| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Количественный анализ липидов >>>
|
 |
| Автор | Тема: Количественный анализ липидов | |||||
|
LVD Пользователь Ранг: 219 |
 14.10.2009 // 6:36:23
Уважаемые коллеги! Перед нами поставлена задача количественного анализа липидов из растительного материала (листья) Причем речь идет и о фосфо-, глико-, и т.д. липидах, а также о три-,ди- и моноглицеридах. 1. Экстракция, разделение и очистка: - экстрагировать умеем, делить собираемся на патронах (пожелание заказчика, хотя мы предпочли бы колонки с силикагелем), тоже кое-какой опыт есть. 2. Количественный анализ. Понятно, что при наличии LC-MS и стандартов было бы проще. Стандарты купить собираемся. фосфолипиды - по фосфору, гликолипиды по галактозе, по соответствующим методикам. А вот с три- ди- и так далее меня гложут сомнения. Заказчик мечтает, что после хорошей очистки ТАГ и других глицеридов можно спектрофотометрически померить количество, даже длину волны притащил - 205 нм. А я думаю, что ничего там специфически не поглощает и нужно красить и гидролизовать, т.е. наоборот? И сигма торгует киты куда входит липаза, реагент для окарашивания и собственно стандарт. Может кто-нибудь занимался подобными задачами, будем благодарны очень за совет. П.С. Что в целом задача очень объемная понимаем... |
|||||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
||||||
|
sinthetic Пользователь Ранг: 3598 |
14.10.2009 // 6:39:21
При 205 нм не поглощает только ну очень ленивое соединение. |
|||||
|
LVD Пользователь Ранг: 219 |
14.10.2009 // 7:06:23
+100 |
|||||
|
virtu VIP Member Ранг: 2135 |
14.10.2009 // 11:54:30
Редактировано 2 раз(а) ELSD ... Вы делить собираетесь методом ВЭЖХ? УФ можно, только пробоподготовка усложняется, особенно если при 205нм. Я про ВЭЖХ-УФ Но если Вы собираетесь сумму мерить просто СФ после очистки, то, на мой взгляд, замучаетесь чистить, вероятность "кривого" результата возрастает относительно ВЭЖХ-УФ, получиться, скорее всего... Вот с липазой и окрашиванием другое дело, остановитесь на нем, не тратьте время на СФ. Можно проще (на мой взгляд) - ВЭТСХ + "красить" (если денситометр есть, хотя можно фото или сканер приладить) Публикаций тьма - у меня даже где-то монография валялась, более менее свежая, если надо... Вообще, почему бы Вам не взять ТСХ за основу и материала куча наработана, тут Вам и полу- или количественный анализ. Правда, если заказчик рогом на патронах уперся - увы... На патронах фракционировать... Времязатратнее будет. |
|||||
|
LVD Пользователь Ранг: 219 |
14.10.2009 // 13:06:20
Спасибо за ответ. Монографию хорошо бы, если есть в электронном виде и подъемного объема, то мой мэйл laser{coбaчkа}sifibr.irk.ru. Заранее благодарны. |
|||||
|
Lipids Пользователь Ранг: 459 |
14.10.2009 // 18:23:26
Вообще говоря, у вас достаточно простая задача комплексного анализа липидов в растении. С точки зрения липидного анализа - ваш объект - простейший. Однако, подход все таки лучше избрать классический, по моему. Основными методами лучше избрать ТСХ для качественного анализа и ВЭЖХ-ELSD и спектрометрию для количественного (фосфор в фосфолипидах). Возможно, патроны не лучший вариант в количественном анализе, однако, если бы вы сказали подробнее про объект - было бы проще вам что-то посоветовать. В листьях будет много полярных и совсем неполярных (воска и т.п. неомыляемое) липидов. |
|||||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|||||
|
LVD Пользователь Ранг: 219 |
15.10.2009 // 11:23:17
Спасибо за ответ. Детектора по светорассеянию у нас к сожалению нет. ВЭЖХ у нас Шимадзу с УФ-детектором. Спектрофотометр, конечно, есть. Объект - листья яблони сибирской, 2х разных экологических форм, собраны в процессе вегетации. |
|||||
|
virtu VIP Member Ранг: 2135 |
15.10.2009 // 15:09:35
Пишет, что такого адреса не существует. Напишите мне на utriv(собака)mail.ru |
|||||
|
gingerino Пользователь Ранг: 207 |
15.10.2009 // 16:24:51
Классически количественно измерить содержание всех перечисленных классов липидов можно методом ГЖХ по содержанию жирных кислот. Для этого после разделения липидов на отдельные классы (любым способом - ТСХ, жидкостной колоночной хроматографией, ТФЭ) их нужно гидролизовать ну и прометилировать, конечно. К тому же и информативность для вашего случая будет выше, потому что при разных экологических условиях молекулярные формы, например, фосфолипидов должны быть разными. |
|||||
|
LVD Пользователь Ранг: 219 |
16.10.2009 // 6:28:08
Спасибо за совет. Для нас это было бы наилучшим вариантом, поскольку ЖК-анализ мы делаем некий опыт есть. Попробую поговорить с заказчиком. |
|||||
|
Lipids Пользователь Ранг: 459 |
16.10.2009 // 6:54:00
В данном конкретном случае - нельзя измерить таким образом все липиды. В липидах листьев значительно содержание восков и т.п. неомыляемых липидов, где через жирные кислоты соотношение не померить. Я посмотрю - какую-нибудь простенькую методику определения общих липидов высших растений, может таже в листьях что-нибудь найдется. В принципе, такие работы интенсивно делались годах в 50-х - 60-х, думаю что и инструментарий будет доступным и результаты получатся ближе к классическим. |
| |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
