Форумы ANCHEM.RU: 10 mM phosphate buffer, pH 2.8

Российский химико-аналитический портал

химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов

карта портала ::: расширенный поиск

ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

10 mM phosphate buffer, pH 2.8 >>>

Ответов в этой теме: 7

[ Ответ на тему ]

Автор

Тема: 10 mM phosphate buffer, pH 2.8

мом
Пользователь
Ранг: 296

07.02.2009 // 18:32:54

Редактировано 3 раз(а)

""10 mM phosphate buffer, pH 2.8 containing 5 mM sodium hexanesulphonate ""
Я нашел приготовление в литер. ( KH2PO4 and K2HPO4 ) но рН 4,8 и выше. Что просто доводить ортофосфорной?
Понимаю вопрос элементарный но под руками нет литературы а в памяти нечего не всплывает.

ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

Slawa
Пользователь
Ранг: 323

07.02.2009 // 19:52:58

Мы когда готовим буферы для хроматографии, то просто готовим нужной концентрации раствор гидрофосфата натрия и доводим до нужного значения pH 80% фосфорной кислотой.

мом
Пользователь
Ранг: 296

07.02.2009 // 20:20:32

Редактировано 1 раз(а)

День добрый.
Спасибо Вячеслав.
Сразу возникает вопрос, нету ли разницы в калии и натрии в условииях ионообменной хроматографии.
И что такое концентрация 10 мМ, ( чего-?)

Vel
Пользователь
Ранг: 20

07.02.2009 // 20:24:35

Редактировано 1 раз(а)

мом пишет:

Я нашел приготовление в литер. ( KH2PO4 and K2HPO4 ) но рН 4,8 и выше. Что просто доводить ортофосфорной?

При приготовлении подобного буфера для фотометрии в моей практике именно так и поступали.

Slawa
Пользователь
Ранг: 323

07.02.2009 // 22:44:25

Редактировано 1 раз(а)

мом пишет:
День добрый.
Спасибо Вячеслав.
Сразу возникает вопрос, нету ли разницы в калии и натрии в условииях ионообменной хроматографии.
И что такое концентрация 10 мМ, ( чего-?)

C ионообменной хроматографией никогда не работал. В обращеннофазовой считаем С буфера = С Na2HPO4+ C KH2PO4. На практике готовим 10мМ раствор Na2HPO4? если нужен буфер с pH 4,5-7 и доводим ортофосфорной кислотой. Либо KH2PO4 и доводим фосфорной кислотой, если нужен буфер с pH менее 4,5

А какая у Вас колонка?

мом
Пользователь
Ранг: 296

07.02.2009 // 23:54:35

Вячеслав у меня есть условия для определения тиамина (природного)

HPLC Methods for Total Thiamine in Foods (Anion Exchange and NH2 Columns; UV Absorbance Detection)
Acid hydrolysis with 0.1 M hydrochloric acid at 100°C for 30 min; Lichrospher 100RP-18 (125 X 4 mm, 5 fim; Merck ?). Isocratic: methanol +10 mM phosphate buffer, pH 2.8 containing 5 mM sodium hexanesulphonate + triethylamine (15 +84.9 + 0.1, v/v/v).1.0 ml/min.
Я думаю приспособить эти условия для обращеннофазового анализа. У меня симетри С-18(5) 150*3,9
Собираюсь добавить тиамина гидрохлорид в контрольный образец и по приращению оценить возможность метода.
Есть сомнения в triethylamine.

Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

ЦКП «Идентификация и оценка биотехнологического потенциала микроорганизмов»
Центр коллективного пользования «Идентификация и оценка биотехнологического потенциала микроорганизмов» («Биоресурсы для биотехнологии») создан на базе трех научных подразделений института ФГУП ГосНИИгенетика. В штате ЦКП 50 высококвалифицированных специалистов в области микробиологии, молекулярной генетики, аналитических методов исследований, информатики, патентоведения, ферментации и криоконсервации.

Slawa
Пользователь
Ранг: 323

08.02.2009 // 0:12:22

Редактировано 1 раз(а)

С такой подвижной фазой в любом случае pH придется доводить. Приготовьте 10мМ раствор КH2PO4, введите туда триэтиламин и гексансульфонат и доведите до нужного значения pH 80% фосфорной кислотой.

Триэтиламин по-видимому придется вводить обязательно, иначе получатся ассиметричные пики тиамина.

мом
Пользователь
Ранг: 296

08.02.2009 // 0:28:49

Спасибо Вячеслав
У меня мало опыта

. Поделитесь им

по поводу работы триэтиламин или может быть, посоветуйте литературу.


Ответов в этой теме: 7	Ответ на тему

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU: [ Все новости ]

Размещение рекламы / Контакты