Форумы ANCHEM.RU: Как снять флуоресцентные спектры?

Российский химико-аналитический портал

химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов

карта портала ::: расширенный поиск

ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Как снять флуоресцентные спектры? >>>

Ответов в этой теме: 9

[ Ответ на тему ]

Автор

Тема: Как снять флуоресцентные спектры?

Марианна
Пользователь
Ранг: 21

30.10.2008 // 11:23:52

Здравствуйте. У нас возникла следующая проблема. Мы работаем на хроматографе Shimadzu с флуоресцентным детектором RF-10Axl, программа LC-solution. У нас возникла необходимость снять спектры катехоламинов. В инструкции описания процедуры снятия спектров нет, мы попробовали снять их самостоятельно, но у нас не получилось. Если кто-то знает, как это сделать, будем благодарны за совет.

ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

AlexGr
Пользователь
Ранг: 71

30.10.2008 // 13:29:38

В любом случае для анализа с использованием флуоресцентного детектора Вам будет необходимо проводить дериватизацию. А здесь уже все зависит от наличия того или иного реагента. По этой теме много статей.

Илья226
Пользователь
Ранг: 354

30.10.2008 // 14:33:15

Редактировано 1 раз(а)

AlexGr пишет:
В любом случае для анализа с использованием флуоресцентного детектора Вам будет необходимо проводить дериватизацию. А здесь уже все зависит от наличия того или иного реагента. По этой теме много статей.

Коллега, если вещество само по себе имеет характерный спектр флуоресценции зачем его еще и дериватизировать то? Тот же хинин например....поэтому про любой случай- это преувеличение конечно))))
А про катехол амины насколько мне помниться измеряют флуоресценции не их самих...а продуктов окисления- адренохромов. Поищите в литературе по клиническим анализам....методика флоресцентного анализа катехоламинов довольно распространена...

AlexGr
Пользователь
Ранг: 71

30.10.2008 // 14:58:52

Илья226 пишет:

AlexGr пишет:
В любом случае для анализа с использованием флуоресцентного детектора Вам будет необходимо проводить дериватизацию. А здесь уже все зависит от наличия того или иного реагента. По этой теме много статей.
Коллега, если вещество само по себе имеет характерный спектр флуоресценции зачем его еще и дериватизировать то? Тот же хинин например....поэтому про любой случай- это преувеличение конечно))))
А про катехол амины насколько мне помниться измеряют флуоресценции не их самих...а продуктов окисления- адренохромов. Поищите в литературе по клиническим анализам....методика флоресцентного анализа катехоламинов довольно распространена...

Согласен. Веществ, которые нет необходимости дериватизировать для FLD много. Моя фраза относилась именно к заявленному вопросу: анализ катехоламинов на FLD .

Марианна
Пользователь
Ранг: 21

30.10.2008 // 15:00:00

To AlexGr и Илья226.
Проблема не в методике и не в дериватизации. Нас интересует именно снятие спектров (испускания и поглощения), как это осуществить именно на нашем оборудовании и с нашим ПО.

Xenie
Пользователь
Ранг: 143

30.10.2008 // 17:47:47

Марианна пишет:
...Мы работаем на хроматографе Shimadzu с флуоресцентным детектором RF-10Axl, программа LC-solution. У нас возникла необходимость снять спектры ...

Если не получится с LC-solution, эту задачу с детектором RF-10Axl можно решить с помощью ПО МультиХром (www.ampersand.ru/rus/ramper.htm).

Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

Атомно-абсорбционный спектрометр (ААС) Thermo Scientific iCE 3300
Компактный друхлучевой АА спектрометр с пламенной и электротермической (опционально) атомизацией. Автоматическая туррель на 6 ламп. Спектральный диапазон: 180 - 900 нм или 185-760 нм.

[ Информация из каталога оборудования ANCHEM.RU ]

Эксперт
Пользователь
Ранг: 146

31.10.2008 // 0:43:05

Марианна пишет:
To AlexGr и Илья226.
Проблема не в методике и не в дериватизации. Нас интересует именно снятие спектров (испускания и поглощения), как это осуществить именно на нашем оборудовании и с нашим ПО.

При поиске условий детектирования необходимо найти оптимальную длину волны возбуждающего света. Это совсем необязательно должен быть максимум поглощения. Следовательно, в первую очередь надо, закрепив длину волны регистрации, просканировать монохроматор возбуждения. Когда максимум сигнала будет найден, надо, закрепив длину волны возбуждения, просканировать монохроматор выходного излучения. Это схема. На практике могут быть разные отклонения. Например, в Вашем проборе нет монохроматора возбуждения, а применен лазерный диод (или что-либо подобное). Тогда первая задача отменяется, но возникает другая: а не поглощается ли излучение лазера какими либо другими веществами, присутствующими в растворе, или материалом кюветы? Этот вопрос можно попытаться решить, сняв спектр поглощения анализируемого раствора, например, на спектрофотометре. Попробуйте пофантазировать, если в описании детектора не прописана процедура поиска оптимальных условий.
Вообще, для подобных целей "Люмэкс" выпускает спектрофлюориметр "Флюорат-Панорама". Поищите в округе, нет ли у соседей такого прибора.

LVD
Пользователь
Ранг: 219

31.10.2008 // 4:51:46

Марианна пишет:
To AlexGr и Илья226.
Проблема не в методике и не в дериватизации. Нас интересует именно снятие спектров (испускания и поглощения), как это осуществить именно на нашем оборудовании и с нашим ПО.

У нас в варианте с УФ детектором можно снимать в этой системе спектр в остановленном потоке. В меню Control выберите Spectrum scan ( в Вашем случае на каком-то шаге, скорее всего на этом, нужно выбрать спектр возбуждения или поглощения), затем нажимаете Pamps off и после этого Spectrum

Марианна
Пользователь
Ранг: 21

31.10.2008 // 12:25:23

Xenie пишет:
[Если не получится с LC-solution, эту задачу с детектором RF-10Axl можно решить с помощью ПО МультиХром (www.ampersand.ru/rus/ramper.htm).

Спасибо Вам за совет. Но, к сожалению в демо версии, доступной на этом сайте, нет функции сканирования спектров.

Эксперт пишет При поиске условий детектирования необходимо найти оптимальную длину волны возбуждающего света. Это совсем необязательно должен быть максимум поглощения. Следовательно, в первую очередь надо, закрепив длину волны регистрации, просканировать монохроматор возбуждения. Когда максимум сигнала будет найден, надо, закрепив длину волны возбуждения, просканировать монохроматор выходного излучения. Это схема. На практике могут быть разные отклонения. Например, в Вашем проборе нет монохроматора возбуждения, а применен лазерный диод (или что-либо подобное). Тогда первая задача отменяется, но возникает другая: а не поглощается ли излучение лазера какими либо другими веществами, присутствующими в растворе, или материалом кюветы? Этот вопрос можно попытаться решить, сняв спектр поглощения анализируемого раствора, например, на спектрофотометре. Попробуйте пофантазировать, если в описании детектора не прописана процедура поиска оптимальных условий.
Вообще, для подобных целей "Люмэкс" выпускает спектрофлюориметр "Флюорат-Панорама". Поищите в округе, нет ли у соседей такого прибора

.
Со спектрами и флуориметром понятно. Но нам бы хотелось попытаться решить задачу снятия спектров на нашем оборудовании, раз уж есть такая функция.

LVD пишет:У нас в варианте с УФ детектором можно снимать в этой системе спектр в остановленном потоке. В меню Control выберите Spectrum scan ( в Вашем случае на каком-то шаге, скорее всего на этом, нужно выбрать спектр возбуждения или поглощения), затем нажимаете Pamps off и после этого Spectrum

У нас все точно так же + выбор экстинкции или эмиссии. Когда мы нажимаем scan, выскакивает огромный пик и спектр, похоже, рассчитывается по нему, а не по нашему пику. Насос мы останавливаем чуть раньше максимума пика и сразу жмем scan. Возможно, дело во времени нажатия scan?

LVD
Пользователь
Ранг: 219

01.11.2008 // 9:34:48

Давайте разберемся. Когда в меню Control мы нажимаем Spectr scan появляется пустое (черный фон ) окошко, а справа три клавиши - pamp off, Background и Scan. Останавливаем поток клавишей в этом окне, а не кнопкой в основном окне. И спектр появляется через заметное время (порядка 1-1,5 минуты, у нас обычный УФ -детектор (не диодная матрица)). Когда останавливать можно определиться по-простому - длина трубочек до ячейки детектора и скорость потока (ессно и сечение).
Успехов.


Ответов в этой теме: 9	Ответ на тему

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU: [ Все новости ]

Размещение рекламы / Контакты