делали 0.1Н хлорной кислотой. Сейчас пытаемся поставить анализ на ВЭЖХ-МС, для которого, как мне сказали, вкалывать образцы в хлорной нежелательно. Поскольку при пробоподготовке необходимо избавиться от белков, перешли на ТХУ. А что может перейти из протонированной формы в депротонированную? В прежнем варианте мы работали с ион-парной системой, рН элюэнта 3.0-3.5, а рН образца в 0.1Н хлорной к-те тоже в р-не 1, было все нормально.

В случае с биогенными аминами, думаю, переходы из одной формы в другую нестрашны. Если только какие-либо сопутствующие соединения имеют к этому тенденцию.... Просто в ВЭЖХ (особенно ион-парной) обычно принято колоть пробу с таким же рН, что и буфер. Для этого часто в качестве растворителя используют сам элюент. Но в Вашем случае, думаю, криминала нет и если разделение и воспроизводимость лично Вас устраивает, то я бы не "защелачивал".

Да, а кстати, Вы уверены, что ТХУ для МС является оптимальным вариантом?

AA_Alex
Пользователь
Ранг: 372

24.05.2007 // 14:03:24

Farma пишет:
Да, а кстати, Вы уверены, что ТХУ для МС является оптимальным вариантом?

Не знаю, просто пока ничего другое не придумал - хлорную кислоту нельзя, а поскольку нужно убрать все белки, первое, что пришло на ум - ТХУ. Если подскажете еще какие-нибудь варианты - буду благодарен за информацию.

varban
VIP Member
Ранг: 8699

24.05.2007 // 14:53:48

Редактировано 4 раз(а)

Оффтопик:

AA_Alex пишет:
Мы экстрагируем биогенные амины из дрозофилы.

Муравьиная кислота впервые получена в 1670 году Джоном Реем. Метод получения: сухая перегонка рыжих муравьев....

Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

Охлаждающий инкубатор UT-3070
Используется для создания и поддержания внутри камеры заданной температуры, в диапазоне от 0 до +60 °С с точностью 0,1°С. Служат для решения задач в области защиты и охраны окружающей среды, анализа воды, определения БПК, гигиены, фармацевтике, бактериологии, культивации растений и других исследований.

[ Информация из каталога оборудования ANCHEM.RU ]

virtu
VIP Member
Ранг: 2135

24.05.2007 // 22:40:32

1) Почему бы не попробывать ТФЭ? если такая ситуация.
2) А что может перейти из протонированной формы в депротонированную? При изменении рН среды с 0.8 до 2? Биогенные амины будут находиться все равно в протонированном состоянии.
3)рН образца имеет значение в зависимости от хроматографического режима.ИПХ,ИОХ и др.
4)Ничего особо страшного с Вашим сорбентом не будет, единственно, при постоянной нагрузке в этих условиях, сократиться активный срок службы Вашего сорбента, правда, думаю, незначительно, и то здесь основная причина не в низком рН, а в комплексе условий. Так что не заморачивайтесь)))))

Волгин
VIP Member
Ранг: 1327

25.05.2007 // 7:04:27

Редактировано 2 раз(а)

Еще один вариант: поставьте предколонку.

AA_Alex
Пользователь
Ранг: 372

28.05.2007 // 7:49:20

Farma пишет:
Просто в ВЭЖХ (особенно ион-парной) обычно принято колоть пробу с таким же рН, что и буфер.

Спасибо всем большое за ответы. Простите за любопытство

, а почему (особенно в ион-парной хр-ии) желательно чтобы рН образца и элюента был близким?

Farma
Пользователь
Ранг: 382

29.05.2007 // 17:33:38

AA_Alex пишет:

Farma пишет:
Просто в ВЭЖХ (особенно ион-парной) обычно принято колоть пробу с таким же рН, что и буфер.
Спасибо всем большое за ответы. Простите за любопытство , а почему (особенно в ион-парной хр-ии) желательно чтобы рН образца и элюента был близким?

Форма пиков лучше. Опять же вероятность перехода целевых и нецелевых веществ из одной формы в другую снижается.


Ответов в этой теме: 9	Ответ на тему

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU: [ Все новости ]

Размещение рекламы / Контакты