| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Неожиданное раздвоение пиков в ВЭЖХ >>>
|
 |
| Автор | Тема: Неожиданное раздвоение пиков в ВЭЖХ | |||||
|
boberk Пользователь Ранг: 105 |
 10.05.2011 // 18:52:45
Редактировано 10 раз(а) Доброго времени суток. Помогите, пожалуйста, разобраться в проблеме. Неожиданно во время работы произошло раздвоение пиков.    Вколы делались с интервалом в час, контролировался выход в синтезе. Условия элюирования (Фаза А-MetOH:H2O(5:95), B-MetOH:H2O(25:75), везде 10mM KH2PO4). Колонка С18, 150х4,6. После этого промыл колонку сначала водой, а затем чистым ацетонитрилом, фазой и еще раз вколол.  Уже лучше, но форма пиков все рано отвратная. Фактически, в каждом случае по два слившихся. Буду благодарен за помощь и советы. Спасибо за внимание  |
|||||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
||||||
|
MeOH Пользователь Ранг: 487 |
10.05.2011 // 19:28:13
У Вас в колонке появилась полость, причин много, хорошо, что устаканилось а то обычно на выброс |
|||||
|
boberk Пользователь Ранг: 105 |
10.05.2011 // 19:31:11
В том то и дело, что не устаканилось. Возможно на последней картинке не очень хорошо видно, но там по ДВА пика в каждом случае. |
|||||
|
MeOH Пользователь Ранг: 487 |
10.05.2011 // 19:41:05
выбрасываю такие, но может кто подскажет как её можно более менее... как то баловался с такой: откручивал входную гайку давал просохнуть, закрывал, простукивал., если просело, то подмазывал сорбента из др колонки, что на запчасти, переворачивал даже и помогло, но мне все равно нельзя с такими работать, так что даже не думаю береги от пневмоударов |
|||||
|
Garry VIP Member Ранг: 1076 |
10.05.2011 // 21:20:06
Это продольный войд. Устранить можно разными способами. Если трещина слоя сорбента образовалась вверху, то просто-напросто надо отвинтить верх в колонке, " взлохматить" верхний слой сорбента на глубину 2-3 мм, затем прокачать ПФ. Очень часто помогает. Если войд внутренний, то это хуже, но тоже решаемо (возможно "китам" покажется варварским способом, но увы не я придумал, а вариант этот описан в умненькой аглицкой книженции). Колонку необходимо снять с хроматографа, закупорить заглушками и .... уронить с высоты Вашего роста на бетонный пол. Затем прокачать ПФ и протестировать. Если надо первоисточник, то называется книженция "Practical High-Performance Liquid Chromatography" FOURTH EDITION Veronika R. Meyer, Swiss Federal Laboratories for Materials Testing and Research (EMPA), St. Gallen, Switzerland Издательство JOHN WILEY & SONS 2004 года, 351 стр. |
|||||
|
Пал Палыч Пользователь Ранг: 184 |
11.05.2011 // 2:24:03
Очень интересное решение проблемы. А как ронять то? (Вертикально, горизонтально). У меня такие эффекты когда-то наблюдались при частичном забивании входного фильтра на старых Шимадзевских колонках (нестандартно большого для аналитики размера, миллиметров 6, кажется). Что интересно, при переворачивании колонки "задом наперёд" этот эффект практически полностью исчезал... |
|||||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|||||
|
varban VIP Member Ранг: 8699 |
11.05.2011 // 2:32:44
Вертикально. Кстати, можно прикинуть перегрузки. И предложить мелкое усовершенствование метода Надо это дело на самотек не пускать, а по направляющей трубке - это раз. И два - ловить колонку после удара и отскока от пола Я колонки таким образом не ронял, но шашки и всякие заряды - сколько угодно
|
|||||
|
virtu VIP Member Ранг: 2135 |
11.05.2011 // 3:23:16
Void, void... Пики могут и не из-за "войдов" двоиться - есть и другие причины "деформации" хроматографических зон. Советую не "ломать копья", а как следует разобраться в ситуации... А использовать колонку не по назначению Вы всегда успеете. |
|||||
|
Alex_K Пользователь Ранг: 77 |
11.05.2011 // 9:15:30
Возможно входной фильтр колонки загрязнен, бывает инжекционная игла забивается. |
|||||
|
Andrew VIP Member Ранг: 1370 |
11.05.2011 // 9:15:48
Редактировано 1 раз(а) Вариант может быть и совсем другим. Вина узла ввода тоже не исключена. Мне знакома одна дама, которая (в ГХ) в 90% случаев умудрялась вводить пробу двумя порциями путем какого-го то своеобразного нажатия на поршень шприца. Картинки похожие были. А в случае колоночных проблем я разбирал колонку, менял входной фильтр и пару мм сорбента. Правдв это было с колонками 2 мм. Но думаю, что с 4,6 этот способ тоже пойдет, если полость в верхней части. Ну и противоток тоже может помочь. Эффективность скорее всего снизится, но, судя по Вашим хроматограммам, это не особо критично. |
|||||
|
Garry VIP Member Ранг: 1076 |
11.05.2011 // 9:34:35
Уважаемые коллеги, то что я предложил, как сами понимаете, чтобы сэкономить, не выбрасывая колонку, согласно совета уважаемого МеОН. "За спрос не бьют в глаз", но эффективность сего действия подтверждена неоднократно. Можно, конечно и противоток устроить. Если войд вверху колонки, то он легко устраняется. "Бросание на пол" - в тяжелых случаях среднего войда, что бывает довольно редко. Чаще бывает верхний. Лечится это, как я уже сказал легко . Кстати, "двойной ввод" может быть действительно из-за узла ввода. Так что прежде чем лечить колонку, инжектор просмотреть и очистить дозирующие элементы. Что касается бросания колонки на пол, то зависит от структуры войда. Иногда бывает эффективной процедура горизонтального бросания. Можно прибегнуть и пресловутой Варбановской трубке , чтобы не ловить , колонку по всей лаборатории, роняя вниз верхним концом колонки.
|
| |
||
|
Ответов в этой теме: 23
|
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
