| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Помогите начиеающему с HPLC >>>
|
 |
|
Сергей Костиков VIP Member Ранг: 1811 |
 13.09.2006 // 15:24:24
Редактировано 1 раз(а) user wiped their message |
|||||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
||||||
|
alexchem Пользователь Ранг: 491 |
13.09.2006 // 16:46:17
Редактировано 1 раз(а) user wiped their message |
|||||
|
alexchem Пользователь Ранг: 491 |
13.09.2006 // 18:28:35
Спасибо всем откликнувшимся на мой клич о помощи. to Сергей Костиков: насос пока продавать не планируем, есть мечта запустить систему, но если что буду иметь Вас в виду. На НФ работаю по двум причинам. 1) По умолчанию стояла соответствующая колонка; 2) Не было чистого ацетонитрила, а был гептан хч, который я дополнительно очистил. Написал заявку на 1 л ацетонитрила для хроматографии, но не думаю, что это дело скоро оплатят, так что пока буду юзать этот элюент. Вопрос: нужно ли через измерительную кювету фотометра прокачивать элюент при выставлении нулевой линии и каким минимальным расходом? Обязательно ли прокачивать элюент через кювету сравнения при выполнении анализа. В инструкции пишут, что желательно, но соответствующего насоса низкого давления в системе нет Вопрос: При заполнении петли через направляющую иглы я ввожу медицинскую иглу со срезанным и обточенным концом в капилляр из фторопластовой трубочки, которая надета на направляющую. Излишки раствора выходят откуда то снизу дозатора. Это как раз то о чем говорил Сергей, или я что то делаю неправильно. А если вводить пробу через средний капилляр ( между входом в дозатор и выходом на колонку) таким же образом, то излишек течет через направляющую иглы. Где правда? По мере появления свободного времени буду внедрять ваши советы. С уважением и благодарностью, alexchem. |
|||||
|
Леонид VIP Member Ранг: 5266 |
14.09.2006 // 9:01:51
К весьма конкретной и полезной информации Сергея Юрьевича хочу добавить следующее. Литр ацетонитрила не спасет отца русской демократии. Оптимальный поток через штатные 3 мм колонки этого хроматографа составляет 1,2-1,5 мл/мин. Насос набирает 400 мл элюента за раз. Ну и насколько этой банки Вам хватит? Выйти из положения можно используя обычный этанол, которого в лаборатории должно быть достаточно много и стоит он не столько, сколько ацетонитрил. Его чистоты, как показывает практика, вполне хватает для многих приложений. А более высокая вязкость элюента не приводит к столь уж существенному росту давления. Благо, что насос там зверский и может выдать весьма солидное значение. Лишь бы кран не потек. Ну а по поводу Ваших вопросов. Проток через кувету сравнения организовывать не нужно. Достаточно ее просто заполнить элюентом и заглушить концы капилляров. Следите, чтобы в кювету не попал пузырек воздуха. В этом случае на ноль выгнать детектор не удастся. Если прибор долго стоял, то нужно включить УФ-детектор и оставить на сутки, чтобы потренировать ртутную лампу. Иначе интенсивность ее излучения первое время будет плавать. И еще. Система гептан - изопропанол уникальна тем, что является единственной, на которой можно организовать градиент при использовании рефрактометра. Но Вам суждено работать только в изократе, а потому смело заменяйте гептан на гексан, который гораздо дешевле, доступней, да и менее вязкий. |
|||||
|
alexchem Пользователь Ранг: 491 |
14.09.2006 // 14:14:24
Поставил обычную колонку с силикагелем - Сепарон. Подскажите, пожалуйста, как ввести ее в эксплуатацию? Сколько элюента надо прокачать и каким расходом. На старой обнаружил зону, где то 1 см не смоченную элюентом. Из за чего это могло произойти. По неопытности через старую колонку качал расходом до 10 мл/мин. Могло ли это привести к такой беде? Старую колонку можно выбросить? Заранее благодарен, с уважением, alexchem. |
|||||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|||||
|
Леонид VIP Member Ранг: 5266 |
14.09.2006 // 14:38:47
Мда... С потоком это вы явно перестарались.  На эти колонки больше 2 мл/мин обычно не дают, а так в среднем 1 - 1,5 мл/мин. Могли конечно таким потоком (и соответственно - давлением) просадить сорбент в колонке. Ну а выбрасывать ее или еще поживет, можно легко определиться, сняв несколько тестовых хроматограмм. Если эффективность сильно упала или пики двоятся, то можно выбросить. Если все более-менее пристойно, то и работайте на здоровье. В нормальнофазовой ВЭЖх уравновешивание колонки элюентом происходит обычно несколько дольше, чем в ОФ. Но тут определяющий критерий - состав элюента. Если работаете почти на чистом гептане с добавкой, скажем 0,1% изопропанола, то может понадобиться прокачать элюента 10-15 объемов колонки. А если ИПС в элюенте более 2-3%, то и 3-4 объемов элюента будет достаточно. Ориентируйтесь на вид базовой линии и стабильность времени удерживания тестового вещества, например, нафталина. |
|||||
|
Малой Пользователь Ранг: 50 |
14.09.2006 // 15:37:32
У меня была подобная история с таким прибором... Впрочем он был еще и сломанный тек насос, дозатор, небыло описаний. Но желания и труд все перетрут... Щас у меня есть все описания, опыт работы и настройки прибора. Если что обращайтесь чем смогу помогу. Я в Москве. Есть тонкость при подключении к детектору самописца (у меня было так как у Вас не знаю) в штатных шнурах цвет разъемов не соответствовал цвету штырьков на самописце куда их нужно было втыкать и при неправильном (когда цвета совпадали) втыкании не удается настроить нулевую линию, когда правильно втыкаешь все ок. Я даже подключил интегратор (тоже возни было дюже пришлось прозванивать, перепаивать штатные разьемы и настраивать интегратор) и все это замечательно работало, но щас я перешел на АЦП... Кстати информация для Костикова - если Вы помните я у Вас брал дозатор и был разговор, что могу отдать Вам старый носос, который сам восстанавливать не собираюсь. Так вот если хотите подъезжайте к ИНЭОСу и забирайте его. Сам я эти 60 кил ни куда не потащу... PS а на Вашей колонке (не обращенке или ЦН) если есть проблемы с метанолом, спиртом или ацетонитрилом ну тоесть не удасться запустить обращенку а есть только гексан можете для практикума делить смесь ароматических аминов: анилин, дифениламин и тд хвосты конечно будут, но все же... |
|||||
|
Малой Пользователь Ранг: 50 |
14.09.2006 // 17:06:03
Редактировано 1 раз(а) user wiped their message |
|||||
|
alexchem Пользователь Ранг: 491 |
14.09.2006 // 19:02:28
Редактировано 1 раз(а) to Малой: спасибо, что откликнулись. Штырьки на самописце действительно разные, но я, признаться, не придавал этому большого значения. Обязательно посмотрю. Сегодня случилось ЧП. При подключении детектора из него пошел дым от трансформатора . А случилось это потому, что заземлил прибор и перепутал в розетке фазы. И ведь знал о рекомендации Волгина, но ОЧЕНЬ важное значение не придал. После этого у нас аж на всем этаже фазу выбило. После прибор включил. Сетевая кнопка горит, диафрагма вращается. Было ли у Вас такое, и какие последствия? На сегодня приключений хватит. Завтра буду все делать по уму и надеятся, что все заработает.ЗЫ: Все же каждая вещь любит, когда ее используют по назначению, а если она пылится десятилетиями, то... ЗЫЫ Никоим образом не снимаю с себя ответственности. |
|||||
|
Сергей Костиков VIP Member Ранг: 1811 |
15.09.2006 // 15:31:35
Мда, как говаривает Леонид... Теперь смотрИте, работает ли УФ лампа (речь, как я понимаю, идет об УФ-ВИЗ детекторе)- это визуально через вент.решетку видно, особенно в сумраке. Если не работает, то - маленькая северная лисичка, придется искать замену и, скорее, всего блока. С расходами на колонку явно перестарались, хотя удивлен, что не сработала защита по перепаду. Выбросьте колонку, не заморачиваясь, ибо запаса прямофазных колонок на Ваш и Ваших студентов век хватит. Пусть тренируются на тряпочных, что ж такого. Насчет большого расхода AcCN - обычно достаточно системы AcCN:вода 40:60, кроме того, при аналитических определениях с небольшими концентрациями отработанный элюент вполне приемлемо использовать повторно по нескольку раз (без фанатизма, конечно), отфильтровав через белую ленту при необходимости. Есть и он-лайновые фильтры для элюента на входе в насос (копейки). Расход элюента для обращенки (свой опыт) обычно не выше 0,4-0,6 мл/мин. Считайте сами. То Малой: Я помню свой дозатор, как и Ваше обещание поделиться полученными результатами с заинтересованной публикой. Насчет насоса: заберу, конечно, а что за модель и что неисправно? |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 23
|
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
