| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Количественный анализ методом ВЭЖХ-МС(TOF) >>>
|
 |
| Автор | Тема: Количественный анализ методом ВЭЖХ-МС(TOF) | |||||
|
shukova_v Пользователь Ранг: 9 |
 29.09.2009 // 9:12:43
Дорогие специалисты! Появилась необходимость самостоятельно разобраться в том, как проводить количественный анализ (рутина, много) на системе HPLC-ESI-TOF-MS. Есть опыт работы на системе HPLC-ESI-MS с тройным квадруполем. Подскажите, пожалуйста, каковы принципиальные практические моменты, отличающие эти два метода с точки зрения количественного анализа? Я понимаю в принципе, что на трипл кваде надо делать MRM, строить масс-хроматограммы и интегрировать пики. А как на тофе? Есть ли там аналог режима SIM и дает ли он выигрыш по чувствительности по сравнению с регистрацией полного ионного тока? Каким образом строить здесь масс-хроматограммы и проводить интегрирование? Насколько узкий диапазон масс брать для масс-хроматограмм? Еще, насколько я понимаю, там большую роль будет играть калибровка шкалы масс. Как часто и каким путем надо вводить калибрант? Систему HPLC-ESI-TOF-MS тоже придется осваивать самостоятельно, так что за советы, на что при этом обратить внимание, буду также благодарна. С уважением, Вера |
|||||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
||||||
|
petroleum Пользователь Ранг: 6 |
29.09.2009 // 12:39:36
Обязательно должен быть СИМ режим. Выйгрыш чувствительности - несомненный. Никогда не доводилось работать с ТОФом но, как я понимаю, это МС выскокого разрешения. Я работаю на МС высокого разрешения, но на т.н. ДФСе. Аналиты регистрирую по четко заданным массам с точностью в четвертом знаке за запятой (на то он и есть высокого разрешения). В своем инструменте, как калибрант использую PFK. Ввожу порядка 1 микролитра в специальную камеру, через которую ПФК поступает в источник, перед каждой серией анализов и регулирую до нужной интенсивности пика массы, по которой ведеться настройка МСа. |
|||||
|
PROval Пользователь Ранг: 43 |
29.09.2009 // 13:46:41
С точки зрения пользительности для количественного анализа в порядке ухудшения QQQ, Q-TOF,TOF. И принципиальная разница между QQQ и ТОF- у времяпролетника нет никакой предварительной фильтрации по массам - все что после ионизации попало на путь истинный он и увидит, т.е. весь диапазон масс за раз. Вообщем-то TOF прибор скорее для скрининга, либо для количественного определения, но когда требуется количество нескольких веществ. |
|||||
|
Spectrometrist Пользователь Ранг: 777 |
29.09.2009 // 14:24:13
Редактировано 1 раз(а) Пока очень коротко, продолжу если будет интерес к деталям: принципиальнейший момент - динамический диапазон TOF сравител'но мал, внимател'но следите за интенсивностью целевых пиков и не "перегружайте" . Первый и важнейший признак проблем - нарушенное изотопное распределение и странно хорошее разрешение посчитанное по интенсивным пикам. Посмотрите на досуге: Chernushevich, I., Loboda, A. and Thomson, B. (2001) An introduction to quadrupole time-of-flight mass spectrometry. J. Mass Spectrom., 36, 849-865. очень хороший обзор / tutorial! Проблемы TOFов там классно раз'яснены Кстати, обсуждать можно полезнее если вы укажете на какой машине вы собираетесь работать - есть существенные различия в оптимизации. Скажем, где то можно варьировать puls rate, где то нет |
|||||
|
shukova_v Пользователь Ранг: 9 |
29.09.2009 // 14:50:18
Редактировано 1 раз(а) petroleum, спасибо за ответ! Вы регистрируете ТОЛЬКО конкретные заданные массы, или весь диапазон, а затем уже строите масс-хроматограммы? PROval, спасибо... насчет того, что трипл квад или QTOF лучше: в нашей ситуации выбирать не приходится, т.к. прибор уже есть. Spectrometrist, спасибо за ссылку! Хотя там обзор по QTOF, а у нас просто TOF, но все равно очень полезно будет почитать... У нас масс-спектрометр модели AccuTOF, JEOL, с электроспреем и ВЭЖХ. Разрешение около 6000. |
|||||
|
shukova_v Пользователь Ранг: 9 |
29.09.2009 // 14:54:06
Интерес к деталям очень большой! 
|
|||||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|||||
|
petroleum Пользователь Ранг: 6 |
29.09.2009 // 15:35:56
Регистрируем отдельные m/z характерные для опр. компонентов. К примеру: 319,8965 и 321,8936 характерен для 2,3,7,8-тетрахлородибензо-п-диоксина.След-но идет построение масс-хроматограмм по двум этим m/z и уже исходя из этих данных делаеться расчет. |
|||||
|
shukova_v Пользователь Ранг: 9 |
29.09.2009 // 16:08:24
petroleum, a разве можно указать массу с точностью до четвертого знака и без какого-либо интервала, в котором эта масса регистрируется? В тофах так? Опять же, вопрос навеян квадрупольным опытом, но там сканирование... |
|||||
|
petroleum Пользователь Ранг: 6 |
29.09.2009 // 16:18:04
Я так понимаю массы привязки (в моемслучае из ПФК) обеспечивают эту точность...они и задают интервал... |
|||||
|
Vladimir61 Пользователь Ранг: 63 |
30.09.2009 // 8:02:57
Насколько я знаю для TOF считается очень хорошей точность определения m/z меньше 1 ppm . Для иона 320 это составит +/- 0.0003 а.е. |
|||||
|
kremlin555 Пользователь Ранг: 24 |
30.09.2009 // 8:34:29
Было бы проще если бы Вы указали загадочную HPLC-ESI-TOF-MS систему которую надо освоить. Можно дать больше конкретных предложений. |
| |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
