| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Жидкосная хроматография, затянут конец пика >>>
|
 |
|
Lesenok Пользователь Ранг: 14 |
 09.06.2008 // 14:54:58
Спасибо, попробую, если что то снова к Вам прийду 
|
|||||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
||||||
|
Farma Пользователь Ранг: 382 |
09.06.2008 // 15:17:04
"Ну, это нормально", как говорил герой Машкова. С новой всегда всякая непрореагировавшая дрянь лезет. может, проблема в том, что Вы её в равновесие с подвижной фазой не привели? Попробуйте подольше уравновесить. |
|||||
|
Волгин VIP Member Ранг: 1327 |
09.06.2008 // 15:57:32
Вот по этому поводу позвольте рассказать древнюю историю. Как-то на одной из моих прежних работ  нужно было срочно послать тезисы на какую-то конференцию за бугор, чтобы начальник туда съездил. Взяли несколько колонок С8 и С18 и в одном и том же граиенте 10 - 90%ACN в 0.01% TFA прокололи смесь одних и тех же чистых пептидов и белков. После этого колонки тщательно отмыли и законсервировали. Где-то через год-полтора понадобилась колонка с Zorbax ODS. При промывке с нее тоже что-то безобразно лезло, а при тестировании также безобразно были затянуты пики. Как ни грустно, но такой же результат был с колонкой Vydac C18 300A специально предназначенной для пептидов и вышеуказанных условий... Возможно, Зорбаксы последующих поколений и лучше, но старые...
|
|||||
|
virtu VIP Member Ранг: 2135 |
09.06.2008 // 17:08:43
to Lesenok: если ВСЕ пики стандартной смеси так же будут "хвостить" - ищите "лишние мертвые объемы", может где-то плохо затянуто или деформация (колонку Вы же переставляли) и т.д. Проверьте кстати посткол. дериватизацию (просто уберите её и поставьте УФ на выход). to Волгин: часть белков, наверно, просто необратимо "села", хотя такие предположения надо проверять сразу после использования сорбента. to Farma: вряд ли, для этих сорбатов и в этом хром. режиме, если сорбент недоуровновешен - это будет основной причиной таких "хвостов". |
|||||
|
Farma Пользователь Ранг: 382 |
09.06.2008 // 21:40:54
Вот по этому поводу позвольте рассказать древнюю историю. Как-то на одной из моих прежних работ нужно было срочно послать тезисы на какую-то конференцию за бугор, чтобы начальник туда съездил. Взяли несколько колонок С8 и С18 и в одном и том же граиенте 10 - 90%ACN в 0.01% TFA прокололи смесь одних и тех же чистых пептидов и белков. После этого колонки тщательно отмыли и законсервировали. Где-то через год-полтора понадобилась колонка с Zorbax ODS. При промывке с нее тоже что-то безобразно лезло, а при тестировании также безобразно были затянуты пики. Как ни грустно, но такой же результат был с колонкой Vydac C18 300A специально предназначенной для пептидов и вышеуказанных условий... Возможно, Зорбаксы последующих поколений и лучше, но старые...История, конечно, поучительная , но не надо забывать, что белки с большим трудом можно рассматривать в качестве тестовой смеси для обычной ODS колонки. Поэтому, результаты данного эксперимента лично мне ничего не говорят ни за, ни против Зорбакса. А вот насчёт Вудака - действительно интересная инфа...
|
|||||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|||||
|
Farma Пользователь Ранг: 382 |
09.06.2008 // 21:42:48
Так а кто его знает, что есть "основное", а что "побочное" Не попробуешь - не узнаешь. А как раз данный момент проверить будет проще простого. |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 26
|
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
