Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
![]() |
|
ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
![]() |
Ион-парная хроматография >>>
|
![]() |
Автор | Тема: Ион-парная хроматография | ||
darya1907 Пользователь Ранг: 9 |
![]() Добрый день, уважаемые коллеги! Очень нужен Ваш совет. Я подбираю условия для разделения технологических примесей в АФС. На данный момент оптимальными условиями, обеспечивающими наилучшее разделение, является вот такая хроматографическая система: колонка -Waters Xbridge С 18, 3.5 мкм, 4,6*150 мм; Элюент А -3 mM TBAHS рН 2,2 (Н3РО4); Элюент В -ACN; Растворитель - 50% EtOH. Режим элюирования - градиентный. Начальные условия: A:B (73:27). Но есть проблема, с которой никак не удается справиться - в начале хроматограммы после каждого закола появляется системный пик, площадь которого не воспроизводится для заколов разных растворов. Она воспроизводится для нескольких заколов из одной виалы, но может сильно отличаться для одного и того же раствора в разных виалах. Я пробовала менять растворитель (этанол, метанол, ацетонитрил в разных соотношениях с водой), также пробовала растворять субстанцию в подвижной фазе (отдельно в 3 mM TBAHS, в 0,02% Н3РО4, в смеси 70% 3 mM TBAHS-30% ACN), но АФС не растворяется в таких условиях. Субстанция растворима в воде, спиртах. Также я пробовала менять ион-парную добавку (тетрагексиламмония гидросульфат, тетрабутиламмония гидроксид), но ситуация с растворимостью повторяется. Подскажите, пожалуйста, как можно избавиться от этого системного пика? |
||
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|||
OldBrave VIP Member Ранг: 1323 |
![]() Редактировано 1 раз(а) 1. Попробуйте использовать в качестве растворителя воду. Как определяете, что вернулись к начальным условиям? |
||
Шушечка Пользователь Ранг: 518 |
![]() А конечные какие условия? |
||
Avet Пользователь Ранг: 1086 |
![]() Чтобы разобраться, для начала приведите, пожалуйста, всю таблицу градиента, от начала до конца |
||
darya1907 Пользователь Ранг: 9 |
![]() Таблица градиента такая: Время, мин El A, % 0 27 30 45 35 72 40 72 45 90 55 90 56 27 65 27 Я пробовала в самом начале добавлять изократику при начальном соотношении, но это не помогает. Пробовала уравновешивать в конце 30 минут, также безуспешно. |
||
darya1907 Пользователь Ранг: 9 |
![]()
На воде наблюдается такая же ситуация, как и на других растворителях - системный пик так и есть и разный по площади. |
||
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
||
SergeyK Пользователь Ранг: 2168 |
![]() Редактировано 1 раз(а) Может просто отстанете от него, раз он системный и не имеет отношения к аналиту? Я понимаю ваше стремление работать процентной нормализацией, но может лучше построить градуировку по внешнему стандарту? |
||
darya1907 Пользователь Ранг: 9 |
![]() Редактировано 1 раз(а) Дело в том, что площадь пика меняется непредсказуемым образом, бывает, что на хроматограмме испытуемого раствора она гораздо больше. Даже фаза, смешанная в начальном соотношении элюентов, которую я одновременно разливаю в 2 разных виалы и последовательно закалываю, может сильно отличаться по площади этого системного пика. Поскольку методика на примеси и на испытуемом растворе площадь пика может быть значительно больше, чем на растворителе, то хотелось бы от него избавиться или добиться его воспроизводимости. |
||
SergeyK Пользователь Ранг: 2168 |
![]() Не буду дублировать все вопросы из своего прошлого сообщения. |
||
OldBrave VIP Member Ранг: 1323 |
![]() Редактировано 3 раз(а) Наблюдаемый эффект характерен для систем с неконтролируемым pH. Зачем в элюент добавляется H3PO4? Для предсказуемости и контроля рН лучше использовать фосфатный буфер (10-20 мМоль). Подобрать рН так, чтобы Ваш товар растворялся в исходном элюенте. Конечный состав элюента с 90% ACN - плохо, в сочетании с H3PO4 может привести к выпадению фосфатов на колонке с последующим их неконтролируемым "вылетом" при возврате к начальным условиям или со следующим вколом. Для ИПХ максимум неводной фазы 60-70% . Время удерживания можно скорректировать повышением температуры колонки, скажем до 50С. |
||
darya1907 Пользователь Ранг: 9 |
![]() Я и собираюсь рассчитывать содержание примесей методом внешнего стандарта. |
|
||
|
ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
Размещение рекламы / Контакты |