Форумы ANCHEM.RU: Муравьина кислота в повидоне.ВЭЖХ. Умирает колонка

Российский химико-аналитический портал

химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов

карта портала ::: расширенный поиск

ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Муравьина кислота в повидоне.ВЭЖХ. Умирает колонка >>>

  Ответов в этой теме: 22
  Страница: 1 2 3
  «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]

vmu
Пользователь
Ранг: 1388

02.04.2019 // 22:10:44

Виктория1102 пишет:
Считаете дело в воде? ПФ фильтровала через 0.2мкм

Может быть, дело в хлорной кислоте? А материал фильтра?

ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

Виктория1102
Пользователь
Ранг: 16

02.04.2019 // 22:10:56

Ассиметрия пика у меня 0,7 - 0,65
Пользуюсь последней версией ЕР 9.7 , сайт online.pheur.org/EN/entry.htm
Копирую статью:
Formic acid. Liquid chromatography (2.2.29).

Test solution. Dissolve a quantity of the substance to be examined equivalent to 2.0 g of the anhydrous substance in water R and dilute to 100.0 mL with the same solvent (stock solution). Transfer a suspension of strongly acidic ion-exchange resin R for column chromatography in water R to a column of about 0.8 cm in internal diameter to give a packing of about 20 mm in length and keep the strongly acidic ion-exchange resin layer constantly immersed in water R. Pour 5 mL of water R and adjust the flow rate to about 1 mL/min. When the level of the water comes down to near the top of the strongly acidic ion-exchange resin layer, introduce the stock solution into the column. Discard the first 2 mL of the eluate, then collect 1.5 mL of the solution and use this solution as the test solution.

Reference solution. Dissolve 0.100 g of anhydrous formic acid R in water R and dilute to 100.0 mL with the same solvent. Dilute 1.0 mL of the solution to 100.0 mL with water R.

Column:

– size: l = 0.30 m, Ø = 7.8 mm;

– stationary phase: strongly acidic ion-exchange resin R for column chromatography (9 µm);

– temperature: 35 °C.

Mobile phase: dilute 1 mL of perchloric acid R to 700 mL with water for chromatography R.

Flow rate: 1.0 mL/min.

Detection: spectrophotometer at 210 nm.

Injection: 50 µL.

Retention time: formic acid = about 8 min.

System suitability: reference solution:

– repeatability: maximum relative standard deviation of 2.0 per cent determined on 6 injections;

– number of theoretical plates: minimum 1000;

– symmetry factor: 0.5 to 1.5.

Виктория1102
Пользователь
Ранг: 16

02.04.2019 // 22:13:14

vmu пишет:
Посмотрел еще USP41. Там, похоже, методика такая же, как в EP 9.

Да, USP аналогична. я тоже проверяла.
Про материал фильтра сейчас ответить не смогу. Надо завтра посмотреть на работе

Шушечка
Пользователь
Ранг: 518

03.04.2019 // 6:24:52

Виктория1102
внешне даже неприглядный пик.. и коллеги правы: пик оооочень размыт.. 2 минуты выхода на пик это ну совсем ни в каике рамки

daemond91
Пользователь
Ранг: 78

05.04.2019 // 3:55:01

Виктория1102 пишет:
При заколе стандартного образца (р-р муравьиной кислоты) уменьшается число ТТ.

Вы точно правильно соблюдаете процедуру включения/уравновешивания/регенерации колонки?

Это мягкий полистирол, он легко разрушается/проминается потоком на входе колонки. Вы точно резко не включали поток подвижной фазы? Попробуйте развернуть колонку, установить поток что-то около 0,05 мл/мин, нагреть колонку на таком маленьком потоке до нужной температуры (например, градусов 60, или сколько там вам позволяет ваша басурманская фармакопея, затем очень плавно поднять поток до рабочего (0,5-0,6 мл/мин, или сколько по методике), и уже затем хроматографировать растворы муравьиной кислоты или что вы там определяете. Подвижная фаза тоже должна быть предварительно подогрета с использованием штатного теплообменника термостата колонки.

Колонки такие помирают не из-за кислот, а из-за того, что мягкий PSDVB - это очень капризный материал. Плохо пакуется, легко разрушается и не очень хорошо хранится.

Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

Испытательный центр ФГУ «Балтийская дирекция по техническому обеспечению надзора на море»
Федеральное государственное учреждение «Балтийская дирекция по техническому обеспечению надзора на море» создано в соответствии с распоряжением Правительства Российской Федерации и осуществляет свою деятельность на территории Российской Федерации, во внутренних морских водах, территориальном море, в исключительной экономической зоне и на континентальном шельфе Российской Федерации.

Vagabond
Пользователь
Ранг: 46

07.04.2019 // 8:56:37

Времена удерживания муравьиной кислоты слабо, но все таки изменяются. Это связано с насыщение вашей катионообменной колонки катионами металлов. Источник металлов скорее всего хлорная кислота, но может быть и муравьиная. Колонка Supelcogel C-H610 работает по принципу ионной-эксклюзии и постепенное насыщение ее металлами (скорее всего Fe3+) приводит к изменению эффективности. Ионообменная емкость колонки большая, но даже незначительно отравление части катионообменника приводит к изменению эффективности. Возможно у вас металлический хроматограф, в котором есть источник отравления.
Можно попробовать отмыть колонку и проверить.

SergeyK
Пользователь
Ранг: 2168

07.04.2019 // 11:25:39

Процедуры пассивации нерж стали для ВЭЖХ хорошо описаны:
www.agilent.com/cs/library/Support/Documents/Passivation%20for%20ILC.pdf
www.waters.com/webassets/cms/library/docs/lah376.pdf
onlinelibrary.wiley.com/doi/pdf/10.1002/3527600744.app2
www.chromforum.org/viewtopic.php?t=16834

Но это может быть и вода. Фильтрация не избавляет от растворенных веществ, ионов, мономерных и олигомерных кусков ионообменной смолы с картриджей и т.д.

Vagabond
Пользователь
Ранг: 46

07.04.2019 // 21:06:57

Если бы все так просто было с пассивацией 316 стали, то из нее и продолжали бы выпускать ионные хроматографы. Однако, от этого отказались более 25 лет азад и их делают полностью из пластика. ИСП-МС все равно показывает наличие металлов в эффлюенте металлического хроматографа и степень отравления сульфокатионообменника можно легко проверить.

Vagabond
Пользователь
Ранг: 46

07.04.2019 // 21:40:34

Да, еще. Возможно, причина совсем простая на стадии ввода пробы. Скажем, металлическая игла из непонятного металла. Или, старый шприц, например, выпуска SGE, из которого лезет меди немеряно.

SergeyK
Пользователь
Ранг: 2168

07.04.2019 // 22:13:49

Редактировано 3 раз(а)

Вопрос лишь в количестве ионов и скорости растворения стали. Не теоретическом, а практическом. Колонка-то - огромное весло диаметром 7,8 мм. И она не в корпусе из PEEK и даже не PEEK-lined, а упакована в обычную нержавейку, верно, автор темы?
Ионный хроматограф, само собой, должен быть максимально избавлен от стали, но с этой колонкой можно поработать на любом после пассивации.


Ответов в этой теме: 22 Страница: 1 2 3 «« назад \|\| далее »»	Ответ на тему

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU: [ Все новости ]

Размещение рекламы / Контакты