Российский химико-аналитический портал  химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов  
карта портала ::: расширенный поиск              
 



ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...
  1. Аналитический форум | Список форумов | Войти в систему | Регистрация | Помощь | Последние темы | Поиск

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Муравьина кислота в повидоне.ВЭЖХ. Умирает колонка >>>

  Ответов в этой теме: 22
  Страница: 1 2 3
  «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]


Автор Тема: Муравьина кислота в повидоне.ВЭЖХ. Умирает колонка
Виктория1102
Пользователь
Ранг: 16

02.04.2019 // 15:57:43     
Верифицирую методику муравьиная кислота в повидоне. Методика ЕР 0685. При заколе стандартного образца (р-р муравьиной кислоты) уменьшается число ТТ. Из-за этого не проходит пригодность системы (RSD превышает 2,0%). Подскажите, с чем это может быть связано?
Колонка SUPELCOGEL C-610H. ПФ - хлорная к-та (1мл на 700воды)
Ниже привожу фото со сходимостью, динамику уменьшения числа тарелок и пример послед-ти.

[url=https://radikal.ru][/url]

[url=https://radikal.ru][/url]

[url=https://radikal.ru][/url]
Реклама на ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
Размещение рекламы
SergeyK
Пользователь
Ранг: 1628


02.04.2019 // 17:57:46     
Расскажите, как у вас родится высокочистая деионизованная вода с удельным сопротивлением 18,2 МОм*см в лаборатории.
Виктория1102
Пользователь
Ранг: 16


02.04.2019 // 19:18:28     

SergeyK пишет:
Расскажите, как у вас родится высокочистая деионизованная вода с удельным сопротивлением 18,2 МОм*см в лаборатории.

Стоит система очистки воды Milli-Q
vmu
Пользователь
Ранг: 287


02.04.2019 // 19:31:04     
Редактировано 2 раз(а)

RSD по площади пика (1.1%) и по времени удерживания у вас в норме. Вы, я полагаю, додумались для такого кривого пика считать RSD высоты пика (4.2%).
Число тарелок, конечно, падает, но пока неясно, у вас дохнет колонка или, наоборот, система стабилизируется, и пик становится более симметричным, но более широким на половине высоты.
Кстати, по ЕФ ПФ - 5 мл хлорной кислоты на 1 л.
Давление какое? Ниже максимального допустимого для этой колонки? Меняется по ходу последовательности?
Виктория1102
Пользователь
Ранг: 16


02.04.2019 // 20:35:34     

vmu пишет:
RSD по площади пика (1.1%) и по времени удерживания у вас в норме. Вы, я полагаю, додумались для такого кривого пика считать RSD высоты пика (4.2%).
Число тарелок, конечно, падает, но пока неясно, у вас дохнет колонка или, наоборот, система стабилизируется, и пик становится более симметричным, но более широким на половине высоты.
Кстати, по ЕФ ПФ - 5 мл хлорной кислоты на 1 л.
Давление какое? Ниже максимального допустимого для этой колонки? Меняется по ходу последовательности?


RSD по 6 инжекциям в норме, да. Но помимо этого для подтверждения нормального
функционирования системы по ходу анализа вводится стандартный раствор - Calibration , он же SST (брэкетинг).
[url=https://radikal.ru][/url]
Давление 56bar (стабильно по ходу последовательности), максимум для колонки 68 bar согласно CoA производителя. Колонка новая. Когда делала апробацию чило тарелок было 18000, сейчас снизилось до 2000.
То, что в ЕФ мало интересует, тк методику нужно верифицировать именно ЕР.
vmu
Пользователь
Ранг: 287


02.04.2019 // 20:44:09     
Редактировано 1 раз(а)


Виктория1102 пишет:
... брэкетинг ...
То, что в ЕФ мало интересует, тк методику нужно верифицировать именно ЕР.

Проверьте параметры автоматической разметки пиков (или хотя бы для себя пока разметьте пики вручную). Форма пика меняется по ходу последовательности, и в конце пик может быть просто неправильно размечен, за счет чего его площадь оказывается сильно ниже, чем в начале.
ЕФ (Европейская фармакопея) = EP (European pharmacopeia). Там 5 мл/л HClO4.
Еще о нормальном функционировании системы: снижающиеся тарелки вас смущают, а низкий фактор асимметрии пика (<<1) нет?
Реклама на ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
Размещение рекламы
«МС-АНАЛИТИКА», ЗАО «МС-АНАЛИТИКА», ЗАО
Авторизованный дистрибьютор масс-спектрометрического и хроматографического оборудования Thermo Fisher Scientific
Виктория1102
Пользователь
Ранг: 16


02.04.2019 // 21:07:01     


Проверьте параметры автоматической разметки пиков (или хотя бы для себя пока разметьте пики вручную). Форма пика меняется по ходу последовательности, и в конце пик может быть просто неправильно размечен, за счет чего его площадь оказывается сильно ниже, чем в начале.
ЕФ (Европейская фармакопея) = EP (European pharmacopeia). Там 5 мл/л HClO4.
Еще о нормальном функционировании системы: снижающиеся тарелки вас смущают, а низкий фактор асимметрии пика (<<1) нет?

Подумала,про Евразийскую пишете)
Форму проверяла, все ок.
По поводу асиметрии в ЕР сказано: symmetry factor: 0.5 to 1.5
Так что с ним более менее все ок.
По поводу ПФ: Mobile phase: dilute 1 mL of perchloric acid R to 700 mL with water for chromatography R.
Какую версию ЕР смотрите? 9.7?
SergeyK
Пользователь
Ранг: 1628


02.04.2019 // 21:20:39     
Редактировано 2 раз(а)


Виктория1102 пишет:

SergeyK пишет:
Расскажите, как у вас родится высокочистая деионизованная вода с удельным сопротивлением 18,2 МОм*см в лаборатории.
Стоит система очистки воды Milli-Q

А обслуживание она регулярно видит?
Проследите тренд, меньше, чем через 50 заколов у вас высота пика будет 0, а вы даже калибровку не строите еще.
habrastorage.org/webt/mf/be/hj/mfbehjmc-1yxhm6ut-tlwcjnedo.png
vmu
Пользователь
Ранг: 287


02.04.2019 // 21:30:29     
Редактировано 1 раз(а)


Виктория1102 пишет:
Форму проверяла, все ок.
По поводу асиметрии в ЕР сказано: symmetry factor: 0.5 to 1.5
Так что с ним более менее все ок.
По поводу ПФ: Mobile phase: dilute 1 mL of perchloric acid R to 700 mL with water for chromatography R.
Какую версию ЕР смотрите? 9.7?

По вашей хроматограмме с формой пика не все OK.
Фармакопея, которая сейчас под рукой, издания 8.0.
Она есть здесь:
fptl.ru/biblioteka/farmakopei/evropeyskaya-farmakopeya_8_vol-2.pdf
Там же есть первый том:
www.fptl.ru/biblioteka/farmakopei/evropeyskaya_farmakopeya_8_vol-1.pdf
В более поздней версии ЕФ методика на муравьинку в повидоне вроде не менялась. Хотя точно сейчас не скажу. Можете проверить это в EDQM knowledge database (гуглите); у меня она сейчас почему-то не загружается.
Update. Загрузилась (https://extranet.edqm.eu/4DLink1/4DCGI/Web_View/mono/685), посмотрел history. Да, изменения в методике есть:
Formic acid: LC parameters altered: column size, particle size, temperature, mobile phase, flow rate; quantification approach used instead of limit test.

Про фактор асимметрии откуда взяли? В статье на повидон есть только требование к RSD (в ЕФ 8.0). В общей статье 2.2.46. CHROMATOGRAPHIC SEPARATION TECHNIQUES есть общее требование (которое в данном конкретном случае может быть неприменимо): in a related substances test or assay, for a peak in the chromatogram obtained with a reference solution used for quantification, the symmetry factor is 0.8 to 1.5, unless otherwise prescribed.
Для фактора асимметрии, такого, который считается в ЕФ, ГФ и USP, значение 0.5 - это нижняя нереализуемая (только асимптотически достижимая) граница, соответствующая пику с бесконечно размытой передней частью или пику с абсолютно вертикальной от самого максимума спадающей частью.
Виктория1102
Пользователь
Ранг: 16


02.04.2019 // 22:01:52     

SergeyK пишет:
А обслуживание она регулярно видит?
Проследите тренд, меньше, чем через 50 заколов у вас высота пика будет 0, а вы даже калибровку не строите еще.
habrastorage.org/webt/mf/be/hj/mfbehjmc-1yxhm6ut-tlwcjnedo.png

Да ,обслуживание регулярное. Считаете дело в воде? ПФ фильтровала через 0.2мкм
vmu
Пользователь
Ранг: 287


02.04.2019 // 22:05:38     
Посмотрел еще USP41. Там, похоже, методика такая же, как в EP 9.

Mobile phase: Diluted perchloric acid (1 in 700).
Column: 7.8-mm × 30-cm; 9-µm packing L17
Column temperature: 35°
Flow rate: 1.0 mL/min

Suitability requirements
Column efficiency: NLT 1000 theoretical plates for the formic acid peak
Symmetry factor: 0.5–1.5 for the formic acid peak
Relative standard deviation: NMT 2.0% of formic acid for six injections.

Здесь тоже нижняя граница для асимметрии - 0.5, но это не отменяет того факта, что эта граница - теоретический предел. Впрочем, если пик выглядит, как прямоугольный треугольник, и фактор асимметрии близок к 0.5, но пик можно нормально разметить, и RSD площади пика в норме, то возражений против такого пика не имею.

  Ответов в этой теме: 22
  Страница: 1 2 3
  «« назад || далее »»

Ответ на тему



ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU:      [ Все новости ]

ЖУРНАЛ ЛАБОРАТОРИИ ЛИТЕРАТУРА ОБОРУДОВАНИЕ РАБОТА КАЛЕНДАРЬ ФОРУМ

Copyright © 2002-2009
«Аналитика-Мир профессионалов»

Размещение рекламы / Контакты