Российский химико-аналитический портал  химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов  
карта портала ::: расширенный поиск              
 



ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...
  1. Аналитический форум | Список форумов | Войти в систему | Регистрация | Помощь | Последние темы | Поиск

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Различные отклики при использовании разного ацетонитрила >>>

  Ответов в этой теме: 13
  Страница: 1 2
  «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]


Волгин
VIP Member
Ранг: 1287


29.12.2011 // 12:30:35     

Kalambet пишет:

Волгин пишет:
Добавлю свои 5 копеек. В ацетонитриле, там где S=251 присутствуют примеси, которые не сразу выходят из колонки, а сначала накапливаются, а затем начинают смываться в процессе градиента. Этим объясняется непрямолинейность кривой. Примесей много и их поглощение сравнимо с поглощением Вашего белка, поэтому пик маленький на их фоне. В случае S=1090 примесей существенно меньше, поэтому и пик выше.
Юра, на фоне такого зашкала по-моему, никакие примеси увидеть невозможно - только килограмм белка. А нелинейность вполне объясняется зашкалом - чем больше процент ацетонитрила, тем больше поглощение раствора, а выше 1...1.5AU все детекторы с оптическим путем 1см нелинейны. А белок виден на фоне 2500 mV, т.е. 2.5ЕОП! Никакой чувствительности там и в помине быть не может - непонятно, как белок вообще увидели.

Полностью согласен! Просто я регулярно вижу подобные профили при отмывании грязных колонок не очень чистыми растворителями, поскольку приходится их гонять туда-сюда по несколько раз, чтобы как следует отмыть. И уж только потом - чистыми.
Реклама на ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
Размещение рекламы
virtu
VIP Member
Ранг: 2121


29.12.2011 // 13:30:02     
Редактировано 1 раз(а)

1. Посмотрел спецификацию используемого ацетонитрила - не подходит он для данной задачи (градиент и 210-230нм). Поэтому, в данной ситуации только 280нм. Купите подходящий ацетонитрил. Да и обратите внимание на "чистоту" ТФУК - лучше покупать в ампулах или паковать в ампулы.

2. Все-таки, думаю, и ТФУК к "фону" тоже имеет отношение, а не только примеси в MeCN, иначе почему "картинка" изменилась после перегонки.

Итого: переход на 280нм - самый экономный путь решения даной ситуации.
boberk
Пользователь
Ранг: 105


10.01.2012 // 12:33:34     
Всем огромное спасибо за советы.

  Ответов в этой теме: 13
  Страница: 1 2
  «« назад || далее »»

Ответ на тему



ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU:      [ Все новости ]

ЖУРНАЛ ЛАБОРАТОРИИ ЛИТЕРАТУРА ОБОРУДОВАНИЕ РАБОТА КАЛЕНДАРЬ ФОРУМ

Copyright © 2002-2009
«Аналитика-Мир профессионалов»

Размещение рекламы / Контакты