| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
ВЭЖХ >>>
|
 |
| Автор | Тема: ВЭЖХ | |||||
|
mary Пользователь Ранг: 1 |
 09.11.2004 // 21:48:28
Редактировано 1 раз(а) Помогите, пожалуйста. Вопрос: можно ли определить пропионовую, каприновую и лимонную кислоты с помощью "обращенной" жидкостной хроматографии. И если можно, то не возникнут ли какие проблемы? Заранее спасибо. |
|||||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
||||||
|
Леонид VIP Member Ранг: 5266 |
10.11.2004 // 10:21:01
На классической обращенке с перечисленными веществами в первую очередь будет проблема удерживания. Вылетят они из колонки в мертвом объеме хвостатыми пиками, потому как очень полярны. Для достижения приемлемого удерживания нужно работать в режиме динамического модифицирования, больше известного в литературе, как ион-парный вариант обращенно-фазной ВЭЖХ. Осуществить его гораздо более просто, чем он называется. Достаточно в элюент, состоящий из 0,01М фосфатного буфера (рН = 4 - 5) и ацетонитрила (соотношения придется подобрать самостоятельно) добавить подходящую соль тетраалкиламмония, например - фосфат тетрабутиламмония в концентрации порядка 0,0001 - 0,001М (тоже подбирается экспериментально). Другая трудность - детектирование. Если у Вас нет рефрактометра, то в УФ придется работать ниже 210 нм, так как все эти вещества плохо поглощают при бОльших длинах волн. А это потребует использования достаточно чистых реактивов, и в первую очередь - ацетонитрила (или метанола). Я ограничился, как Вы и просили, "обращенкой". Хотя есть варианты поделить эти же вещества на ионообменнике, при динамическом модифицировании диаминами (кадаверином, например) на обычном силикагеле, а так же в режиме ДИРФ. |
|||||
|
Islander VIP Member Ранг: 1065 |
10.11.2004 // 19:33:54
Редактировано 2 раз(а) Ежели нужно определять сравнительно низкие концентрации, и чувствительности в предложенных вариантах не хватает, можно провести дериватизацию с фенацил бромидом (бромацетофеноном), бромфенацил бромидом или нитрофенацил бромидом в присутствии краун эфира и бикарбоната калия или натрия. Реакция идет количественно при нагреве от 40 до 80 градусов (в зависимости от автора методики, реагента и кислот), получаются производные, сильно поглощающие в УФ и хорошо делящиеся как на обращенке, так и в нормально-фазовых условиях. |
|||||
|
Леонид VIP Member Ранг: 5266 |
11.11.2004 // 10:14:33
Согласен! Порой, вместо ухищрений по прямому ВЭЖХ анализу некоторых веществ, лучше провести деривацию их в соединения, более удобные для хроматографирования. Это в первую очередь касается приведенных соединений. Тем более, что для них можно найти еще с десяток подходящих реагентов. Вот только не всегда условия эксперимента и состав анализируемой матрицы позволяют сделать деривацию достаточно просто. Тут уж сам экспериментатор должен выбирать, что ему проще сделать. |
|||||
|
RudakovOB Пользователь Ранг: 67 |
11.11.2004 // 13:52:44
Это вопрос к Сычеву старшему |
|||||
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
11.11.2004 // 20:20:38
25мМ фосфатный буфер, рн 2.6 фосфорной. длина волны 200-210 нм. колонка - от минимально пригодной Luna C18 за 300 до оптимальной Atlantis dC18 подороже |
|||||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|||||
|
Islander VIP Member Ранг: 1065 |
11.11.2004 // 22:21:55
Luna хвостить будет точно. Коли чувствительности хватает и с ион-парным разделением связываться неохота, то лучше уж что-нибудь вроде YMC ODS-AQ (продает тоже Waters) из относительно старых или Synergi Hydro-RP, если уж очень хочется от Феноменекса. Впрочем, у любого приличного производителя нынче можно найти что-то под подвижную фазу без органики. |
|||||
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
12.11.2004 // 15:42:53
Нет, не надо никаких синерги гидро, аква, и прочих полярных эндкеппингов с плохим карбон лоадом, на них ведь толком ничего не удержится. Надо применять с полярным эндкеппингом и высоким карбон лоадом, например с полидентантными С18 лигандами. Это как раз Atlantis dC18, у Zorbax тоже что-то подобное есть. Если таких нет - надо брать просто неэндкеппированную обращенку поприличнее. А у Lunы просто подделок много, вот мне что кажестся... Хотя я не фанат Феноменекса, незаслуженно пошлить тоже не буду. Ион-парная не очень хороша для этого анализа, по ряду причин... не очень стабильная система, селективность портится прилично, кучу системных пиков сам черт не поймет, не дай бог реагент грязный так вообще... |
|||||
|
Islander VIP Member Ранг: 1065 |
12.11.2004 // 15:57:33
Редактировано 5 раз(а) Ну кто Вам сказал, что у Synergi Hydro-RP плохой carbon load? На колонке 250x4.6 мм, согласно каталогу, почти в той же подвижной фазе уксусная кислота выходит на девятой минуте, а лимонная на 12-й! Разве мало? Кстати, процент углерода в ней тот же, что и у Луны C18 - 19%. А против Атлантиса я ничего не имею. Хорошая колонка, для такого разделения подходит. И у многих других фирм, как я уже писал, есть подобные. Достаточно полистать каталоги... |
|||||
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
15.11.2004 // 23:35:19
 Ну, я имен ввиду не карбон лоад, а просто удерживание, его не по уксусной надо смотреть, а по щавелевой  плохонькое оно для гидры, плохонькое, и селективность среди полярных плохонькая - есть дело. Вот этим многие полярные эндкеппинги страдают, какое бы хитрое имя не придумали (вроде Prevail Organic Acids (Alltech)
|
|||||
|
Islander VIP Member Ранг: 1065 |
15.11.2004 // 23:51:12
А щавелевая-то и не нужна вовсе... |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 41
|
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
