Форумы ANCHEM.RU: Колонка после недельного простоя

Российский химико-аналитический портал

химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов

карта портала ::: расширенный поиск

ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Колонка после недельного простоя - что с ней происходит? >>>

  Ответов в этой теме: 69
  Страница: 1 2 3 4 5 6 7
  «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]

voodensky
Пользователь
Ранг: 538

14.10.2019 // 9:35:18

Редактировано 1 раз(а)

ukvukv пишет:
Всем доброго дня! И так.
Поток - 0,2 мл.
И естественно жду критики.

Почему такой поток?
Может у вас все и нормально. Просто пик выходит настолько поздно, что появляется только на третьей хроматограмме. Пробовали закалывать холостой раствор после испытуемых? На нем есть что-нибудь?

ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

OldBrave
VIP Member
Ранг: 1343

14.10.2019 // 10:23:58

ukvukv пишет:
...подскажите, пожалуйста, как выкладывать картинки и в каком формате? На наглядных хроматограммах было бы гораздо информативнее и проще общаться.

www.anchem.ru/forum/read.asp?id=24971

ukvukv
Пользователь
Ранг: 134

14.10.2019 // 12:40:15

vmu пишет:
А если в начале (после холостого) колоть не сывороточный контрольный раствор, а стандартный раствор CBZ ...

Добрый день!
Ваши рекомендации для проверки идеи в чём растворять CBZ: в метаноле, метанол+вода, метанол+ACN? В ближайшее время сделаю, отпишусь.

ukvukv
Пользователь
Ранг: 134

14.10.2019 // 12:50:23

Редактировано 2 раз(а)

voodensky пишет:
Почему такой поток?

Колонку жалко.

voodensky пишет:
Просто пик выходит настолько поздно, что появляется только на третьей хроматограмме. Пробовали закалывать холостой раствор после испытуемых? На нем есть что-нибудь?

Общее время с учётом промывки 100 % ACN и возвратом к исходному градиенту 40 мин. Время выхода определяемого пика 12 минута. На третей хроматограмме определяемый пик выходит с заданной концентрацией, не суммарной после трёх заколов.
После каждых 4-х проб пациентов закалываю холостую пробу для контроля чистоты колонки. Хроматограмма чистая. Может в этом и нет необходимости, но мне так спокойнее. И ещё контроль закалываю как минимум два раза в самом начале, т.е. первая проба и в самом конце, последняя проба, но не заключительный закол. В самом конце идёт холостая проба на методике анализа и ещё раз холостая проба на методике заполнения системы 100% ACN перед выключением на неделю.
Может слишком и много лишних процедур, но я так договорился сам с собой, а это порой бывает не просто.

vmu
Пользователь
Ранг: 1372

14.10.2019 // 12:55:39

ukvukv пишет:
в чём растворять CBZ: в метаноле, метанол+вода, метанол+ACN? В ближайшее время сделаю, отпишусь.

Исходный раствор - в ацетонитриле или в водно-ацетонитрильной смеси. Разбавленный раствор для ввода в колонку - в водно-ацетонитрильной смеси, близкой к анализируемым пробам и контрольному раствору.

Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

Испытательный центр ФГУ «Балтийская дирекция по техническому обеспечению надзора на море»
Федеральное государственное учреждение «Балтийская дирекция по техническому обеспечению надзора на море» создано в соответствии с распоряжением Правительства Российской Федерации и осуществляет свою деятельность на территории Российской Федерации, во внутренних морских водах, территориальном море, в исключительной экономической зоне и на континентальном шельфе Российской Федерации.

voodensky
Пользователь
Ранг: 538

14.10.2019 // 13:56:08

Редактировано 1 раз(а)

ukvukv пишет:

voodensky пишет:
Почему такой поток?
Колонку жалко.

Я вот почему обратил на это внимание.
Например, Вы работаете на хроматографе для ультра ВЭЖХ и там объем смесителя 50 или 100 мкл. Вопросов нет.
Или Вы работаете на обычном ВЭЖХ и объем смесителя 0,5 мл или вообще 2,6 мл. И теперь считайте, что для заполнения только объема смесителя (без идущих трубочек) требуется 2,5 минуты. За 10 мин вы всего лишь промываете 4 объемами (если 0,5 мл). Если 2,6 то вы его вообще даже не заполняете.
Поэтому в Вас и условия разные. Там где должно быть 95% ацетонитрила, его по факту меньше. Там где должно быть 15% ацетонитрила, его по факту больше. Чтобы это проверить возьмите 3 раза прогоните программу вообще без заколов.

ukvukv
Пользователь
Ранг: 134

14.10.2019 // 16:46:19

Редактировано 1 раз(а)

voodensky пишет:
Чтобы это проверить возьмите 3 раза прогоните программу вообще без заколов.

Благодарю! Без заколов это как? Объём пробы поставить 0 мкл?

voodensky пишет:
...объем смесителя 0,5 мл или вообще 2,6 мл. И теперь считайте, что для заполнения только объема смесителя (без идущих трубочек) требуется 2,5 минуты. За 10 мин вы всего лишь промываете 4 объемами (если 0,5 мл). Если 2,6 то вы его вообще даже не заполняете.

Смеситель это петля? Спасибо, пытаюсь осознать, что-то интересное.

voodensky
Пользователь
Ранг: 538

15.10.2019 // 8:40:55

ukvukv пишет:
Благодарю! Без заколов это как? Объём пробы поставить 0 мкл?

В прошлом посте был намек, на то, что неплохо было бы сказать на какой системе работаете.
На Шимадзу надо поставить номер виалы -1 и он будет анализировать без вкола.
На Вотерсах есть отдельный тип анализа "no injection".
Или можно просто создать метод, в котором будут объеденены три цикла градиентных цикла.
А еще проще проверить можно так. Когда будет стабильное время выхода перед следующим анализом на начальных условиях подождать не 10 мин, а 30 мин и посмотреть, что будет со временем. Или если будет много времени, повторить запуск. Так же включить поток 100% ацетонитрила и проделать те же действия, что обычно перед анализом. Если картина повторится, то дело не в недельном простое, а в условиях.

Смеситель это петля?

Нет, смеситель - это смеситель. Смотря на какой системе работаете. В общем, это некоторая вещь, сразу после насоса (если градиент низкого давления) и перед портом ввода, на которой написан объем.

Спасибо, пытаюсь осознать, что-то интересное.

Чтобы понять о чем я говорю, представьте неработающий (не смешивающий) смеситель объемом 8 мл. Вы начинаете анализ, проводится ввод пробы, насос начинает изменять соотношение. После насоса раствор идет в смеситель, потом на порт вввода, потом на колонку. Смеситель у нас объемом 8 мл (как договорились). На скорости 0,2 мл в минуту раствор дойдет до порта ввода и колонки через 8мл / 0,2мл/мин=40 мин. Все это время вещество находится в сорбированном состоянии на входе колонки. Через 40 мин на входе в колонке начинает расти доля ацетонитрила и вещество начинает элюироваться. Поэтому в первом заколе ничего нет. На втором заколе будет то, что введено на первом заколе, и т.д. Это идеальная придуманная ситуация, но ясность надеюсь она внесла.
Еще как вариант посмотреть давление. Если колонка заполнена одним раствором, то давление постоянное. Т.е. на первых трех экспериментах и на остальных форма изменения давления должна быть одинакова. Но это отражает факт заполнение колонки, а не ее уравновешивание.

ukvukv
Пользователь
Ранг: 134

18.10.2019 // 0:56:45

Редактировано 24 раз(а)

vmu пишет:
Исходный раствор - в ацетонитриле или в водно-ацетонитрильной смеси. Разбавленный раствор для ввода в колонку - в водно-ацетонитрильной смеси, близкой к анализируемым пробам и контрольному раствору.

VMU, извините, сначала сделал, а потом прочитал в форуме, что Вы порекомендовали. Но даже, то что сделал наводит на глубокие рассуждения вечного "что делать?" дальше. Сток чистого CBZ сделал в МеОН, рабочую концентрацию так же развёл МеОН. На пробы пациентов совсем не похоже: ни воды, ни ACN. Однако смотрите файлы.

https://ru.files.fm/u/fdzzdjqb#;/share_popup

Пришлите, пожалуйста, почту. Я не понимаю, как здесь вставлять ссылки и картинки.

ukvukv
Пользователь
Ранг: 134

18.10.2019 // 1:30:03

OldBrave пишет:

www.anchem.ru/forum/read.asp?id=24971

Как? как это здесь работает? Первый раз не могу отправить ни ссылки ни картинки.


Ответов в этой теме: 69 Страница: 1 2 3 4 5 6 7 «« назад \|\| далее »»	Ответ на тему

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU: [ Все новости ]

Размещение рекламы / Контакты