Форумы ANCHEM.RU: Горбатая гора... Двугорбый пик...

Российский химико-аналитический портал

химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов

карта портала ::: расширенный поиск

ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Горбатая гора... Двугорбый пик... >>>

  Ответов в этой теме: 19
  Страница: 1 2
  «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]

Автор

Тема: Горбатая гора... Двугорбый пик...

Dionisii
Пользователь
Ранг: 377

20.12.2012 // 16:39:14

Уважаемые коллеги! Столкнулись со своеобразной проблемой. Работаем на жидкостном хромасе LCQ Fleet фирмы Thermo Fisher scientific. Нужно сделать метод количественного хромато-масс-спектрометрического определения амитриптилина, нортриптилина и флуоксетина (I.S.) в одной пробе. Столкнулись с неожиданной проблемой: пики аналитов двоятся на хроматограмме:

Меняли всё, соотношение водной фазы и ацетонитрила, колонки с различными неподвижными фазами. Это не примесь, вещества - стандарты USP, смотрим на MS2, по характеристическим ионам. Это именно наши целевые вещества. Но раздвившиеся на хроматограмме. Нет ли у кого идей, как добиться слияния двух горбов одного пика (именно так) в один "симпатичный" пик

ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

varban
VIP Member
Ранг: 8699

20.12.2012 // 17:17:27

Впервые слышу такой вопрос

Но ответить на него легко - чтобы два пика слились, нужно уменьшить разрешающую способность системы.

Как - другой вопрос. На обычном жидкостнике я бы поставил широкий капилляр между колонкой и детектором

Уже серьезно - нужно как следует разобраться в этом.
Если кольнуть другие вещества, то же самое происходит?

Но в любом случае, работать нельзя, пока не разберетесь, кто виноват. И тогда будет видно, что делать

Dionisii
Пользователь
Ранг: 377

20.12.2012 // 17:18:49

varban пишет:
Впервые слышу такой вопрос

Но ответить на него легко - чтобы два пика слились, нужно уменьшить разрешающую способность системы.

Как - другой вопрос. На обычном жидкостнике я бы поставил широкий капилляр между колонкой и детектором

Уже серьезно - нужно как следует разобраться в этом.
Если кольнуть другие вещества, то же самое происходит?

Но в любом случае, работать нельзя, пока не разберетесь, кто виноват. И тогда будет видно, что делать

Кололи другие вещества. Они себя прилично ведут.

virtu
VIP Member
Ранг: 2135

20.12.2012 // 17:42:25

Dionisii пишет:
Уважаемые коллеги! Столкнулись со своеобразной проблемой

1. Условия.

2. Данные надо в EIC выкладывать (аналиты и ВС). Чтобы был указан MRM переход, а то так ничего непонятно.
З.Ы.: Это или дискриминация хром. полосы или исходники (валятся, примеси)

Dionisii
Пользователь
Ранг: 377

20.12.2012 // 18:09:39

virtu пишет:

Dionisii пишет:
Уважаемые коллеги! Столкнулись со своеобразной проблемой
1. Условия.

2. Данные надо в EIC выкладывать (аналиты и ВС). Чтобы был указан MRM переход, а то так ничего непонятно.
З.Ы.: Это или дискриминация хром. полосы или исходники (валятся, примеси)

Если можно, пару слов о дискриминации хром. полосы, что это за зверь такой? Заранее благодарен.

Duke
Пользователь
Ранг: 512

20.12.2012 // 23:04:57

Извините за любопытство, хроматография это не мое, но время(видимо удерживания) 2.5-3 минуты разве нормально для вэжх? Они точно не в мертвом объеме вываливаются, а то пики и широкие, и косые какие-то.

Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

Лаборатория стереохимии сорбционных процессов (ЛССП) ИНЭОС РАН
Анализы различных классов соединений (органический синтез, биотехнология, загрязнения почвы, воды, анализ энантиомерного состава) методами ВЭЖХ и ГХ.

varban
VIP Member
Ранг: 8699

21.12.2012 // 0:13:33

Если можно, пару слов о дискриминации хром. полосы, что это за зверь такой?

Изменение количественного и/или качественного состава пробы по вине хроматографической системы и/или ее оператора

cholesterol
Пользователь
Ранг: 109

21.12.2012 // 0:37:40

Dionisii пишет:
Меняли всё, соотношение водной фазы и ацетонитрила, колонки с различными неподвижными фазами.

Кислоты, основания и другие соединения, содержащие группы способные ионизироваться делят в присутствии буфера. В Вашем случае возьмите в качестве Буфера А 10-20 мМ ацетат или формиат аммония доведите его до pH=3-3.5 муравьиной кислотой, в качестве органического компонента - ацетонитрил, растворите анализируемые соединения в буфере А и заколите на С18 колонке.

virtu
VIP Member
Ранг: 2135

21.12.2012 // 10:00:33

Dionisii пишет:
Если можно, пару слов о дискриминации хром. полосы, что это за зверь такой? Заранее благодарен.

"Разрыв" хром. полосы сорбата (не то, о чем пишет varban). Эффект нормально не исследован и не описан. Официального термина не существует. Причины различны. Проявляется в ГХ, ВЭЖХ и др.

Dionisii
Пользователь
Ранг: 377

21.12.2012 // 10:11:25

cholesterol пишет:

Dionisii пишет:
Меняли всё, соотношение водной фазы и ацетонитрила, колонки с различными неподвижными фазами.
Кислоты, основания и другие соединения, содержащие группы способные ионизироваться делят в присутствии буфера. В Вашем случае возьмите в качестве Буфера А 10-20 мМ ацетат или формиат аммония доведите его до pH=3-3.5 муравьиной кислотой, в качестве органического компонента - ацетонитрил, растворите анализируемые соединения в буфере А и заколите на С18 колонке.

Спасибо за ответ. Используем 10 мМ ацетат аммония, подкисленный муравьинкой до pH 3.5. Колонка C18. Так что в точности по Вашим лекалам.

Dionisii
Пользователь
Ранг: 377

21.12.2012 // 10:14:03

virtu пишет:

Dionisii пишет:
Если можно, пару слов о дискриминации хром. полосы, что это за зверь такой? Заранее благодарен.
"Разрыв" хром. полосы сорбата (не то, о чем пишет varban). Эффект нормально не исследован и не описан. Официального термина не существует. Причины различны. Проявляется в ГХ, ВЭЖХ и др.

Проблему таки удалось снять путем:
1) Увеличению процента буфера в фазе до 60%
2) Снижению скорости потока до 0,35 мл/мин.

Для меня такое решение - сущий парадокс. Казалось бы увеличишь поток, пики сольются - ан нет. Да и "воду" добавить - сомнительный вариант для этих целей. Однако. Наверное результат связан с особенностями ионизации в электроспрее.


Ответов в этой теме: 19 Страница: 1 2 «« назад \|\| далее »»	Ответ на тему

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU: [ Все новости ]

Размещение рекламы / Контакты