| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Изолирование фенотиазинов из плазмы крови >>>
|
 |
| Автор | Тема: Изолирование фенотиазинов из плазмы крови | ||
|
Slawa Пользователь Ранг: 323 |
 09.03.2006 // 16:45:08
Здравствуйте. Существует следующая проблема: необходимо изолировать производные фенотиазинов (органические основания с pK(BH+)=6-9) из плазмы крови и идентифицировать их методом ТСХ. Содержание веществ в плазме 1 мкг/мл. Чувствительность определения методом тсх 0,5-1 мкг в пятне. Доступные методы изолирования: жидкость-жидкостная экстракция и твёрдофазная экстракция на немодифицированном силикагеле (ну нет у меня другого сорбента). Вопросы: Решаема ли эта задача в принципе? В каком направлении двигаться? Что-бы почитать по этой теме (ссылки)? |
||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|||
|
Slawa Пользователь Ранг: 323 |
09.03.2006 // 16:47:52
ps Белки попробовал осаждать трихлоруксусной (ТХУ) кислотой (2 мл плазмы). Экстрагировал в 5 мл хлористым метиленом при pH 9-10 (аммиак). Хлористый метилен выпарил в токе воздуха, и количественно перенёс сухой остаток на пластинку. Столкнулся со следующими проблемами: 1. Возможны потери из-за связывания с белками; 2. После выпаривания органики остаётся много грязи (вероятно липиды и жирные кислоты), которые мешают определению (перегружают пластинку и сильно фонят). 3. Естественно проблемы с количественным переносом веществ из экстракта на пластинку. |
||
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
09.03.2006 // 17:09:15
Есть и другие сорбенты... было много топиков по этим темам.. попробуйте поиск, ключевое слово - ТФЭ.. |
||
|
Slawa Пользователь Ранг: 323 |
09.03.2006 // 17:24:15
Редактировано 1 раз(а) Понятно, что сорбенты есть, и ссогласно литературным данным для веществ подобного типа наиболее часто используют модифицированные силикагели с-16, с-18. Но жидкость-жидкостная экстракция предпочтительней, потому-что пока в моей конторе раскошелятся на сорбенты пройдёт 3-4 месяца. Приходится работать с тем, что есть. Вопрос в другом: Возможно ли вообще решить подобную задачу, учитывая низкие концентрции веществ и невысокую чувствительность методики (плазмы то на анализ можно взять от силы 5-10 мл)? Занимался ли кто-либо чем-то подобным, может ли он дать какие-то методические рекомендации. |
||
|
Slawa Пользователь Ранг: 323 |
09.03.2006 // 17:24:20
Редактировано 1 раз(а) user wiped their message |
||
|
Korvet Пользователь Ранг: 1114 |
09.03.2006 // 17:51:46
Ну проводя аналогию с др. лек. средствами в биообъектах надо бы гидролиз наверное сначала, типа кислотный. Ну чтобы от жиров избавиться попробуйте гексаном экстрагировать подкисленный образец. Нормально-фазовая ТФЭ наверное не подойдёт, надо бы либо катионообменную, либо С18, либо смешанный вариант. И ещё: при гидролизе сами фенотиазины могут распадаться. Если есть возможность сделайте модельный опыт с чисыми веществами. чтобы определить рф продуктов из гидролиза. ПОд руками пока нету рельной методики для анализа. всё описанное плод моей фантазии. |
||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
||
|
Леонид VIP Member Ранг: 5266 |
10.03.2006 // 9:48:00
Если есть силикагель - уже не так и мало. Поставьте несколько экспериментов на ТСХ и выберите элюент средней полярности (бутилацетат, этилацетат или их смеси с кетонами или спиртами) на котором бы целевые вещества сидели бы на старте, а липиды и другая неполярщина уверенно ползли бы с растворителем по пластине. Если элюент будет содержать не очень много полярного растворителя, можно надеяться, что целевые вещества будут удерживаться на силикагеле за счет силанольных групп по тому же ионообменному механизму. Потом эту систему можно смело переносить на ТФЭ. Смывать с ТФЭ патрона можно ацетонитрилом и/или метанолом с водой. Короче - есть варианты, и их не мало. А вообще то патроны для ТФЭ стоят образно говоря копейки. И может не стоит делать проблему с их приобретением? Уж несколько сотен деревянных у Вашей конторы наверняка найдется. |
||
|
Andrew VIP Member Ранг: 1370 |
10.03.2006 // 12:19:02
Посмотрите ветку: Там фигурируют буржуйские ссылки от Островитянина. Гидролиз не в коем случае. Фенотиазины валятся от неосторожного взгляда.  Оптимальная экстракция при рН 11-13 диэтиловым эфиром. По фенотиазинам докторская диссертация (фарм. науки) Саломатина. Из последних работ - кандидатская Клищенко Р. (РоманК на форуме). Поищите авторефераты в библиотеках. Или библиографический поиск по фамилии автора. Штук пять-десять статей и докладов у него было. Чем проявляете? Мне лично нравится 10% хлорное железо или концентрированная серная в этаноле (1:9), только без нагревания, чтобы меньше ложноположительных результатов получить. |
||
|
Andrew VIP Member Ранг: 1370 |
10.03.2006 // 12:22:47
Нашел автореферат. ЖАХ, 2003 № 7, с. 722 Изв. вузов. Северокавказский регион. 2005 № 3 с. 215 ЖАХ, 2006 № 1, с. 6. |
||
|
Korvet Пользователь Ранг: 1114 |
10.03.2006 // 18:24:18
Ну и что Andrew, что они разваливаются, вот продукты распада и искать, как например бензодиазепины. |
||
|
Andrew VIP Member Ранг: 1370 |
12.03.2006 // 20:01:31
Редактировано 1 раз(а) Продукты распада дают только групповое обнаружение. Задача, давно решенная. Думаю, что автора интересует более точная идентификация, иначе брали бы не кровь, а мочу. Хлопот гораздо меньше. |
| |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
