Российский химико-аналитический портал  химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов  
карта портала ::: расширенный поиск              
 



ANCHEM.RU » Форумы » Дискуссии ...
  Дискуссии | Список форумов | Войти в систему | Регистрация | Помощь | Последние темы | Поиск

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Hplc проблемка >>>

  Ответов в этой теме: 3

[ Ответ на тему ]


Автор Тема: Hplc проблемка
Avemondo
Пользователь
Ранг: 3

18.02.2016 // 0:07:10     
Уважаемые коллеги, нужен совет.
Картина такая: при заколе холостого раствора на выходе получаю какие то жуткие цифры оптической плотности уф детектора. Не могу понять в чем причина. Начну с условий хроматографирования а потом перейду на мои предпринятые меры.
Итак: вэжх Dionex ultimate 3000, column cosmosil c18 250*4,6; 5mkm.
Фаза: буфер (перхлорат натрия и триэтиламин с ацетонитрилом

В общем, сначала подозрения пали конечно же на детектор, поменяли дислокацию а картина повторяется. Затем убрали сначала триэтиламин(не помогло, но стало лучше, затем убрали соль. Стало совсем хорошо колонке и аборбции, но надо работать же. Заменили перхлорат на хлорную, стали колоть вроде все ок, добавили триэтиламин обратно: первый вкол прилично, а вот на второй инъекции-шило мочало поехали сначала((((
Теперь косо смотрю на колонку, может ли так колонка реагировать на модификатор в пф?
Сразу оговорюсь, что человеческий фактор исключили на первых шагах, руки не из ж..
Реклама на ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
Размещение рекламы
Олег
Пользователь
Ранг: 504


20.02.2016 // 13:16:46     

Avemondo пишет:
Уважаемые коллеги, нужен совет.
Картина такая: при заколе холостого раствора на выходе получаю какие то жуткие цифры оптической плотности уф детектора. Не могу понять в чем причина. Начну с условий хроматографирования а потом перейду на мои предпринятые меры.
Итак: вэжх Dionex ultimate 3000, column cosmosil c18 250*4,6; 5mkm.
Фаза: буфер (перхлорат натрия и триэтиламин) с ацетонитрилом

В общем, сначала подозрения пали конечно же на детектор, поменяли дислокацию а картина повторяется. Затем убрали сначала триэтиламин(не помогло, но стало лучше), затем убрали соль. Стало совсем хорошо колонке и аборбции, но надо работать же. Заменили перхлорат на хлорную, стали колоть вроде все ок, добавили триэтиламин обратно: первый вкол прилично, а вот на второй инъекции-шило мочало поехали сначала((((
Теперь косо смотрю на колонку, может ли так колонка реагировать на модификатор в пф?
Сразу оговорюсь, что человеческий фактор исключили на первых шагах, руки не из ж..

Снимите УФ отдельно хлората, ТЭА. Можно просто на волне 200 нм померять прозрачность. ПРоверьте рН, на всякий случай для колонки.
Andrew
VIP Member
Ранг: 1127


20.02.2016 // 15:48:58     
Что значит "жуткие цифры"? Когда они появляются, в мертвом объеме или позже? Пики есть или "зашкал" полный? Градиент или изократика?
Волгин
VIP Member
Ранг: 1215


22.02.2016 // 2:14:02     
Такие эффекты бывают, если смешивать буфер с ацетонитрилом непосредственно в приборе, особенно на малых процентах ацетонитрила. Надеюсь, что Вы смешиваете ВСЕ компоненты элюента заранее и качаете его одним насосом (в случае двухнасосной системы) и без переключения градиентных клапанов на входе, то есть из одной бутылки?

  Ответов в этой теме: 3

Ответ на тему



ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU:      [ Все новости ]

ЖУРНАЛ ЛАБОРАТОРИИ ЛИТЕРАТУРА ОБОРУДОВАНИЕ РАБОТА КАЛЕНДАРЬ ФОРУМ

Copyright © 2002-2009
«Аналитика-Мир профессионалов»

Размещение рекламы / Контакты