Определение титров экдистероидов в насекомых методом ВЭЖХ

Тезисы VII конференции "Аналитика Сибири и Дальнего Востока - 2004" »
Стендовые доклады » Стендовая Секция V. Анализ биологических, медицинских и фармацевтических объектов » ...

Определение титров экдистероидов в насекомых методом ВЭЖХ

Алексеев А.А.¹, Комарова Т.Н.²

1 - Институт химической кинетики и горения СО РАН, ул. Институтская 3, Новосибирск 630090 E-mail: alekseevnioch.nsc.ru

2 - Новосибирский институт органической химии СО РАН, пр. Лаврентьева 9, Новосибирск 630090 E-mail: komarovanioch.nsc.ru

Экдистероиды являются одними из главных гормонов насекомых и участвуют в регуляции важнейших физиологических процессов. Отработана методика подготовки проб и определения титров экдистероидов (экдизона и 20-гидроксиэкдизона) в гомогенатах целого тела и в гемолимфе насекомых методом обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии. Процедура подготовки образцов из гемолимфы и гомогенатов тела насекомых включала экстракцию EtOH, делипидизацию, концентрирование с использованием концентрирующего патрона Диапак С16. Анализ проб поводили на хроматографе Agilent 1100 с УФ-детектором, на колонке Диасорб-С16Т, в изократическом режиме, элюировали смесью ацетонитрил: вода (20: 100 v/v). Определены пределы обнаружения с использованием стандартов (экдизон, 20-гидроксиэкдизон, инокостерон). С помощью этого метода можно проводить количественные измерения экдистероидов в насекомых при титрах превышающих 30 нг/мл гемолимфы или нг/г веса тела.