Российский химико-аналитический портал | химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
|
ANCHEM.RU » Литература » Справочные, учебные материалы / книги » ... |
Тезисы VII конференции "Аналитика Сибири и Дальнего Востока - 2004"
» Устные доклады » Секция 5. Анализ биологических, медицинских и фармацевтических объектов » ... Количественная оценка функционального состояния клеток и их взаимодействия в суспензии с помощью лазерного анализатора микрочастицШорина Г.Н., Стуров В.Г., Миндукшев И.В., Антонов А.Р. Новосибирская государственная медицинская академия, Новосибирск В работе представлена информация о применении лазерного анализатора микрочастиц «Ласка-Био» (НПФ «Люмекс», С-Петербург) для количественной оценки агглютинации, агрегации клеток крови, иммунного и неиммунного лизиса клеточных субстанций, а также свойств поверхности и формы клеток. Прибор работает по принципу малоуглового светорассеяния. Интенсивность рассеяния света от лазерного источника, направленного под углом 90о на кюветы регистрируется фотодиодами в углах: 2,4,6,8,10,12о. Сигнал из фотодиодов через первичный блок преобразования выводится на PC. Состояние клеток, их взаимодействие, реакция клеток на регулирующие и повреждающие воздействия осуществляется в суспензии клеток, растворенных в солевой среде. Условия оптимального количества клеток и регулирующего воздействия подбирается в каждом конкретном случае. Программное обеспечение прибора позволяет получать графическое изображение изменения состояния клеток, кинетику их взаимодействия (агглютинация, агрегация и т.д.), визуализированного на угловой диаграмме (индикатрисе), исследующего расчетные параметры: ЕС-50 – значение полумаксимальной эффективной концентрации БАВ, Umax - нормированной (по концентрации клеток) максимальной скорости взаимодействия клеток, обусловленную поверхностными свойствами клеточной мембраны, а также С- концентрации клеток в единице объема (1 мкл). Используя запатентованную методику малоуглового светорассеяния, апробирован метод функциональной оценки клеточного взаимодействия. Количественная характеристика статуса тромбоцитов основывается на оценки величины ЕС50, которая связана с чувствительностью P2YADP-пуринорецепторов к АДФ. Вещества, увеличивающие внутриклеточную концентрацию циклических нуклеотидов, конкурентно ингибируют агрегацию. Предварительная активация тромбоцитов (без агрегации) в дальнейшем приводит к снижению чувствительности клеток к АДФ. Показана возможность аппаратной количественной регистрации реакции гемагглютинации при использовании минимального объема агглютининов и крови. В ответ на повышение внутриклеточной концентрации кальция, активируется аденилатциклаза, и при отсутствии дополнительного стимула, необходимого для ее угнетения, клетки переходят в рефрактерное состояние. Было показано, что для развития рефрактерного состояния достаточно только активации клеток. Были оценены временные константы (k) и периоды полуразвития рефрактерного состояния (t1/2). Можно предположить, следующий сценарий процесса. В ответ на повышение внутриклеточной концентрации кальция, активируется аденилатциклаза, и при отсутствии дополнительного стимула, необходимого для ее угнетения, клетки переходят в рефрактерное состояние. Нарушение в процессе развития рефрактерности может быть одной из причин развития массового тромбоза. Таким образом, вышеописанный способ количественной оценки перспективен для использования в любых клинико-дигностических тестах, основанных на агглютинации, агрегации, лизисе клеток, преципитации частиц. Представленный новый
метод позволяет оценивать функцию
клеток двумя параметрами: ЕС50 и UМАХ,
что позволяет количественно
характеризовать функциональную
активность тромбоцитов и эритроцитов.
Данный метод удобен для сопоставления
данных из разных серий опытов.
Дополнительный графический анализ
данных позволяет дать предварительную
оценку механизма нарушения клеточного
статуса как в условиях эксперимента,
так и в клинической практике. |
«
Назад | Содержание |
Далее »
ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
Размещение рекламы / Контакты |