Форумы ANCHEM.RU: Мы купили хиральную колонку...

Российский химико-аналитический портал

химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов

карта портала ::: расширенный поиск

ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Мы купили хиральную колонку... >>>

  Ответов в этой теме: 29
  Страница: 1 2 3
  «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]

Farma
Пользователь
Ранг: 382

03.07.2007 // 11:25:19

chrom пишет:
Мое почтение, Коллеги!

Очень нужен совет специалистов, дабы избежать хроматографических жертв
Проблема в том, что никак не можем вывести на рабочий режим недавно приобретенную за немалые деньги колонку Diacel Chiralcel OC-H (tris-cellulose). Пытаемся уже 4 дня, но пик исследуемого вещества выходит сильно размытым и расщепленным. Анализ проводится на фазе метанол/этанол в соотношении 70/30, потоке 0,3 мл/мин и температуре колонки 40 градусов. Проба-30 мг в 50мл метанола. Изменение соотношения растворителей и температуры, вплоть до полного ее исключения, значимых результатов не дало.
Хроматограф один и работать чаще приходится в ОФХ. Перед установкой хиральной колонки систему перемыли в соответствии с рекомендациями в паспорте. Колоночное давление намного ниже предельно допустимого.
Подскажите пожалуйста, в чем может быть проблема? Уж очень не хочется колонку загубить, но очень хочется получить результат

Хоть я и не являюсь супер экспертом в области хиральных разделений, но немного повозиться пришлось...
У меня несколько мыслей возникло сходу: то, что пик расщеплён может быть добрым знаком - Ваш эпимер (или диастереомер) разделяется. Вы ведь не зря именно хиральную колонку выбрали?

А то,что форма у пика плохая - может быть результатом неправильного подбора рН подвижной фазы. Вы работаете на нейтральном элюенте (кстати, откуда такой странный состав?) и если Ваше вещество основное - естественно оно может "хвостить".

ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

chrom
Пользователь
Ранг: 28

03.07.2007 // 11:57:17

Редактировано 1 раз(а)

Пользователь удалил свое сообщение

Farma
Пользователь
Ранг: 382

03.07.2007 // 13:29:08

chrom пишет:
Как раз энантиомеры и пытаемся разделить. Мы тоже предположили, что вторая верхушка - неотделившийся изомер. Но уж больно велик, размером с основное вещество. Состав фазы указан в методике, которая взята из Европейской фармакопеи. В паспорте на колонку, кстати, указан абсолютно такой же состав подвижной фазы и скорость потока, на котором проводилось ее тестирование. Разница с нашей методикой состоит лишь в температуре колонки: у них - 25, у нас - 40. Но и при такой температуре (25) форма пиков не сильно меняется.
??? В чем же дело?

Назовите вещество, пожалуйста.

chrom
Пользователь
Ранг: 28

03.07.2007 // 17:58:53

Редактировано 1 раз(а)

Пользователь удалил свое сообщение

virtu
VIP Member
Ранг: 2135

03.07.2007 // 20:58:46

chrom пишет:
Пытаемся отделить S,S-энантиомер оксалиплатина от оксалиплатина.

А сорбент колонки случайно не перегрузили?Колонку подготавливали как нужно?Растворители?Может лучше было растворять в элюенте?

Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

	ГХ-МС Varian 320-MS GC/MS Тройной квадроуполь с ГХ Varian 450 GC. EI, PCI и NCI.
	[ Информация из каталога оборудования ANCHEM.RU ]

Farma
Пользователь
Ранг: 382

03.07.2007 // 21:52:39

chrom пишет:
Пытаемся отделить S,S-энантиомер оксалиплатина от оксалиплатина.

Да, неприятное соединение. Правда, я с ним не работал. Могу предположить следующее:
1) Так как основное соединение нестабильно, то могли наложиться продукты деградации
2)Вы могли перегрузить колонку, попробуйте снизить концентрацию
3)Так как Вы наверняка используете УФ детектирование в ранней части спектра, то на основные два вещества могли наложиться примеси (продукты деградации) с большей экстинкцией
4) Попробуйте всё таки забуферить систему (если это позволяет колонка). Хотя бы рН 5,5 - 6.
5) Попробуйте перерастворить пробу в подвижной фазе.

chrom
Пользователь
Ранг: 28

04.07.2007 // 21:22:24

Редактировано 1 раз(а)

Пользователь удалил свое сообщение

Farma
Пользователь
Ранг: 382

06.07.2007 // 1:40:35

chrom пишет:
К сожалению, колонка забуферить систему не позволяет. Малейшее отклонение от паспортных требований и фазе капут. Данную колонку специально заказывали только для этого препарата и ждали почти три! месяца. Растворение пробы в подвижной фазе результатов не дало. Концентрация нашей пробы даже меньше, чем концентрация тестовой смеси по паспорту, т. е. перегрузка колонки маловероятна. Неужто бракованная? Заказали тестовую смесь, чтобы проверить. Но сколько еще ее ждать придется. Мозги уже вывихнули, честное слово! А начальство результат хочет

Хороший результат на тестовой смеси - не показатель. С реальной пробой может быть всё по другому. А в фармакопее тоже лажи много. А ЯМР, ПМР спектры что говорят, сколько веществ в смеси?

oma12
Пользователь
Ранг: 54

08.07.2007 // 17:22:31

День добрый. Насколько я поняла, колонка покупалась у Chiral Technologies, может, попробуйте списаться с ними? Там довольно душевный народ работает, к вопросам клиентов относится доброжелательно и чего умного посоветовать могут. Кстати, фаза действительно нежная, с буферами осторожно нужно...

chrom
Пользователь
Ранг: 28

09.07.2007 // 22:18:15

Редактировано 1 раз(а)

Пользователь удалил свое сообщение


Ответов в этой теме: 29 Страница: 1 2 3 «« назад \|\| далее »»	Ответ на тему

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU: [ Все новости ]

Размещение рекламы / Контакты