Российский химико-аналитический портал | химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
|
ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
гельфильтрация липосом >>>
|
Автор | Тема: гельфильтрация липосом | ||
Alex Пользователь Ранг: 36 |
07.07.2004 // 17:37:48
Уважаемые хроматографисты, кто занимался проблемой определения низкомолекулярных компонентов на фоне полимеров ? Задача - определение невключённого в липосомы вещества. Теоретически задача похожа на определение пластификаторов в полимерах, но какая нужна колонка, мне трудно выбрать. Приблизитенльный размер липосом - до 200нм. |
||
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|||
Леонид VIP Member Ранг: 5266 |
12.07.2004 // 8:49:22
Липосомы видимо проще всего отфильтровать на капроновых или тефлоновых мембранах с порами 0,1 мкм. Такие мембраны выпускаются отечественной промышленностью. |
||
Alex Пользователь Ранг: 36 |
12.07.2004 // 12:08:44
Леонид, спасибо за ответ. Моя проблемма не отфильтровать, а разделить липосомы и низкомолекулярные (100-200 АЕМ) компоненты. Как Вы думаете, на какой колонке это может пойти. Япробовал на GF-450 в водных средах - не пошло (т.е. вообще ничего не вышло ) |
||
Леонид VIP Member Ранг: 5266 |
12.07.2004 // 12:14:08
Алекс! Я понял вашу задачу. Только, как мне кажется, липосомы - слишком крупные частицы даже для гель-хроматографии, они просто застряли в колонке. Вы действительно можете отфильтровать липосомы, а низкомолекулярные вещества проанализировать в фильтрате на обычной обращенной фазе. Так вы и узнаете сколько вещества у вас захвачено внутрь липосом, а сколько осталось в виде истинного раствора. |
||
Alex Пользователь Ранг: 36 |
12.07.2004 // 12:59:43
Леонид, скажите пожалуйста, а есть фильтры с размером пор менее 0,1 мкм? |
||
Леонид VIP Member Ранг: 5266 |
12.07.2004 // 13:08:13
Лично мне встречать не приходилось. Но наверняка есть. Это мембраны, приближающиеся по свойствам к диализным. Кстати! А не думали ли вы использовать диализ или электродиализ для отделения липосом от низкомолекулярных компонентов. Для полимеров это проходит на "ура". |
||
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
||
Alex Пользователь Ранг: 36 |
12.07.2004 // 13:26:19
С методом диализа и электродиализа знаком чисто теоретически, а что для него нужно? Леонид, при фильтрации на таких фильтрах (100 нм) наверняк необходимо высокое давление или вакуум, на практике Вы с этим встречались? |
||
Леонид VIP Member Ранг: 5266 |
12.07.2004 // 13:54:29
Для электродиализа нужно специальное оборудование, которое у вас наверняка отсутствует. А обычный диализ можно организовать из подручных материалов. Для этого нужен перистальтический насос и непосредственно диализная мембрана (специальный целлофан или полиамид), которой перегораживается надвое любой сосуд. В одну камеру заливаете свой раствор, а в другую - дист. воду. Через некоторое время процесс миграции низкомолекулярных веществ в воду закончится и концентрация их станет равной. После этого анализируете водный раствор и находите концентрацию целевого вещества. Расчитать первоначальную концентрацию - дело техники. Такие мембраны находятся в диализных патронах аппаратов "искуственной почки". Что касается фильтрации через мембранные фильтры, то особо большого перепада давления там не нужно. Но спецоборудование для фильтрации под давлением или вакуумом, так называемые манифолды - просто необходимо. Но благо - это сейчас не дефицит и многие фирмы, торгующие оборудованием и реактивами смогут его поставить. Стоит оно относительно не дорого. Все зависит от объемов, с которыми вам предстоит работать. |
||
Alex Пользователь Ранг: 36 |
12.07.2004 // 14:24:27
Леонид, большое спасибо. Я всё ещё теплю надежду сделать это гельфильтрацией, но вариант с фильтрами (сейчас смотрю каталоги) и диализом попробую. |
||
Alex Пользователь Ранг: 36 |
12.07.2004 // 14:27:25
Один вопрос вдогонку- зачем нижен перистальтический насос? |
||
Леонид VIP Member Ранг: 5266 |
12.07.2004 // 14:33:37
При помощи его организуют рециркуляцию жидкости в ячейке для более быстрого установления концентрационного равновесия по разные стороны мембраны, но в примитивном варианте можно обойтись и обычной магнитной мешалкой. |
|
||
Ответов в этой теме: 22
|
|
ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
Размещение рекламы / Контакты |