| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
ВЭЖХ: раздвоение пиков на новой колонке >>>
|
 |
| Автор | Тема: ВЭЖХ: раздвоение пиков на новой колонке | |||||
|
Simbirtseva Olga Пользователь Ранг: 5 |
 25.10.2018 // 9:34:17
Добрый день! Помогите, пожалуйста, разобраться в проблеме! На абсолютно новой колонке при воспроизведении методики фармакопеи USP произошло раздвоение пиков, выходящих после 10 минуты. Условия элюирования: подвижная фаза А - 0,1% водный раствор CF3COOH, подвижная фаза В - ацетонитрил. Градиент: 0 мин ПФ А:ПФ В=90:10 34 мин ПФ А:ПФ В=50:50 35 мин ПФ А:ПФ В=90:10 38 мин ПФ А:ПФ В=90:10 Растворитель для пробы ПФ А:ПФ В=50:50. Буду благодарна за помощь и советы! Спасибо за внимание! |
|||||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
||||||
|
SergeyK Пользователь Ранг: 2168 |
25.10.2018 // 9:44:39
Редактировано 3 раз(а) Хроматограммы на файлообменник положите. Прибор какой, каталожник колонки какой? Проба как готовится, кто аналиты, кто примеси, кто матрица? Детектор, длина волны. Фазы фильтровали, пробу? https://hplctips.blogspot.com/2016/09/hplc-peak-splitting-common-reasons-for.html?m=1 |
|||||
|
Simbirtseva Olga Пользователь Ранг: 5 |
25.10.2018 // 10:11:02
Прибор Waters Alliance с детектором 2998, колонка SymmetryShield RP8 (кат. WAT200670). Проба - бензокаин, 4-аминобензойная кислота и 4-нитробензойная кислота с концентрацией каждого из компонентов 1 мкг/мл. К навескам добавляют растворитель (ПФ А: ПФ В=50:50), воздействуют ультразвуком и доводят растворителем до финального объема. Фазы фильтровала и дегазировала ультразвуком. Пробу фильтровала через фильтр PTFE с диаметром пор 0,45 мкм. Длина волны - 280 нм. |
|||||
|
SergeyK Пользователь Ранг: 2168 |
25.10.2018 // 10:25:18
А объем вкола какой? До 10 минуты есть не раздвоенные пики? |
|||||
|
Шушечка Пользователь Ранг: 518 |
25.10.2018 // 10:32:16
Редактировано 1 раз(а) а это точно раздвоенные пики, а не слипшиеся? дайте фото хроматограммы |
|||||
|
Simbirtseva Olga Пользователь Ранг: 5 |
25.10.2018 // 10:36:05
Редактировано 1 раз(а) Объем вкола 20 мкл. Да - там выходит 4-аминобензойная кислота. Ее пик нормальной формы. Вот ссылка на хроматограмму: |
|||||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|||||
|
SergeyK Пользователь Ранг: 2168 |
25.10.2018 // 10:40:43
Попробуйте 5 мкл, первый пик тоже не очень хорошо выглядит, возможно, он тоже двоится, но мы этого не видим, поскольку он плохо удерживается. Колонку ацетонитрилом промыли, перед работой уравновесили? |
|||||
|
Simbirtseva Olga Пользователь Ранг: 5 |
25.10.2018 // 10:42:20
Ок, спасибо за совет! Да, колонка была подготовлена к работе должным образом. |
|||||
|
Шушечка Пользователь Ранг: 518 |
25.10.2018 // 11:36:40
посмотрела на хроматограмму... по мне так довольно не презентабельный вид.. пик почти минуту выходит и он не двоится, не путайте, он просто хвостит. Меняйте соотношение элюентов, или закисляйте.. что более вероятнее |
|||||
|
Avet Пользователь Ранг: 1086 |
25.10.2018 // 15:28:47
Симбирцева Ольга, могу посоветовать Вам провести тестовую хроматограмму по требованиям паспорта. Есть вероятность бракованной колонки. |
|||||
|
OldBrave VIP Member Ранг: 1333 |
25.10.2018 // 19:38:40
Редактировано 3 раз(а) Согласен с SergeyK. Похоже все пики двоятся и двоение увеличивается с увеличением времени выхода. Обычно такое происходит при наличии мертвого объема после петли. Поскольку, как говорите, колонка новая, - значит нужно ее правильно переустановить... |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 24
|
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
