ВЭЖХ определение витаминов в кормах, премиксах и прочих продуктах животноводства. >>>

Ответов в этой теме: 103   Страница: 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11   «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]

05.11.2008 // 11:02:02     

---

Редактировано 3 раз(а)

---

tatyanab пишет:
Уважаемый Роман и др. господа-аналитики! У МЕНЯ ЗАДАЧА- анализ витаминов А и Д в премиксах с возможностью дальнейшего распространения методики (с необходимыми изменениями в связи с более низкими концентрациями вит.) на продукты питания. Я работала ранее с энзимом Максатазой при подготовке проб премиксов, получала 85-90% от спецификации по вит А и Д, но в сравнении с омылением (лаборатория во Франции, работающая с теми же премиксами) мои результаты были ниже,чем у них. Для заказчика это принципиально - он проверяет поставщика премиксов - т.е. в итоге вопрос денег. Так что должна по его требованию перейти на подготовку пробы с омылением. Я работала при обычном освещении (неон или флуоро), м.б. в этом и причина относительно низких результатов. У меня есть методика Ла-Рош с омылением и антиоксидантом. Вопрос: насколько важно освещение, какая нужна лампа для защиты (есть возможность работать в изолированной комнате с вытяжкой) и насколько важно при омылении работать в среде азота, как вы считаете?
Хром. оборудование у меня есть, в плане хроматографии все работает (тьфу-тьфу-тьфу).
Заранее благодарю за ответ.

Поскольку уважаемый Роман забил на эту тему, отвечу.
Потери витаминов А и Д при омылении - обычное дело. При проведении омыления в стандартных условиях они могут доходить до 40-50%. Это происходит на стадии экстракции и не связано ни с лампами ни с азотом. Работать нужно в отсутствии прямых солнечных лучей. Однако, как проверено на практике, при вводе соответствующих поправок на потери, погрешность в итоге не более 10-15%. Для оценки потерь при экстрагировании калибровку нужно проводить по стандартам, так же подвергнутым процедуре омыления.
Второй способ - избежать стадии промывки экстракта. Экстрагировать после омыления строго небольшой аликвотой гексана, который непосредственно или после фильтрации наносить на колонку.
Третий способ - использовать внутренний стандарт. Я использовал BHT или антрацен, оба не самый лучший выбор. Если найдете лучше, подскажите.

Витамины D2, D3, как показала практика, при детектировании УФ в продуктах питания в интервале разрешенных содержаний без дополнительного концентрирования определить не удается. Однако, при вводе его в составе премиксов с А и Е, в ряде случаев он может быть найден расчетным путем по витамину А (в случае отсутствия в продукте животных жиров).
Что касается премиксов, то D определяется на обратной фазе при увеличении конц. анализируемого раствора в 20 раз.
Фирма Ла-Рош для небольших количеств премиксов анализов не делает, пишут по закладке. Для больших партий у них иногда гуляет содержание витамина А в пределах ~15% от границ, однако содержание D - всегда стабильно.

05.11.2008 // 11:28:05     

---

Редактировано 2 раз(а)

---

Helen* пишет:
Уважаемый Роман!

Недавно я занялась определением витаминов из комплексов, которые у нас производят для животных. А помимо витаминов они содержат дрожжи, сухое молоко, лактозу, сахар, некоторые из них -морские водоросли, некоторые таурин и пр.
Вы писали, что занимались. Очень прошу помогите.
Я начала с биотина, стандарт, сырьё -идёт, методика работает, а вот с пробой сложно.

Поскольку уважаемый Роман забил на эту тему, отвечу.
Уважаемая Helen* выбор биотина в качестве "начала" - опрометчивый поступок. Витамин Н - самый трудно-анализируемый ВЭЖХ витамин, по крайней мере для меня.
В качестве исходного может послужить методика определения H в поливитаминных таблетках (НД 42-11256-01):
В одной таблетке содержится 0,085-0,15 мг витамина Н.
Колонка С8 150х4,6 3мкм. Подвижная фаза:85мл ACN + 1г перхлората натрия + 1мл фосфорной к-ты. Объем довести до 1л водой. Скорость потока - 1,2 мл/мин. Детектор - 200 нм. Объем пробы - 100 мкл. Температура - 30С. Время хроматограммы - 30мин. Время удерживания биотина - 6,4мин.
Подготовка стандарта: 67мг биотина в 200мл ДМСО. 2мл, 3 мл, 4мл этого р-ра -> в 200мл, довести водой до метки.
Пробоподготовка: 50г (точная навески) растертых таблеток "Мультивитамин для детей" -> 200 мл колбу, +100мл воды, +3мл ДМСО. Смесь перемешивать на бане (60С) 20 мин, затем довести водой до метки фильтровать и колоть.