| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Пробоподготовка биоматериала, варианты, достоинства и недостатки. >>>
|
 |
| Автор | Тема: Пробоподготовка биоматериала, варианты, достоинства и недостатки. |
|
Slawa Пользователь Ранг: 323 |
 24.06.2007 // 17:35:44
Здравствуйте. Меня интересует вопрос пробоподготовки сыворотки крови, для определения в ней биологически активных веществ хроматографическими методами. Понимаю, вопрос не конкретный. Хочется просто, чтобы гуру этого форума поделились своими соображениями и опытом что лучше. Так например я вижу только три варианта пробоподготовки: 1. экстракция несмешивающимся с сывороткой растворителем (хлороформ, смеси органических растворителей) 2. экстракция смешивающимся с сывороткой растворителем (ацетонитрил, ацетон) с последующим высаливанием органического растворителя, при этом происходит осаждение белков 3. твёрдофазная экстракция (с предварительным осаждением белков и без осаждения). (ферментативный вариант пробоподготовки - экзотика, его не трогаем). Что лучше при прочих равных условиях? Хотелось бы по каждому варианту небольшой ликбез. Например, что-то мне подсказывает, что если выбирать между первым и третьим вариантом, то ТФЭ более робастный метод, поскольку экстракция может сильно зависеть от температуры в лаборатории. При использовании второго варианта возможно инкапсулирование аналита осаждёнными белками -надо использовать вортекс. Кроме того здесь нет концентрирования пробы. При использовании ТФЭ на C18 я заметил, что успешно разработать методику пробоподготовки можно для веществ с LogK вода/октанол 2,5-4, иначе они либо слабо садятся на колонку, либо намертво. Вобщем хотелось бы просто пообщаться вокруг темы "пробоподготовка" |
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|
Farma Пользователь Ранг: 382 |
24.06.2007 // 19:19:37
Мы уже долгое время используем для описанных Вами задач метод ин-лайн ТФЭ (то есть твердофазная экстракция, встроенная в ВЭЖХ систему). Применяем мерковские картриджи Lichrospher ADS с обращённой фазой. Не променяем данный метод уже ни на что другое, так как хорошо его "прочувствовали". Если коротко, то преимущества следующие: быстро (вся процедура пробоподготовки занимает не более 15 минут), экономично (тратим несколько сот микролитров пробы), автоматизировано (подготовка не требует ручных действий, всё программируется в программе хроматографа), отличная воспроизводимость результатов, не сравнить с обычной ЖЖЭ (результат полной автоматизации), высокое извлечение (не менее 90% по интересующим нас фармацевтическим компонентам). Минус на мой взгляд один - нужен ещё один шестиходовой кран и насос. |
|
Islander VIP Member Ранг: 1065 |
25.06.2007 // 4:53:51
Редактировано 1 раз(а) Небольшой не получится - на эту тему опубликовано несколько монографий (вряд ли переведенных на русский). Да и перечислили Вы не все. Если коротко, то при разработке пробоподготовки надо, с одной стороны, обеспечить требуемую селективность, сохранив чувствительность, и с другой стороны, достичь этого минимальными затратами средств и времени. Это важно, если разрабатываемый анализ будет выполняться тысячи раз. Так что в каждом конкретном случае оптимальный метод пробоподготовки будет свой.
Не знаю, какие у Вас критерии при валидации методик, но если речь не идет о скриннинге, то здесь могут подстерегать два основных подводных камня. Первый - стабильность анализируемого вещества в матрице. Иногда время между первым и последним анализом в серии слишком велико и необходимо провести предварительную экстракцию (или даже дериватизацию), чтобы "заморозить" концентрацию лабильного вещества на его уровне в момент отбора пробы. Второй - последовательное загрязнение проб. Увы, в он-лайн экстракции иногда бывает трудно от нее избавиться (но это зависит от жесткости предъявляемых требований). Во многих случаях этот подход работает хорошо. Но не во всех. К тому же, это не единственный способ он-лайн пробоподготовки. В схожем аппаратурном оформлении существует также так называемое "фракционирование в турбулентном потоке". Флаг Вам в руки. Я лично поостерегусь выступать с подобными заявлениями. |
|
Gravis Пользователь Ранг: 4 |
22.08.2017 // 22:09:28
Здравствуйте, какие наиболее подходящие патроны с сорбентом для ТФЭ можно применить для очистки органических экстрактов при определении: 1) стероидных сапонинов 2) стероидных алкалоидов 3) фитоэкдистероидов?? |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 3 |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
