| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Кто может что-либо подсказать по ВЭЖХ аминокислот и микотоксинов. Благодарен за любую информацию. >>>
|
 |
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
 10.06.2003 // 15:50:36
Другой вариант - не обращенная, а нормально-фазовая хроматография, то есть на Силасорбе. Тут уже лучше даже Милихром может быть - колонки дешевле. Для милихрома разработаны хорошие методики для определения В1, ДОН и зеараленона, но под ДОН нужна отдельная колонка, а вообще лучше отдельная под каждый токсин, итого 3 штуки. Здесь предколонка не нужна, более того -- может даже очистка не пригодиться (например, мука там). То есть экстрагируешь, отгоняешь досуха, дальше для В1 перерастворяешь в смеси бензол-ацетонитрил (98-2) и колешь, для ДОНа и зеараленона о5 же надо посмотреть. Надеюсь, хоть что-то прояснил. |
||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|||
|
Leo Пользователь Ранг: 3 |
23.06.2003 // 10:51:06
Редактировано 1 раз(а) Для анализа аминокислот на ВЭЖХ предварительно получают производные с ортофталевым альдегидом или флуорескамином. Анализ аедут на колонке с обращенной фазой (напр.С-18) с градиентом -метанол:вода и детектированием на флуориметрическом детекторе. другой вариант - ионообменная хроматография (лучше всего на смолах фирмы Durrum, напр., DC-6A). В этом варианте используют ступенчатый градиент рН и температуры колонки. Для детектирования применяют постколоночный реактор для получения производных либо с ортофталевым альдегидом (флуориметр) либо с нингидрином (фотометр). Я когда-то довольно много занимался аминокислотным анализом и если нужно могу выслать методики анализа и получения гидролизатов. |
||
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
25.06.2003 // 15:52:39
Вообще-то, сейчас моднее всего все-таки FMOC производные на флуориметре или УФе, но стоит заметить, что подобный набор стоит 7000$ 
|
||
|
Леонид VIP Member Ранг: 5266 |
04.07.2003 // 13:27:42
Не нужно изобретать велосипед. В Москве есть отечественная Фирма, "Био-Хим-Мак" называется, пришлют колонку, наборы для пробоподготовке, стандартные образцы, методику и вообще "любой каприз за ваши деньги". Можно без всего этого обойтись и добиться, затратив некоторое время на эксперименты, неплохих результатов самостоятельно, но это возможно при наличии некоторого опыта в ВЭЖХ, а как я понял - вопрошающий ближе к "чайникам". |
||
|
Роман VIP Member Ранг: 327 |
06.08.2003 // 10:08:03
Редактировано 1 раз(а) Уважаемый Leo, как Вы поступаете с цистином, метионином и триптофаном? Окисляете или нет (цистин с метьионином конечно)? Если не трудно подскажите как добиться воспроизводимости при гидролизе, особено при определении триптофана (он просто улетает, если делать как по ГОСТу). Если есть наработки, поделитесь. Мой e-mail: gerasimovrs{coбaчkа}mail.ru С уважением, Роман |
||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
||
|
Костя Пользователь Ранг: 576 |
06.08.2003 // 12:00:24
Редактировано 1 раз(а) Самый адекватный метод из извесных - обращенка, ацетатный буфер метанол в градиенте, фенилтиокарбаматные производные на сф детекторе. Цистин защищается иодуксусной к-той. На флуориметре - ОФА. |
||
|
Роман VIP Member Ранг: 327 |
07.08.2003 // 11:00:48
Костя, меня же гидролиз интересует, а не условия хроматографирования! 
|
||
|
Костя Пользователь Ранг: 576 |
07.08.2003 // 12:36:00
Редактировано 1 раз(а) Я делаю так - 6м HCl, 0,02% фенола, ампулу заполнить аргоном и запаять. 15 мг образца на 1 мл. Далее 12 часов * 110 С. Есть варианты микроволнового гидролиза. Триптофан в этом случае теряется. Чтобы триптофан не терялся надо использовать гидроксид бария. Единственный метод гидролиза сохраняющий весь набор - энзиматический. |
||
|
Роман VIP Member Ранг: 327 |
07.08.2003 // 12:57:00
Я действую примерно также, только время гидролиза - 24 часа, поскольку связи образрванные валином и изолейцином рвуться не полностью. Триптофан то же с барием, но проблема в том, что после гидролиза в ампуле (она конечно плотно закрыта, но не запаяна) пусто. Скажи, пайка критична в этом случае или нет, может достаточно плотно закрыть ампулу? У меня не было возможности это проверить. Цистин с метионином я окисляю надмуравьиной (как в ГОСТе), потому что с ОФА цистин реагирует плохо. И еще, как ведешь количественный рассчет? Я - методом внутреннего стандарта (норвалин, норлейцин). С уважением. Роман |
||
|
IVA Пользователь Ранг: 99 |
26.09.2006 // 20:07:41
Здравствуйте, уважаемые хроматографисы! У меня проблемы с определением ДОН в кашах. В них на времени выхода ДОН выходит конкретный пик, маскирующийся под ДОН. Пики размытые, некрасивые, в отличие от стандартов. В муке, зерне и пр. такого безобразия не наблюдается, видно в кашах что-то мешает.Использовать каждый раз метод стандартных добавок-получается дороговато. Обратились к спецам со своей методой, они сказали, что 1) ДОН чистой водой без буфера не экстрагируется;2)досуха никогда не выпаривается; 3)растворяется не в ацетонитриле:вода (1:9), а все тоже + фосфатный буфер.У нас пробоподготовка на иммуноафинных колонках, дальше - 4 мл.метанола, отгонка в азоте, +250 мкл ПФ,хроматографирование 100 мкл пробы, длина волны 219 нм( AGILENT, FLD,DAD).Как правильно? Можно ли попытаться разделить пики или дело все же в пробоподготовке? |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 52
|
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
