an123456
Пользователь
Ранг: 30
|
 05.02.2022 // 11:41:22
vmu пишет:
Метанол/ацетонитрил - непринципиально. Они без проблем смешиваются. Была бы колонка, например, в гексане, неполностью смешивающимся с ацетонитрилом (так бывает у нормально-фазовых колонок), ее сначала следовало бы промыть изопропанолом (смешивается и с гексаном, и с ацетонитрилом, и с водой), а затем уже ацетонитрилом.
Главное правило, чтобы при смешении компонентов не выпадали осадки. Это и колонке и прибору может повредить (например, при перемывке колонки или прибора с достаточно концентрированного раствора соли сразу на органический растворитель).
Про "анализы пошли потоком без выключения насоса" - какая-то неясная мысль. Когда по одной пробе колете, насос тоже не выключается сразу после одной хроматограммы (?) и перед анализом должен поработать для уравновешивания. Возможно, что с единичными (в день?) пробами в совокупности получалось так, что колонка дольше промывалась, что облегчало ее жизнь. Но это все догадки. Без подробностей по вашим анализам ничего однозначно не скажешь.
По промывке в конце дня ориентируйтесь на минимальный объем ПФ, равный 10-20 объемам колонки. А лучше смотрите, когда сигнал детектора выходит на ровную линию.
Синтетические субстанции (лекарственные?) обычно весьма чистые (индивидуальное вещество с минимальным количеством примесей). Такие пробы - одни из самых безопасных для колонки. Ни в какое сравнение не идут с экстрактами из природного объекта.
Производитель не запрещает промывку колонки обратным током, так что можете пробовать.
Вообще, читайте учебники по ВЭЖХ.
например, Сычев в своих учебниках вообще пишет, что необходимо избегать частых промывок ))
Спасибо за емкие и развёрнутые ответы.
|
ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
|
|
an123456
Пользователь
Ранг: 30
|
05.02.2022 // 11:42:43
Редактировано 2 раз(а)
Пользователь удалил свое сообщение
|
an123456
Пользователь
Ранг: 30
|
05.02.2022 // 11:49:43
voodensky пишет:
Вставлю и свои 5 копеек.
У вас градиент, поэтому проверяйте растворимость не только в начальных условиях, но и в конечных. Иногда бывает, что образец в водных растворах растворяется хорошо, а при высоких концентрациях ацетонитрила - выпадает осадок.
Да, но и осадка визуально можно не заметить, а в колонке он может выпасть
|
vmu
Пользователь
Ранг: 1337
|
05.02.2022 // 12:47:47
an123456 пишет:
например, Сычев в своих учебниках вообще пишет, что необходимо избегать частых промывок ))
Либо это бред, либо вы что-то не так поняли. Что такое "частых промывок"? Сколько надо - столько и моете. В колонке не должно оставаться ничего лишнего.
|
vmu
Пользователь
Ранг: 1337
|
05.02.2022 // 12:49:41
Редактировано 1 раз(а)
an123456 пишет:
Да, но и осадка визуально можно не заметить, а в колонке он может выпасть
Естественно. Поэтому надо хотя бы примерно знать, что может быть в вашей пробе, в чем оно растворимо, в чем - нет. Хотя с такими сложными многокомпонентными пробами, как у вас, всего не учтешь.
|
Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246 |
|
vmu
Пользователь
Ранг: 1337
|
05.02.2022 // 12:55:18
voodensky пишет:
У вас градиент, поэтому проверяйте растворимость не только в начальных условиях, но и в конечных. Иногда бывает, что образец в водных растворах растворяется хорошо, а при высоких концентрациях ацетонитрила - выпадает осадок.
Такие компоненты смоются с колонки в еще в начале градиента, до достижения высокой доли ацетонитрила.
|
an123456
Пользователь
Ранг: 30
|
08.02.2022 // 22:06:54
vmu пишет:
an123456 пишет:
Да, но и осадка визуально можно не заметить, а в колонке он может выпасть
Естественно. Поэтому надо хотя бы примерно знать, что может быть в вашей пробе, в чем оно растворимо, в чем - нет. Хотя с такими сложными многокомпонентными пробами, как у вас, всего не учтешь.
Оказалось, что дело всё-таки не в колонке, а в приборе. Поэтому давление нормализовалось. Быть может, есть какие-то нюансы работы с такими пробами, чтобы сохранить подольше колонку, если нет предколонки (кроме хорошего фильтрования проб)?
И в целом, даже если чистые вещества закалывают - повышение давления больше первоначального - повод списывать колонку ? Сколько колонка может анализов проработать без повышения давления?
|
OldBrave
VIP Member
Ранг: 1333
|
09.02.2022 // 15:14:37
Редактировано 1 раз(а)
an123456 пишет:
...Быть может, есть какие-то нюансы работы с такими пробами, чтобы сохранить подольше колонку, если нет предколонки (кроме хорошего фильтрования проб)?
И в целом, даже если чистые вещества закалывают - повышение давления больше первоначального - повод списывать колонку ? Сколько колонка может анализов проработать без повышения давления?
Предколонку следует использовать обязательно. Кроме фильтрования (0,2 мкм) с успехом применяют центрифугирование (~10 тыс.об./мин, 1-15 мин). В большинстве случаев центрифугирование более эффективно.
|
OldBrave
VIP Member
Ранг: 1333
|
09.02.2022 // 15:14:37
an123456 пишет:
...Быть может, есть какие-то нюансы работы с такими пробами, чтобы сохранить подольше колонку, если нет предколонки (кроме хорошего фильтрования проб)?
И в целом, даже если чистые вещества закалывают - повышение давления больше первоначального - повод списывать колонку ? Сколько колонка может анализов проработать без повышения давления?
Предколонку следует использовать обязательно. Кроме фильтрования (0,2 мкм) с успехом применяют центрифугирование (~10 тыс.об./мин, 5 мин). В большинстве случает центрифугирование более эффективно.
|
an123456
Пользователь
Ранг: 30
|
09.02.2022 // 18:18:43
OldBrave пишет:
an123456 пишет:
...Быть может, есть какие-то нюансы работы с такими пробами, чтобы сохранить подольше колонку, если нет предколонки (кроме хорошего фильтрования проб)?
И в целом, даже если чистые вещества закалывают - повышение давления больше первоначального - повод списывать колонку ? Сколько колонка может анализов проработать без повышения давления?
Предколонку следует использовать обязательно. Кроме фильтрования (0,2 мкм) с успехом применяют центрифугирование (~10 тыс.об./мин, 1-15 мин). В большинстве случаев центрифугирование более эффективно.
Спасибо, а по поводу промывки, может есть какие-то особенности?
|
[]
