Форумы ANCHEM.RU: Колонка после недельного простоя

Российский химико-аналитический портал

химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов

карта портала ::: расширенный поиск

ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Колонка после недельного простоя - что с ней происходит? >>>

  Ответов в этой теме: 69
  Страница: 1 2 3 4 5 6 7
  «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]

AA_Alex
Пользователь
Ранг: 372

05.10.2019 // 18:56:01

verner45 пишет:

voodensky пишет:
Аналогичные проблемы с Tosoh G2000sw. Работаем в 0,05 М AcONH4. На выходные консервируем в 20% AcCN. После выходных - не пики, а горбы. Деление восстанавливается только после переворачивания колонки и отмывания 20% AcCN. Проблемы начались после 6-ти месяцев жесткой эксплуатации. Хочется продлить срок службы - колонка дорогая...

Работал в течение 2-х лет с антителами (контроль очистки) - достаточно чистые образцы. Колонка Tosoh G3000sw выдержала 300 анализов, BioSep SEC s3000 (две колонки) примерно так же (300-350), все были без предколонок. Потом купили Agilent AdvanceBio SEC с предколонкой - выдержала около 800 анализов. Так что ваши 6 месяцев жесткой эксплуатации, по-видимому, и есть срок жизни этой колонки.

ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

voodensky
Пользователь
Ранг: 531

07.10.2019 // 12:44:50

verner45 пишет:

voodensky пишет:

ukvukv пишет:
Всем доброго!
что с ней происходит? или вечное "Что делать?".
Стоит еще уточнить, что за колонка. Может это С18 с привитыми полярными или гидрофильными группами.
А методика с ион-парным реагентом или триэтиламином.
Аналогичные проблемы с Tosoh G2000sw. Работаем в 0,05 М AcONH4. На выходные консервируем в 20% AcCN. После выходных - не пики, а горбы. Деление восстанавливается только после переворачивания колонки и отмывания 20% AcCN. Проблемы начались после 6-ти месяцев жесткой эксплуатации. Хочется продлить срок службы - колонка дорогая...

По поводу горбов. Был реальный случай. В лаборатории при градиентных методиках в первые насколько анализов на хроматограммах идут горбы. Оказывается, в лаборатории считается, что канал Б (где обычно ацетонитрил) не промывается (purge) и когда ставят градиентные методики и в канале Б не чистый ацетонитрил, то он не промывается и на первых хроматограммах (пока вся трубочка от банки не перемоется) идут горбы. А виной все это время считали плохую работу хроматографа. Поэтому причина горбов может быть и чисто филосовская.

ukvukv
Пользователь
Ранг: 134

11.10.2019 // 0:31:31

voodensky пишет:
...Оказывается, в лаборатории считается, что канал Б (где обычно ацетонитрил)? не промывается (purge) и когда ставят градиентные методики и в канале Б не чистый ацетонитрил, то он не промывается и на первых хроматограммах (пока вся трубочка от банки не перемоется) идут горбы. А виной все это время считали плохую работу хроматографа. Поэтому причина горбов может быть и чисто филосовская.

Простите ничего не понял, что написано. Можете ещё раз мысль переозвучить. У меня тоже градиент и фаза В ацетонитрил.

ukvukv
Пользователь
Ранг: 134

11.10.2019 // 0:33:59

Редактировано 1 раз(а)

Пользователь удалил свое сообщение

ukvukv
Пользователь
Ранг: 134

11.10.2019 // 0:48:24

Avet пишет
...Валидация для того и проводится, чтобы выявить подобные явления, определить их воспроизводимость, цикличность и т.д.

Как можно выявить то чего совсем не ждёшь, а уж тем более определить заранее воспроизводимость и предвосхитить цикличность.
Нет, валидацию методики не проводил, файл менеджмента риска не составлял. А вот робастность смотрел, воспроизводимость, сходимость, правильномть, точность результатов смотрел. Контрольные карты по контрольной сыворотке веду, правила Вестгарда оцениваю.
Чёрт возьми, но с колонкой что?

Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

Аналитическая лаборатория ООО «Объединенный центр исследований и разработок»
Лаборатория выполняет широкий спектр аналитических задач, таких как анализ нефти и нефтепродуктов, комплексное исследование катализаторов, испытания различных объектов методом хроматографии, идентификация неизвестных примесей в различных объектах, анализ объектов окружающей среды, разработка аналитических технологий контроля процессов.

Avet
Пользователь
Ранг: 1086

11.10.2019 // 9:20:17

ukvukv пишет:

Avet пишет
...Валидация для того и проводится, чтобы выявить подобные явления, определить их воспроизводимость, цикличность и т.д.
Как можно выявить то чего совсем не ждёшь, а уж тем более определить заранее воспроизводимость и предвосхитить цикличность.
Нет, валидацию методики не проводил, файл менеджмента риска не составлял. А вот робастность смотрел, воспроизводимость, сходимость, правильномть, точность результатов смотрел. Контрольные карты по контрольной сыворотке веду, правила Вестгарда оцениваю.
Что происходит с колонкой? Давайте точный вид колонки, состав подвижной фазы и хроматографические условия. Желательно даже выложить все три первые хроматограммы образца. Только тогда можно говорить о конкретной проблеме в конкретной работе. Хотите реальной помощи - предоставьте полную информацию, не сочтите за труд.
Чёрт возьми, но с колонкой что?

ukvukv
Пользователь
Ранг: 134

11.10.2019 // 10:21:37

Редактировано 2 раз(а)

Avet пишет:
Давайте точный вид колонки, состав подвижной фазы и хроматографические условия. Желательно даже выложить все три первые хроматограммы образца.Хотите реальной помощи - предоставьте полную информацию, не сочтите за труд. Чёрт возьми, но с колонкой что?

Avet, доброго Вам и заранее благодарю! Пожалуйста, только не обижайтесь! Подскажите куда можно отправить фото хроматограмм для просмотра? Здесь в сообщениях не прикрепляются картинки, хотя вроде бы и есть такая функция.

voodensky
Пользователь
Ранг: 531

11.10.2019 // 11:42:50

ukvukv пишет:

voodensky пишет:
...Оказывается, в лаборатории считается, что канал Б (где обычно ацетонитрил)? не промывается (purge) и когда ставят градиентные методики и в канале Б не чистый ацетонитрил, то он не промывается и на первых хроматограммах (пока вся трубочка от банки не перемоется) идут горбы. А виной все это время считали плохую работу хроматографа. Поэтому причина горбов может быть и чисто филосовская.
Простите ничего не понял, что написано. Можете ещё раз мысль переозвучить. У меня тоже градиент и фаза В ацетонитрил.

Пример. В предыдущем анализе по методике в канале Б был чистый ацетонитрил. В следующем анализе по методике в канале Б смесь ацетонитрила и воды. Вынимают трубочку из баночки с чистым ацетонитрилом и кладут в баночку с 50% ацетонитрилом. Канал не промывают, а сразу ставят анализ. Уравновешивают колонку 1 час. В анализе идет повышение концентрации фазы Б, но в трубочке то еще ацетонитрил. Элюирование сильнее, получаем горбы от трудновымываемой грязи. Потом постепенно ацетонитрил замещается на 50% ацетонитрил и хроматограммы начинают воспроизводиться. Даже сервис инженера вызывали на ТО и чистку, чтобы от горбов избавиться.

Avet
Пользователь
Ранг: 1086

11.10.2019 // 12:52:06

ukvukv пишет:

Avet пишет:
Давайте точный вид колонки, состав подвижной фазы и хроматографические условия. Желательно даже выложить все три первые хроматограммы образца.Хотите реальной помощи - предоставьте полную информацию, не сочтите за труд. Чёрт возьми, но с колонкой что?
Avet, доброго Вам и заранее благодарю! Пожалуйста, только не обижайтесь! Подскажите куда можно отправить фото хроматограмм для просмотра? Здесь в сообщениях не прикрепляются картинки, хотя вроде бы и есть такая функция.

Да какие обиды? Просто я сам понятия не имею, как это сделать. Пока что напишите тип колонки, состав ПФ и хроматографические условия. По вставке хроматограмм: создайте отдельную тему: так с спросите, и спецы форума Вам все объяснят.

voodensky
Пользователь
Ранг: 531

11.10.2019 // 13:06:06

ukvukv пишет:

voodensky пишет:
Стоит еще уточнить, что за колонка. Может это С18 с привитыми полярными или гидрофильными группами.
А методика с ион-парным реагентом или триэтиламином.
Колонка точно С18, а дальше, извините не помню, когда доберусь посмотрю и уточню. Но мысль какая-то закралась.
Методика элементарная, осаждение белков сыворотки ACN и закол.

А давайте здесь поподробнее. У Вас какие начальные условия? и какая концентрация ацетонитрила во вводимом растворе? Может у вас просто с фронтом ацетонитрила вымывается грязь (например, с порта ввода или с колонки), а дальше уже работаете на чистой системе.
Действительно, дайте максимум информации по анализу, прямо каждый шаг и операцию ...


Ответов в этой теме: 69 Страница: 1 2 3 4 5 6 7 «« назад \|\| далее »»	Ответ на тему

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU: [ Все новости ]

Размещение рекламы / Контакты