3Институт клинической и экспериментальной медицины СО РАМН

lavrikkinetics.nsc.ru

Сыворотка крови является одним из основных объектов анализа при диагностике различных заболеваний. В связи с этим несомненный интерес представляют методы экспресс анализа её состояния. В частности, в качестве таковых могут применяться такие методы электронной спектроскопии как поглощение и флуоресценция. Целью данной работы было изучение влияния условий приготовления сыворотки крови на её спектры поглощения и флуоресценции.

Вариация условий приготовления сыворотки крови осуществлялась за счёт помещения крови в разные по адгезионным свойствам стаканы для центрифугирования. Это различие в адгезионных свойствах приводит к тому, что при центрифугировании количество разрушенных эритроцитов цельной крови в разных стаканах различно, что, в конечном счёте, должно найти своё отражение в спектральных свойствах получаемой сыворотки крови. Контрольными экспериментами были измерения сыворотки крови, полученной без центрифугирования.

Спектры поглощения были получены на спектрофотометре «Брукер». Наблюдения велись за интенсивностью полос поглощения, принадлежащих оксигемоглобину (спектральный диапазон 400 – 600 нм). Спектры флуоресценции были получены на спектрометре с лазерным (азот) возбуждением. Наблюдения велись за спектрами флуоресценции сыворотки крови с максимумом на 490 нм, для которых измерялась величина первого момента. Было установлено, что при получении сыворотки крови для одного и того же человека в разных стаканах спектры поглощения по интенсивности заметно различаются (2-3 раза). Напротив значительных различий в спектрах флуоресценции (по вариации 1 момента) тех же самых образцов замечено не было. Таким образом, показано, что метод абсорбционной спектроскопии более чувствителен к состоянию получаемой сыворотки, чем флуоресцентный. Это означает, что для экспресс анализа на качество получаемой сыворотки крови более предпочтительно использовать абсорбционные методы.