| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Высокое давление на ВЭЖХ-колонке >>>
|
 |
|
DSP007 VIP Member Ранг: 2228 |
 07.01.2010 // 16:38:36
Вы ипользуете стандартный аджилентовский каппиляр на 0,18 мм со стальными конусами? Если да- то передавить стальным конусом столь тонкий каппиляр - нефиг делать! Скорее всего у вас каппиляр на входе или выходе из кологки передавлен нежными ручками. Ищите замену в рем комплекте, или отвинчивайте каппиляр от колонки и прибора , пробуете его продуть ( ртом в воду). Если воздух не проходит через каппиляр совершенно свободно- значит он передавлен. Отрезаете фрагмент со сплющенным в конусе капилляром и на остаток ставите новый конус , лучше всего из PEEK. |
|||||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
||||||
|
Prolabor Пользователь Ранг: 581 |
07.01.2010 // 20:16:22
DSP007, браво!  Логично что могла не проверить. |
|||||
|
efz Пользователь Ранг: 13 |
07.01.2010 // 20:16:40
Вот и ответ на вопрос почему другое количество ТТ. Что касается детектора. В общем случае детектор не влияет на эффективность. Если конечно не происходит дополнительного размытия в камере детектора (но тогда вы получите не просто уширение пика, а размытие заднего фронта). Вы определяете содержание аналита в чем (матрица)? Что содержит раствор, который Вы вводите в хроматограф? Опишите все стадии методики (пошагово) перед вводом в хроматограф. Попробуем разобраться. Вы пробовали добавлять ацетонитрил после того как колонка "забилась"? А что значит размытие заднего фронта - это когда очень долго пик "опускается"? Вот я это и наблюдаю... Я вручную уже считала число ТТ, и понимаю, что пик слишком широкий, и расширен он за счет своей низходящей части... Раствор, который я ввожу в хроматограф, содержит определяемое вещество - Холинальфосцерат растворенный в воде, все... Я тоже допускала, что проблема в веществе возможно, но у меня несколько образцов, я все перепробовала - разницы никакой!!! После того как колонка забилась я пробовала все - ацетонитрил, изопропанол, метанол, может последние два не надо было... от безысходности((( На метаноле хотя бы минуту раствор проходит через колонку, я визуально вижу, колонку отсоединила. Да, еще я странный звук в колонке слышала, такое тонкое трещание, и сразу после этого резко повышалось давление. Правда трещание было недолгим))) несколько раз, потом трещать перестало, но давление все равно возростало и раствор через колонку переставал проходить.... спасибо Вам что пытаетесь помочь))) |
|||||
|
efz Пользователь Ранг: 13 |
07.01.2010 // 20:25:06
Да, конусы стальные, но я отсоединяла все соединения, давление растет на входе в колонку, ну или на выходе из нее, т.е. из капилляра предколонки, который вкручивается в колонку - все замечательно "капает", пережатия нет... или возможно когда я вкручиваю, то пережимаю????? Это вариант))) обязательно проверю... у меня есть стальной капилляр, только оч. длинный, я его заменила на полипропиленовый, чтобы уменьшить "мертвый" объем за счет укорачивания соединений...ух, е-к-л-м-н.... |
|||||
|
tooosya1 Пользователь Ранг: 14 |
07.01.2010 // 22:10:43
У меня прибор LC 5000, может дело не в колонке, а в приборе.Если вы пишете , что на другом приборе все ок! У меня была такая ситуация, причина была в том , что при установке колонки пережала капиляр который подключала к колонке. Отрезала 1 см капиляра (это очень трудно) и давление установилось. |
|||||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|||||
|
12345 Пользователь Ранг: 661 |
07.01.2010 // 23:32:08
Вы работаете с рефрактометрическим детектором. Хотя, я думаю, Вы с ним правильно обращаетесь, но если не уверенны в этом, то убедитесь, что делаете всё по инструкции. Так же убедитесь, что вводите не слишком много пробы. Когда вводите слишком много пробы, то пик может быть слишком толстым. |
|||||
|
Prolabor Пользователь Ранг: 581 |
08.01.2010 // 5:00:12
хоть это и не решает проблемы - замечание уместно к дальнейшим действиям после "восстановления нормального давления". efz, какую концентрацию (а лучше количество вещества-аналита в X*10-Yг) вводите в анализе? |
|||||
|
efz Пользователь Ранг: 13 |
08.01.2010 // 15:31:59
Концентрация раствора около 16,5 мг/мл, это многовато для СФ-детектора, а для рефрактометрического думаю нормально. К тому же в московской лаборатории делали такую же концентрацию, у них в отчете в приложенных хроматограммах это было написано. Вообщем я попытаюсь заменить капилляр, если получится решить проблему, то я сначала попробую протестировать колонку тестовой смесью (кстати, что такое IPA?, изопропанол...что там далее, это вещество прописанов ПФ для тестирования колонки). Потом, если все хорошо с тестовой смесью, заколю раствор кофеина на СФ-детекторе и на рефрактометрическом. Только бы удалось решить проблему с давлением)))) |
|||||
|
Prolabor Пользователь Ранг: 581 |
09.01.2010 // 11:30:17
Это около 2*10-5г/мкл, если петля 10 мкл - это уже 2*10-4г в вводимой пробе. Не многовато ли? Это перегрузка колонки, неудивительно, что у вас размывается пик и низкая эффективность. Вы пишете, что в Москве делали такую же концентрацию. Но сколько у них вещества попадало на колонку (зависит от объема вводимой пробы), не в 10 раз меньше? Разбавьте в 10-100 раз - будет самое оно
|
|||||
|
Prolabor Пользователь Ранг: 581 |
09.01.2010 // 14:17:05
Хмм.. у а у Вас на любой другой колонке прибор то работает? а то совершенно забыли про маловероятное... Вдруг не работает датчик потока. И автоматический регулятор пытается повысить давление, чтобы достичь необходимого потока. Поток не достигается, и регулятор задирает давление. |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 46
|
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
