| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Как отмыть колонку Agilent ZORBAX Eclipse AAA от фосфатного буфера >>>
|
 |
|
Шушечка Пользователь Ранг: 518 |
 18.02.2019 // 6:06:49
из личного опыта: на фосфатном буфере работать проблематичнее, чем на цитратном , при условии что рН близка к нейтральной... уж очень любят такую среду всякие микрооганиЗЬмы))) приготовление буферов мне кажется не в брошюре производителя смотреть , а уж лучше в фармакопею заглянуть и смотреть по паспорту колонки в каких пределах рН возможна работа ее |
||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|||
|
SergeyK Пользователь Ранг: 2168 |
18.02.2019 // 9:50:40
Редактировано 2 раз(а) Цитрат выше 6.2 ну такой себе буфер, вроде, как вы помните общую химию. Если одного регулирования ионной силы хватит для разделения, ацетат аммония тогда уж. Альтернатив фосфату во многих задачах нет или это что-то дорогое (пипес, хепес) или непрозрачное в УФ (они же). Азид натрия 0,1% обычно спасает отца русской демократии, иногда спасает уф-лампа superon solaris в бутылку с буфером, но она импортная и дорогостоящая. Я аквариумную лампу с али с цифровым таймером с али приспосабливал: |
||
|
Шушечка Пользователь Ранг: 518 |
19.02.2019 // 6:09:22
я помню общую химию.. а вот если Вы помните начало запроса ТС, то именно стоял вопрос менять/не менять фосфат на цитрат... так вот я и ответила, что я бы лично поменяла.. ИМХО |
||
|
SergeyK Пользователь Ранг: 2168 |
19.02.2019 // 7:53:17
На ацетат. |
||
|
Шушечка Пользователь Ранг: 518 |
19.02.2019 // 8:14:59
можно и ацетат рассмотреть... но я честно скажу не люблю фосфатные буферы))) но это из главы " Я девочка- мне можно!"))) |
||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
||
|
Vilkaceraptor Пользователь Ранг: 10 |
19.02.2019 // 10:49:35
Редактировано 1 раз(а) Коллеги приветствую. В общем промывка пока не даёт ощутимых результатов. Всю магистраль промыл, с ней все нормально, давление там в порядке. А вот на колонке на бидистиляте давление ниже 130 не опускается. Промывал, как вы советовали. Колонку поставил на противоток, начал с воды, потом перешел на 50*50 H2O - ACN+MeOH+H2O (45+45+10), затем промывал чистым ACN, затем опять водой, и так три раза. Сейчас поток поставил на бисдистелят, стандарты пока не прокалывал, поэтому сказать, промылась колонка или нет не могу. Меня смущает давление которое не падает. Диметилсульфоксид пока не использовал. Может посоветуете еще чего? И еще вопрос, как промывать предколонку? Да кстати, вот нашел Аджилентовскую фазу на ацетате, похожа на те что я видел в других местах, только добавили еще ЕДТА The mobile phase for channel A is a 20 mM sodium acetate buffer containing 0.018 % (v/v) triethylamine (TEA), adjusted to pH 7.2 with 1 - 2 % acetic acid, and with 0.3 % tetrahydrofuran (THF) and 50 l EDTA stock solution added. The following instructions are for 500 ml of channel A buffer. |
||
|
voodensky Пользователь Ранг: 531 |
19.02.2019 // 12:31:56
Предколонка на то и предколонка, чтобы ее выбрасывать, а не мыть. Давление на колонке, надеюсь, без предколонки смотрите? |
||
|
Vilkaceraptor Пользователь Ранг: 10 |
19.02.2019 // 12:51:42
Да, давление без предколонки, правда пока смотрю на давление в обратном потоке. |
||
|
daemond91 Пользователь Ранг: 78 |
19.02.2019 // 13:12:01
Помойте горячей водой на обратном потоке. Всё хорошо будет)) |
||
|
voodensky Пользователь Ранг: 531 |
19.02.2019 // 13:12:23
Редактировано 3 раз(а) Странно обращеннофазовые колонки мыть чистым бидистилятом. Надо хоть немного органики. Мне в свое время несколько раз помогло вкалывание изопропанола (для С18). Просто ставил программу на 2 минуты с маленьким потоком, около 0,2 мл/мин, 50% ацетонитрила и вкалывал по 50 мкл изопропанола раз 50. Ну и если у вас щелочная ПФ и что-то село, то вымывайте кислой. Подкислите ПФ муравьинкой, уксусной или фосфорной. |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 40
|
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
