Российский химико-аналитический портал | химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
|
ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
гельфильтрация липосом >>>
|
Alex Пользователь Ранг: 36 |
12.07.2004 // 15:22:32
Спасибо |
|||||
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
||||||
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
12.07.2004 // 19:01:10
Липосомы не удерживаются и ничем не мешают определению... я даже вопроса-то не понял. |
|||||
Леонид VIP Member Ранг: 5266 |
13.07.2004 // 8:29:33
Костя! Липосомы (псевдофлокулярные образования в присутствии ПАВ) бывают тоже разные. Все зависит от природы ПАВ и размеров этих самых липосом. Они могут и не удерживаться, а могут просто не пройти через колонку, собравшись еще на фильтре, постепенно разрушаясь там и выпуская в колонку понемногу заключенное в полостях вещество. А вот это уже неприятно. Поэтому главное - жестко не воздействорать на липосомную систему, чтобы не разрушить ее. А ВЭЖХ - не самый мягкий вариант метода исследования. Тут и градиент давления, и возможность взаимодействия ПАВ, составляющих липосомы и мицеллы с активными участками сорбента, и деструктивное (за счет осмотического давления) воздействие на липосомы компонентов элюента. Уж не тебе объяснять, как могут цепляться ПАВ на силанолы. Так что мне, например, вполне понятно беспокойство человека за презентативность прямого анализа низкомолекулярных компонентов в присутствии липосом. |
|||||
Alex Пользователь Ранг: 36 |
13.07.2004 // 9:46:47
Липосомы не удерживаются и ничем не мешают определению... я даже вопроса-то не понял. Липосомы разрушаются органическими растворителями (даже малыми концентрацичми), так что не всё так просто. Общее содержание субстрата померять не представляется проблем, а вот невключённую часть... |
|||||
Леонид VIP Member Ранг: 5266 |
13.07.2004 // 10:17:54
Редактировано 1 раз(а) Так о чем и спич! Чтобы вещества разделять по эксклюзионному механизму, необходимо добиться практически полного отсутствия взаимодействия их с поверхностью сорбента ("отрицательная" сорбция). И если для полимеров можно подобрать соответствующий элюент, то липосомы - слишком уж нежные образования, этакие микромыльные пузырьки, только заполненные жидкостью. Нагрев, изменение рН, добавка электролитов и органики, прочие незначительные воздействия - все это может моментально разрушить липосомы. Я вот еще немного подумал. Если ваше вещество поглощает в УФ или видимом спектре, то можно определять концентрацию спектрофотометрически. А рассеяние света липосомами в прямом направлении можно учитывать измеряя рассеяние в поперечном направлении (нефелометрия)или съемкой светопропускания на нескольких длинах волн. По крайней мере, зависимость светопоглощения от содержания свободного (не включенного в липосомы) вещества должна прослеживаться достатосно четко. |
|||||
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|||||
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
14.07.2004 // 21:32:07
Ну тогда и правда можно эксклюзию устоить - в приемлемом буфере. Но тут два но, - маленькое но, и большое НО. Маленькое - при фракционировании гель-фитрацией будет большое разбавление. Большое - колонки, конечно, есть такие, с порами до 3000 А, специально для таких разделений. Но вы преставляете сколько они стоят? боюсь, очень много... |
|||||
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
14.07.2004 // 21:35:10
Видимо, теоритически идеальная система для этого анализа - система из двух колонок с "колумн свичем". Одна - эксклюзионнная, другая аналитическая (обращенка). Все это дорогое удовольствие... |
|||||
ex-KNIISE Пользователь Ранг: 438 |
16.07.2004 // 11:53:14
А еще есть такие очень интересные виды капиллярной жидкостной хроматографии как противоточная и мицеллярная электрокинетическая. Судя по всему, они наиболее подходят для липосомных систем (мнение, к сожалению, теоретическое). |
|||||
Alex Пользователь Ранг: 36 |
16.07.2004 // 12:01:53
Мицелярная не подходит, SDS, разрушает липосомы. |
|||||
Василенка Пользователь Ранг: 1 |
16.07.2004 // 16:39:20
Не уверена, пригодится ли мое сообщение, но у себя в бумажках нашла вот какую информацию из РЖ"химия" за 2000год:поведение миграции содержащих краситель липосом в капиллярном электрофорезе с хемилюминесцентном детектированием/Tsukagoshi K., Okumura Y., Nakajima R.// J.Cromatogr.A.-1998.-813,№2,-s.402-407 англ. ....Изучено влияние составных частей липосом на их поведение в электрофорезе с хемилюминесцентным детектированием. Обычно на электрофоретограммах регистрируется два пика: один за счет захваченного липосомами красителя, а второй - за счет свободного красителя в основном объеме раствора. |
|
||
Ответов в этой теме: 22
|
|
ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
Размещение рекламы / Контакты |