| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Что за провал на базовой ?? (ВЭЖХ) >>>
|
 |
| Автор | Тема: Что за провал на базовой ?? (ВЭЖХ) | |||||
|
LVD Пользователь Ранг: 219 |
 05.11.2009 // 9:00:53
Уважаемые коллеги! Столкнулись с проблемой появления провла на базовой линии. Хроматограф Шимадзу LC 10, ввод ручной, петля 20 мкл, (впрочем ,от размера петли проблема не зависит, проверяли), изократика, 1 насос. Элюент или чистый ацетонитрил, или 80%, 50%, провал все равно есть. Колонка - обращенная фаза С18, 150*3, , 100, 5. Если закалывать элюент, тоже есть провал. А вот если просто поворачивать кран без закола, то на 2-3 раз провал исчезает. Меняли линейный фильтр, элюент, петли, колонку. Промывали ячейку детектора. Разница между растворителями, как причина, тоже, понятно, не подходит. Пузырькам вроде бы взяться неоткуда... Может кто-нибудь сталкивался с подобной проблемой, будем благодарны за совет. |
|||||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
||||||
|
Volan Пользователь Ранг: 24 |
 05.11.2009 // 11:11:00
Вопрос: "провал" всегда на одном месте, или же "плавает " по хроматограмме? |
|||||
|
LVD Пользователь Ранг: 219 |
05.11.2009 // 11:21:39
Провал зависит от скорости потока элюента. При одинаковой скорости - на одном месте.. |
|||||
|
Volan Пользователь Ранг: 24 |
05.11.2009 // 11:41:46
На одном месте в начале хроматограммы? |
|||||
|
LVD Пользователь Ранг: 219 |
05.11.2009 // 12:12:14
Нет, в начале (1,5 мин) , если скорость 0,5 мл/мин, а если 0,1 , то на 12 мин |
|||||
|
Волгин VIP Member Ранг: 1327 |
05.11.2009 // 13:48:59
Уважаемая LVD. Несколько вычислений. 1) 0,5 мл/мин х 1,5 мин = 0,75мл. 2) (0,3 см )2 /4 х 3,14 х 15 = 1,06 мл - геометрический объем Вашей колонки; умножим на 70% (как правило, для сорбентов на матрице силикагеля) = 0,74. Как видите, практическое совпадение. То есть, ваш пик выходит с мертвым объемом (или, по фразеологии занимающихся эксклюзионной хроматографией, с полным объемом). Природе таких пиков посвящены если не тома, то весьма значительное количество статей. Предположений масса, например, такое (нравящееся мне своей недоказуемостью): в петле инжектора раствор находится при атмосферном давлении и после введения его в поток элюента по системе начинает двигаться зона возмущения, отличающаяся по коэффициенту рефракции. Вот на это-то и реагирует ультрафиолетовый детектор за счет внутренних отражений на стенках кюветы. Вывод один: не парьтесь, подавляющее большинство хроматографистов стараются работать при k'>>0. Чего и Вам желаю!  PS Рискну предположить, что 12 мин при 0,1 мл/мин - из-за неточности подачи элюента. |
|||||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|||||
|
Volan Пользователь Ранг: 24 |
05.11.2009 // 13:51:31
Вообще, похоже на искажение базы, возникающее при вводе пробы. Если это действительно так, то пики компонентов пробы должны выходить после такого искажения, и обычно это искажение не мешает обсчету хроматограммы. Если искажение появляется совместно с выходом пиков пробы, то оно м.б. вызвано электрическими помехами: кто-то что-то включает/выключает. В этом случае помогает фильтр (APC, например) между детектором и розеткой. Также еще искажения базы могут быть вызваны неисправностями в системах обработки сигнала детектора - где-то плохой контакт, или грязный контакт, или окислился и пр. Последний случай самый неприятный, может потребоваться сервис-инженер. |
|||||
|
LVD Пользователь Ранг: 219 |
05.11.2009 // 13:53:30
Спасибо за ответ. По поводу "неподдающегося объяснению.." очень похоже. Т.к., как кажется, мы уже писали, если не делать вкол, а просто повернуть кран, чтобы начался пробег, то провала - нет. Проблема только в том, что раньше (до анализа глутатионов - окисленного и восстановленного) это не было. |
|||||
|
LVD Пользователь Ранг: 219 |
05.11.2009 // 13:56:45
Большое Вам спасибо за ответ. Боюсь, что у нас последний неприятный вариант.. Вернусь к этому завтра, ибо стало совсем темно. |
|||||
|
12345 Пользователь Ранг: 661 |
05.11.2009 // 19:41:36
Вкол элюента в изократическом режиме абсолютно эквивалентен повороту крана. А если в градиентном режиме кран возвращать в исходное положение непосредственно перед началом записи хроматограммы, то тоже будет эквивалентен. Откуда тогда разница? |
|||||
|
Serga Пользователь Ранг: 1806 |
06.11.2009 // 4:02:23
Не надо морочить голову себе, людям и сервисным инженерам Шимадзу. Вы давно работаете с ВЭЖХ? Вы даже не написали, какой детектор. Провал они нашли... 
|
| |
||
|
Ответов в этой теме: 33
|
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
