| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Как правильно такая примочка в ВЭЖХ называется? >>>
|
 |
| Автор | Тема: Как правильно такая примочка в ВЭЖХ называется? | ||
|
igorchem Пользователь Ранг: 333 |
 24.08.2015 // 2:06:27
Редактировано 1 раз(а) Добрый день, Скажите, пожалуйста, как называется метод в ВЭХЖ, когда после детектирования собираешь только содержимое пиков в отдельный капилляр, а потом содержимое этого капилляра на медленной скорости прогоняешь через другой детектор, но на существенно меньшей скорости, с целью более точного снятия спектра того, что насобирал. Спасибо! |
||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|||
|
Marlin Пользователь Ранг: 66 |
24.08.2015 // 16:41:57
ИМХО, it looks like "tandem HPLC" |
||
|
igorchem Пользователь Ранг: 333 |
25.08.2015 // 3:09:25
спасибо, может и так, но гугление на тандем дает в основном методы, когда поток из колонки на два разделяется и детектируется двумя разными методами. У меня же ключевое - сбор пиков и упаковка в капилляр, с целью потом медленно поснимать результат. По идее немного похоже на брукеровскую LC-NMR, но с той разницей, что у брукера каждый пик упаковывается в отдельную кювету и потом детектируется в ЯМРе, а я хочу сжать пики, собрав их в капилляр, а потом медленно проточно детектировать. |
||
|
Kalambet Пользователь Ранг: 484 |
25.08.2015 // 11:43:48
А не проще замедлить хроматографию так, чтобы хватило времени этому медленному детектору для исследования вещества? Кстати, какой детектор? |
||
|
igorchem Пользователь Ранг: 333 |
25.08.2015 // 12:41:55
думаю, не проще, посему и вопрошаю. У детектора такие характеристики, объем исследуемой кюветы примерно 6мкл, для минимально возможного детектирования мне нужна скорость ПФ не больше 7мл/мин, а если спектры получаются схожими, то нужно иметь в сотни раз меньшую скорость, порядка 20мкл/мин, а если это пептиды и развесистая органика с кучей разных функциональных групп, то и того медленнее. Есть еще один детектор на подходе, но у него объем еще в 6 раз меньше, и соответственно скорости в 6 раз меньше. При скоростях 20мкл/мин у меня хроматограмма будет пару суток записываться, а если с другим детектором, то вообще пару недель. Если же прогнать хроматограмму на большой скорости, собрать в капилляр только пики, то на это уйдет несколько минут, а потом пики снова, но уже на медленной скорости прогнать, то суммарно можно в пол часа уложиться, и на каждый пик будет очень хороший спектр. Детектор, типа ДАД, но с линейкой длин и возбуждения, и поглощения, посему, если его не по всему спектру прогонять, то они видит пик и снимает быстро, а если хочется получить полный спектр вещества в пике, то надо реально долго ждать. Детектор не деструктивный, сильного смешения в его камере не наблюдается. Детектор самопальный. Огромная просьба, давайте детектор здесь пока не обсуждать, я, если результат будет хорошим и статью в печать примут, сразу здесь об этом детекторе похвалюсь. Спасибо |
||
|
абр Пользователь Ранг: 910 |
25.08.2015 // 15:45:51
ПМСМ, получается хроматографирование с /практически/ остановкой потока для сканирования спектра. Было такое лет 20 назад. |
||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
||
|
igorchem Пользователь Ранг: 333 |
25.08.2015 // 17:53:33
в том то и дело, что останавливать - не правильно, так как при остановке будут размываться пики, которые еще не вышли из колонки. |
||
|
абр Пользователь Ранг: 910 |
25.08.2015 // 20:33:31
Сильно не уверен, что ваш вариант лучше с точки зрения размывания пиков. Особенно не вышедших из колонки. |
||
|
igorchem Пользователь Ранг: 333 |
25.08.2015 // 21:56:16
Сильно ИМХО, но: 1. насосы обычно не могут менять скорость в больших пределах, или на не большой скорости у них будет большая неравномерность. То есть если я буду включать-выключать насос в зависимости от пика, скорость у меня будет плыть, величины удерживания - тоже. Наверное это не есть хорошо. 2. сенсор у меня устроен так, что даже на большой скорости он отвечает с небольшой задержкой, а если к этому добавить задержку по насосу, то можно пик-то и прошляпить, то есть вещество из кюветы уже вылезет и мне смысла не будет останавливать насос. 3. Любое включение-выключение насоса дают ударные волны, я не сильно представляю как они будут влиять на размазываемость пика, но и чутье модельера гидродинамики мне подсказывает, что тут что-то может поплыть. Если коса на камень зайдет, промоделирую и определю количественно. 4. конечно можно поставить два сенсора последовательно, первый грубый, второй - точный, и на основании первого отключать насос на второй, но сенсор получается дорогущий, и хотелось бы сэкономить. 5. если загонять в петлю только пики, которые хочется исследовать, то оттуда можно их выталкивать в сенсор уже на не высоком давлении, используя для этого какой-то медленный насос, а на 400+ барную помпу. Собственно эти утверждения наводят меня на мысль, что капилляр-сборник мне таки нужен, но очень хотелось бы кого-то процитировать, что де он делал, для таких-то задач, задачи очень нужны в таких-то областях. Если кто знает, пожалуйста, посоветуйте! Спасибо! |
||
|
Marlin Пользователь Ранг: 66 |
25.08.2015 // 23:30:45
Кхм, ну, Вы должны понимать, что для какой-либо частной ситуации сочетания различных techniques нельзя придумать некоего универсального и однозначного определения. Можно долго и самое главное бесполезно дискутировать на эту тему. Не нравится tandem HPLC, посмотрите вариант multidimensional (sequential) HPLC. В частности, HPLC of Peptides and Proteins: Methods and Protocols By Marie-Isabel Aguilar, гл.12, Multidimensional HPLC Purification of Proteins. Там идет речь об использовании трех последовательных шагов по очистке мышиного эпидермального фактора роста с помощью разных колонок. |
||
|
DancingStallion Пользователь Ранг: 6 |
26.08.2015 // 11:11:32
Редактировано 1 раз(а) Пользователь удалил свое сообщение |
| |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
