Российский химико-аналитический портал  химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов  
карта портала ::: расширенный поиск              
 



ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...
  1. Аналитический форум | Список форумов | Войти в систему | Регистрация | Помощь | Последние темы | Поиск

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Проблема при анализе сорбиновой и бензойной кислот. >>>

  Ответов в этой теме: 18
  Страница: 1 2
  «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]


Автор Тема: Проблема при анализе сорбиновой и бензойной кислот.
Роберто
Пользователь
Ранг: 45

09.09.2020 // 17:25:19     
Редактировано 2 раз(а)

Здравствуйте возникла проблема при анализе сорбиновой и бензойной кислот. Нет разделения пиков по времени, выходят одна за другой практически через 0,5 минуты одна за другой.
Колонка: Luna С18(2) 150х4,6 мм 5 мкм(Phenomenex)
ПФ: 20%ACN;80% бидис. вода подкисленная фосфорной кислотой до pH=2,5
температура термостата: 30*С
скорость потока: 1,0 мл/мин;
объем петли: 20 мкл;
детектирование: спектрофотометрическое; длина волны 230 нм для бензойной кислоты, 254 нм для сорбиновой кислоты

Также есть колонка Eurospher 100-5 C18 250x4,6 при тех же условиях так же нет разделения кислот.
Год назад работали на колонке Microsorb MV100-5 C18 150x4,6 разделение было хорошее время между выходом сорбиновой и бензойной кислот было 5-7 минут.

Тут прописаны условия хром. сравнения двух колонок:Phenomenex Luna 5 µm C18(2) и Hypersil-Keystone® HyPURITY™ Elite 5 µm C18. Там есть но как по мне очень слабое разделение, у меня на полученных хроматограмме произошло наложение пиков
https://www.onelab.com.ar/Images/uploaded/Luna%20Phenomenex.pdf

Реклама на ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
Размещение рекламы
vmu
Пользователь
Ранг: 559


09.09.2020 // 20:21:52     
Редактировано 1 раз(а)

Времена удерживания какие? Какое разрешение пиков? Число тарелок? Асимметрия пиков? Разница 0,5 мин мало о чем говорит. Rs ≥ 1,5 не получается? Если причина плохого разделения просто в слабом удерживании веществ, можно снизить долю ACN в ПФ.

На более длинной колонке Luna C18(2) с похожей ПФ делятся с разрешением около 1,5:
www.prochrom.ru/ru/?idp=hgr&id=22
Роберто
Пользователь
Ранг: 45


10.09.2020 // 5:04:01     
Редактировано 1 раз(а)

Забыл указать времена выходя кислот.Для Сорбиновой 13,84 мин, бензойная кислота 14,50 минут. Пики симметричные. Попробую снизить кон-цию ACN
vmu
Пользователь
Ранг: 559


10.09.2020 // 7:02:55     
Редактировано 1 раз(а)

Времена говорят, что удерживание достаточно высокое (факторы удерживания в районе 9), поэтому снижение доли ACN, еще увеличив времена, уже вряд ли существенно улучшит разрешение, но попробовать можно. Значит селективности данной системы фаз маловато для разделения. Можно еще поиграть с ПФ, например взяв метанол вместо ACN (только долю побольше). Либо пробуйте другую колонку. Либо можно идти в сторону увеличения эффективности (большая длина колонки или меньший диаметр частиц). Как вариант, еще можно попробовать снизить температуру до 20 градусов. В принципе можно еще попробовать увеличить долю ACN: факторы удерживания уменьшатся, но может подрасти селективность.
voodensky
Пользователь
Ранг: 220


10.09.2020 // 8:59:05     
А что за образец?
попробуйте увеличить pH. У бензойной кислоты pKa=4.2, у сорбиновой 4,8. В промежуточном pH одна будет заряжена и удерживаться хуже, вторая - нет и удерживаться лучше.
Например,
www.academia.edu/download/47574478/Simultaneous_determination_of_preservati20160727-2565-1uiq31u.pdf делают при pH 4.4
https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S0963996900000144 тоже делают при pH 4.4
Роберто
Пользователь
Ранг: 45


10.09.2020 // 16:30:50     
Редактировано 1 раз(а)

Спасибо за ответы. Снизил концентрацию ацетонитрила до 17 % Сорбиновая 15,42 мин , бензойная 16,22 мин кислоты. Думаю pH до 4,4 довести проверить как будет делится. Метанола нет, заказываю все ни как купить не могут. Спасибо еще раз за ответы.
Voodensky, напитки безалкогольные. К сожалению по первой ссылке файла нет
Реклама на ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
Размещение рекламы
Реометр TA Instruments AR2000ex Реометр TA Instruments AR2000ex
Реометр AR2000ex в настоящий момент является наиболее покупаемым реометром в мире. Благодаря широкому диапазону вращающего момента, превосходному разрешению по деформации, широкому диапазону частот и удобству интерфейса данный прибор предельно гибок и подходит для широкого круга задач включая жидкости с низкой вязкостью, расплавы полимеров, твердые и термореактивниые материалы.
[ Информация из каталога оборудования ANCHEM.RU ]
voodensky
Пользователь
Ранг: 220


10.09.2020 // 18:42:08     

Роберто пишет:
Спасибо за ответы. Снизил концентрацию ацетонитрила до 17 % Сорбиновая 15,42 мин , бензойная 16,22 мин кислоты. Думаю pH до 4,4 довести проверить как будет делится. Метанола нет, заказываю все ни как купить не могут. Спасибо еще раз за ответы.
Voodensky, напитки безалкогольные. К сожалению по первой ссылке файла нет

В ссылке часть названия, найти легко.
Только помните о том, что pKa указаны для водных растворов, а не для водноорганических.
vmu
Пользователь
Ранг: 559


10.09.2020 // 20:03:19     

Роберто пишет:
Снизил концентрацию ацетонитрила до 17 % Сорбиновая 15,42 мин , бензойная 16,22 мин кислоты.
Разрешение-то пиков какое?
OldBrave
VIP Member
Ранг: 1121


10.09.2020 // 22:38:39     
Редактировано 1 раз(а)


Роберто пишет:
Здравствуйте возникла проблема при анализе сорбиновой и бензойной кислот. Нет разделения пиков по времени...

235 нм, 50С, ACN/ацетатный буфер(рН 3,5-4,0) 20 : 80, 10 мкл, 1,0 мл/мин
Роберто
Пользователь
Ранг: 45


11.09.2020 // 18:08:40     

vmu пишет:

Роберто пишет:
Снизил концентрацию ацетонитрила до 17 % Сорбиновая 15,42 мин , бензойная 16,22 мин кислоты.
Разрешение-то пиков какое?


Здравствуйте, сори. Rs=1.78 .Слабоватое, может стоит температуру снизить до 25*С хотя пока это сложно, жарко в помещении или снизить концентрацию ACN до 15% хотя думаю время выхода сместится в право сильно . В аттестованной методике от Аквилона при 20*С работают.
vmu
Пользователь
Ранг: 559


11.09.2020 // 19:20:04     
Редактировано 1 раз(а)


Роберто пишет:
Rs=1.78 .Слабоватое
Слабоватое? Пики полностью разделены. Чего еще надо?
Разрешение есть смысл пытаться увеличить только в том случае, если вы собираетесь определять оба компонента при их сильно разном содержании, а точнее когда их пики сильно отличаются по величине (раз в 100 и больше). В этом случае разрешения около 1.5 уже будет недостаточно, и маленький пик будет частично или полностью "съедаться" большим пиком. Но анализ напитков - не такой случай.

  Ответов в этой теме: 18
  Страница: 1 2
  «« назад || далее »»

Ответ на тему



ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU:      [ Все новости ]

ЖУРНАЛ ЛАБОРАТОРИИ ЛИТЕРАТУРА ОБОРУДОВАНИЕ РАБОТА КАЛЕНДАРЬ ФОРУМ

Copyright © 2002-2009
«Аналитика-Мир профессионалов»

Размещение рекламы / Контакты