Форумы ANCHEM.RU: Methylene blue

Российский химико-аналитический портал

химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов

карта портала ::: расширенный поиск

ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Methylene blue >>>

  Ответов в этой теме: 30
  Страница: 1 2 3
  «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]

Puzir
Пользователь
Ранг: 45

21.03.2005 // 13:19:52

Islander пишет:

Предлагаю взять нитрильную колонку, подвижную фазу ацетонитрил (80-95%) вода (5-15%) трифторуксусная кислота (0.01%-0.1%). Если удерживание слишком сильное, увеличьте содержание воды и/или ТФУК в подвижной фазе или добавьте 5-10% метанола. Для формы пика может также помочь добавка формата аммония, 1-2 мМ, не больше. То же самое можно сделать и на Вашей С18, большой разницы быть не должно. Закалывать 10-20 мкл, не более, в ацетонитриле либо подвижной фазе (если не микроколонка!).

Система работает. БОЛЬШОЕ СПАСИБО.

ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

Леонид
VIP Member
Ранг: 5266

24.03.2005 // 10:13:52

Puzir пишет:

Леонид пишет:
На неэндкепированной колонке этот краситель довольно прочно цепляется на немодифицированные участки силикагеля. В этом случае есть смысл взять более качественную колонку или динамическим модифицированием закрыть активные участки сорбента, добавив в элюент, например, соль цетилтриметиламмония. Причем нужно добавлять достаточно много (больше ККМ для данного состава элюента и рН), чтобы попасть в мицеллярный режим. В нем и концентрацию ацетонитрила можно снизить раза в 3-4.
Посоветовать что то более конкретное сложно, поскольку исходной информации маловато.
Что суть в остаточных силанольных групах - это 100 проц. К СОЖАЛЕНИЮ добавка 20 mM tetradecyltrimethylammonium bromide ничего неиэменила - краситель не элюируется. Колонок с endcaped C18 не имею. Но есть амино и нитрил фазы. Может у кого есть какие предложения etc.

Как я понял, задача уже решена.
Хотел только добавить, что если колонка хоть немного поработала с анионогенным ПАВ, то это уже, строго говоря, не С18. Вымыть его оттуда полностью невозможно. А добавка катионогенного ПАВ сверху только усугубит ситуацию и краситель будет удерживаться в колонке аномально сильно за счет образования сэндвичевых ассоциатов. При работе с ПАВ в качестве ДМ нужно использовать только свежие колонки.
Поддерживаю рекомендацию Islandera об использовании нитрильной фазы для подобных разделений. В обращеннофазных элюентах она ведет себя примерно как С3, а значит и удерживание будет поменьше, кроме того, на таких колонках гораздо меньше немодифицированных участков силикагеля (за счет меньших стерических затруднений), чем на обычной С18.

Islander
VIP Member
Ранг: 1065

24.03.2005 // 14:10:18

Редактировано 1 раз(а)

Леонид пишет:
Поддерживаю рекомендацию Islandera об использовании нитрильной фазы для подобных разделений. В обращеннофазных элюентах она ведет себя примерно как С3, а значит и удерживание будет поменьше, кроме того, на таких колонках гораздо меньше немодифицированных участков силикагеля (за счет меньших стерических затруднений), чем на обычной С18.

Леонид, в данном случае это вовсе не обращеннофазный вариант, а уж скорее Ваше любимое ДИРФ...

Леонид
VIP Member
Ранг: 5266

28.03.2005 // 9:19:25

Да, пожалуй что так...
85% ацетонитрила и 0,02М соли - это уж точно на грани расслоения.

Puzir
Пользователь
Ранг: 45

07.04.2005 // 15:03:29

Проблема с определением Methylene blue вроде решена с помощью ИСЛАНДЕРА. Колонка -CN, подв. фаза - 80% ACN, 0.2% TFA acid, UV 254 nm. Но это лишь начало. Моя курсовая работа -определить обе формы красителя (редох формы). К СОЖАЛЕНИЮ, когда я вкалываю kраситель после его редукции (глюкозой, сyльфитом и т. п.) - пик начального красителя меньше, но второго пика нету (редуцирую краситель частично). Где исчеэает вторая форма? Ведь редуцирована форма тоже катион, тоже поглощает при 254 nm (неизмеряли, но судя по структуре - должна). Неужели обе формы выходят вместе?

Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

Атомно-абсорбционный спектрометр Thermo Scientific (ААС) iCE 3500
Двухлучевой автоматический АА-спектрометр с пламенной и электротермической атомизацией. Оптическая схема Эшелле с полной термокомпенсацией. Три типа коррекции фона - высокоэффективная QuadLine, Зеемана (0,8 тесла, 100 Гц) и комбинированная.

[ Информация из каталога оборудования ANCHEM.RU ]

Islander
VIP Member
Ранг: 1065

07.04.2005 // 15:48:46

Puzir пишет:
Неужели обе формы выходят вместе?

В этих условиях запросто могут не поделиться.

Puzir
Пользователь
Ранг: 45

07.04.2005 // 16:22:41

Только что сделал полную редукцию красителя. Результат - пиков нет. Вывод одноэначен.
МОЖЕТ КТО поделится полезными сображениями или ссылками.

Puzir
Пользователь
Ранг: 45

27.05.2005 // 9:41:08

Возник еще один вопрос на эту тему. Колонка -CN, под. фаэа 0,2 проц. TFA acid, 80 проц. ACN, вода. С увеличением ионой силы -удерживание methylene blue уменьшается.
А что будет с его удерживанием при увеличени рН под. фазы в интервале 2-7? Сам краситель заряда не меняет.

Леонид
VIP Member
Ранг: 5266

27.05.2005 // 11:18:23

Puzir пишет:
Возник еще один вопрос на эту тему. Колонка -CN, под. фаэа 0,2 проц. TFA acid, 80 проц. ACN, вода. С увеличением ионой силы -удерживание methylene blue уменьшается.
А что будет с его удерживанием при увеличени рН под. фазы в интервале 2-7? Сам краситель заряда не меняет.

А чем Вы меняете ионную силу элюента?
Тут возможно образование более полярных, чем сам краситель ассоциатов и изменение коэффициента распределения между элюентом и НЖФ.
Краситель то хоть и ион, но достаточно липофилен.
То есть весьма похож на ПАВ.

КонстантинС
VIP Member
Ранг: 2306

27.05.2005 // 11:41:29

Редактировано 1 раз(а)

Эх, г-н Исландер, вот где пентафторфенильная-то нужна!

Она бы в таких условиях разделила б...

И с точки зрения Леонида тоже, наверное, интересно - вот где простор для модифицирования! Могу пофантазировать сходу - предварительная модификация фенантролиновыми комплексами, к примеру, кобальта, или содержащими ароматику гликозидами, к примеру, рутином... а лучше - антоцианами! Взять сок черники - и на колонку!


Ответов в этой теме: 30 Страница: 1 2 3 «« назад \|\| далее »»	Ответ на тему

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU: [ Все новости ]

Размещение рекламы / Контакты