Российский химико-аналитический портал  химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов  
карта портала ::: расширенный поиск              
 



ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...
  1. Аналитический форум | Список форумов | Войти в систему | Регистрация | Помощь | Последние темы | Поиск

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Ион-парная хроматография >>>

  Ответов в этой теме: 18
  Страница: 1 2
  «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]


Автор Тема: Ион-парная хроматография
darya1907
Пользователь
Ранг: 9

08.08.2017 // 14:27:13     
Добрый день, уважаемые коллеги!
Очень нужен Ваш совет. Я подбираю условия для разделения технологических примесей в АФС. На данный момент оптимальными условиями, обеспечивающими наилучшее разделение, является вот такая хроматографическая система: колонка -Waters Xbridge С 18, 3.5 мкм, 4,6*150 мм;
Элюент А -3 mM TBAHS рН 2,2 (Н3РО4); Элюент В -ACN; Растворитель - 50% EtOH.
Режим элюирования - градиентный. Начальные условия: A:B (73:27).
Но есть проблема, с которой никак не удается справиться - в начале хроматограммы после каждого закола появляется системный пик, площадь которого не воспроизводится для заколов разных растворов. Она воспроизводится для нескольких заколов из одной виалы, но может сильно отличаться для одного и того же раствора в разных виалах.
Я пробовала менять растворитель (этанол, метанол, ацетонитрил в разных соотношениях с водой), также пробовала растворять субстанцию в подвижной фазе (отдельно в 3 mM TBAHS, в 0,02% Н3РО4, в смеси 70% 3 mM TBAHS-30% ACN), но АФС не растворяется в таких условиях. Субстанция растворима в воде, спиртах. Также я пробовала менять ион-парную добавку (тетрагексиламмония гидросульфат, тетрабутиламмония гидроксид), но ситуация с растворимостью повторяется.
Подскажите, пожалуйста, как можно избавиться от этого системного пика?
Реклама на ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
Размещение рекламы
OldBrave
Пользователь
Ранг: 683


08.08.2017 // 21:22:20     
Редактировано 1 раз(а)

1. Попробуйте использовать в качестве растворителя воду.
Как определяете, что вернулись к начальным условиям?
Шушечка
Пользователь
Ранг: 218


09.08.2017 // 8:21:47     

darya1907 пишет:
Добрый день, уважаемые коллеги!
Очень нужен Ваш совет. Я подбираю условия для разделения технологических примесей в АФС. На данный момент оптимальными условиями, обеспечивающими наилучшее разделение, является вот такая хроматографическая система: колонка -Waters Xbridge С 18, 3.5 мкм, 4,6*150 мм;
Элюент А -3 mM TBAHS рН 2,2 (Н3РО4); Элюент В -ACN; Растворитель - 50% EtOH.
Режим элюирования - градиентный. Начальные условия: A:B (73:27).
Но есть проблема, с которой никак не удается справиться - в начале хроматограммы после каждого закола появляется системный пик, площадь которого не воспроизводится для заколов разных растворов. Она воспроизводится для нескольких заколов из одной виалы, но может сильно отличаться для одного и того же раствора в разных виалах.
Я пробовала менять растворитель (этанол, метанол, ацетонитрил в разных соотношениях с водой), также пробовала растворять субстанцию в подвижной фазе (отдельно в 3 mM TBAHS, в 0,02% Н3РО4, в смеси 70% 3 mM TBAHS-30% ACN), но АФС не растворяется в таких условиях. Субстанция растворима в воде, спиртах. Также я пробовала менять ион-парную добавку (тетрагексиламмония гидросульфат, тетрабутиламмония гидроксид), но ситуация с растворимостью повторяется.
Подскажите, пожалуйста, как можно избавиться от этого системного пика?

А конечные какие условия?
Avet
Пользователь
Ранг: 426


09.08.2017 // 12:44:51     
Чтобы разобраться, для начала приведите, пожалуйста, всю таблицу градиента, от начала до конца
darya1907
Пользователь
Ранг: 9


10.08.2017 // 15:18:38     

Avet пишет:
Чтобы разобраться, для начала приведите, пожалуйста, всю таблицу градиента, от начала до конца
Таблица градиента такая:
Время, мин El A, %
0 27
30 45
35 72
40 72
45 90
55 90
56 27
65 27
Я пробовала в самом начале добавлять изократику при начальном соотношении, но это не помогает. Пробовала уравновешивать в конце 30 минут, также безуспешно.
darya1907
Пользователь
Ранг: 9


10.08.2017 // 15:21:15     

OldBrave пишет:
1. Попробуйте использовать в качестве растворителя воду.
Как определяете, что вернулись к начальным условиям?


На воде наблюдается такая же ситуация, как и на других растворителях - системный пик так и есть и разный по площади.
Реклама на ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
Размещение рекламы
AAC Спектрометр Analytik Jena contrAA® AAC Спектрометр Analytik Jena contrAA®
Атомно-абсорбционные спектрометры высокого разрешения с одним непрерывным источником спектра – ксеноновой лампой – и двойным монохроматором для проведения мультиэлементного анализа без смены ламп.
[ Информация из каталога оборудования ANCHEM.RU ]
SergeyK
Пользователь
Ранг: 728


10.08.2017 // 15:35:23     
Редактировано 1 раз(а)


darya1907 пишет:
На воде наблюдается такая же ситуация, как и на других растворителях - системный пик так и есть и разный по площади.
Может просто отстанете от него, раз он системный и не имеет отношения к аналиту?
Я понимаю ваше стремление работать процентной нормализацией, но может лучше построить градуировку по внешнему стандарту?
darya1907
Пользователь
Ранг: 9


10.08.2017 // 17:56:11     
Редактировано 1 раз(а)

Дело в том, что площадь пика меняется непредсказуемым образом, бывает, что на хроматограмме испытуемого раствора она гораздо больше. Даже фаза, смешанная в начальном соотношении элюентов, которую я одновременно разливаю в 2 разных виалы и последовательно закалываю, может сильно отличаться по площади этого системного пика. Поскольку методика на примеси и на испытуемом растворе площадь пика может быть значительно больше, чем на растворителе, то хотелось бы от него избавиться или добиться его воспроизводимости.
SergeyK
Пользователь
Ранг: 728


10.08.2017 // 18:34:03     
Не буду дублировать все вопросы из своего прошлого сообщения.
OldBrave
Пользователь
Ранг: 683


10.08.2017 // 20:32:20     
Редактировано 3 раз(а)


darya1907 пишет:
Дело в том, что площадь пика меняется непредсказуемым образом...
Наблюдаемый эффект характерен для систем с неконтролируемым pH. Зачем в элюент добавляется H3PO4? Для предсказуемости и контроля рН лучше использовать фосфатный буфер (10-20 мМоль). Подобрать рН так, чтобы Ваш товар растворялся в исходном элюенте.
Конечный состав элюента с 90% ACN - плохо, в сочетании с H3PO4 может привести к выпадению фосфатов на колонке с последующим их неконтролируемым "вылетом" при возврате к начальным условиям или со следующим вколом. Для ИПХ максимум неводной фазы 60-70% . Время удерживания можно скорректировать повышением температуры колонки, скажем до 50С.
darya1907
Пользователь
Ранг: 9


11.08.2017 // 11:25:28     

SergeyK пишет:
Не буду дублировать все вопросы из своего прошлого сообщения.
Я и собираюсь рассчитывать содержание примесей методом внешнего стандарта.

  Ответов в этой теме: 18
  Страница: 1 2
  «« назад || далее »»

Ответ на тему



ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU:      [ Все новости ]

ЖУРНАЛ ЛАБОРАТОРИИ ЛИТЕРАТУРА ОБОРУДОВАНИЕ РАБОТА КАЛЕНДАРЬ ФОРУМ

Copyright © 2002-2009
«Аналитика-Мир профессионалов»

Размещение рекламы / Контакты