Форумы ANCHEM.RU: Ион-парная хроматография

Российский химико-аналитический портал

химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов

карта портала ::: расширенный поиск

ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Ион-парная хроматография >>>

  Ответов в этой теме: 41
  Страница: 1 2 3 4 5
  «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]

Олег
Пользователь
Ранг: 529

23.02.2006 // 15:50:03

Редактировано 2 раз(а)

Garry пишет:
Уважаемый Serga, я привел условия для анализа дипептида, используемого в фармакологии под названием "Тимоген" (глютамил-триптофан)(сам делал ЭТО! А условия разработаны "Цитомед-Пептос г. Санкт-Петербург в ТУ). Триэтиламин добавляют для снижения "хвостатости" получаемых пиков. Обычная , кстати , практика при анализе основных соединений для улучшения асимметрии.
ТФУ в отличие от ТХУ осаждения белков не производит, погляди на белковую ВЭЖХ - практически везде используется добавка этой самой ТФУ в виде 0,1%. ТФУ зачастую можно использовать для скоростного гидролиза белков (Японская методика), правда в смеси с 6М Солянкой 1:3. Но зато гидролиз идет 1 час при 110, а не 8 часов.

Уважаемый, Игорь! Не смогли бы Вы чуть подробнее про анализ тимогена, или хотя бы ссылку, где почитать, может статью про разработку анализа.

А уважаемый Vlad Orlovsky пожалуйста, рассказжите колонки Primesep 100(200) давно начали выпускать.
Спасибо.

ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

Vlad Orlovsky
Пользователь
Ранг: 60

23.02.2006 // 16:39:47

Задавить Primesep 100 ion properties не так лекго так как кислота на колонке с рКа 1. И для нее етот слчаи не такои явний (как длиа 200 или С). Когда делаеш градиент ТФА увиличиваетсиа ионннаиа сила подбизнои фазы. рН ТФА rastvora остается почти таккая же (around 2)
Primesep 200 and Primesep C задавить легче так как рКа их 2 и 3 соответственно. Чтобы задавить 100 хадо подоити близко к рН-1 а ето тиажело сделать без угрозы гидролиза фазы, да и не надо. Можеш исползовать любои буффер и порсто увеличивать концентрацию.

www.sielc.com/compound_140.html В етом случае давич фазу и одновременно увеличиваеш ионную силу подвизнои фазы.
Например на Primesep C нелзиа effectivno аналыизировать амоно кослоти так как низе рН 3 колонка не ионизирыемая а выше рН-3 она ионизируемая но карбохил амино кислоты начинает "откриватся) и нитрализовать еффект амино группы.
Все наши колонки ведыт цебя похоже (посмотри график на картинке низе, длиа 100, 200 и А етот график сдвинут влебо близе к рКа стазионарнои фазы

www.sielc.com/pdf/SIELC_PrimesepC_Column.pdf

На маркете ми уже почти 3 года.

Serga
Пользователь
Ранг: 1806

23.02.2006 // 17:59:45

Ну, замечательно. Поизучаем.

Олег
Пользователь
Ранг: 529

23.02.2006 // 19:10:29

Редактировано 1 раз(а)

Vlad Orlovsky пишет:
Задавить Primesep 100 ion properties не так лекго так как кислота на колонке с рКа 1. И для нее етот слчаи не такои явний (как длиа 200 или С). Когда делаеш градиент ТФА увиличиваетсиа ионннаиа сила подбизнои фазы. рН ТФА rastvora остается почти таккая же (around 2)
Primesep 200 and Primesep C задавить легче так как рКа их 2 и 3 соответственно. Чтобы задавить 100 хадо подоити близко к рН-1 а ето тиажело сделать без угрозы гидролиза фазы, да и не надо. Можеш исползовать любои буффер и порсто увеличивать концентрацию.

www.sielc.com/compound_140.html В етом случае давич фазу и одновременно увеличиваеш ионную силу подвизнои фазы.
Например на Primesep C нелзиа effectivno аналыизировать амоно кослоти так как низе рН 3 колонка не ионизирыемая а выше рН-3 она ионизируемая но карбохил амино кислоты начинает "откриватся) и нитрализовать еффект амино группы.
Все наши колонки ведыт цебя похоже (посмотри график на картинке низе, длиа 100, 200 и А етот график сдвинут влебо близе к рКа стазионарнои фазы

www.sielc.com/pdf/SIELC_PrimesepC_Column.pdf

На маркете ми уже почти 3 года.

А какие цвиттер-ионы Вы применяте для модификации? Или это тоже секрет?

Vlad Orlovsky
Пользователь
Ранг: 60

23.02.2006 // 20:58:28

Конечно секрет, мы знаем что наши конкуренты работаиют в этом направлении и не хотим облегчать им жизнь.
Но мы готовы помочь с разработкои метода.

Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

	ИК-Фурье спектрометр Thermo Scientific Nicolet iS10 ИК-Фурье спектрометр Nicolet iS10 разработан для лабораторий контроля качества, аналитических инспекций и криминалистических лабораторий.
	[ Информация из каталога оборудования ANCHEM.RU ]

Garry
VIP Member
Ранг: 1076

24.02.2006 // 10:04:44

Олег пишет:
Уважаемый, Игорь! Не смогли бы Вы чуть подробнее про анализ тимогена, или хотя бы ссылку, где почитать, может статью про разработку анализа.

Я полагаю, что ссылочку на анализ тимогена дать проблематично, поскольку этот препарат выпускается лишь в Белоруссии в виде назальных капель и у нас в Днепропетровске на ОАО "Днепрофарм", на котором я имел честь проработать 11 лет, в виде инъекционной формы.
Если интересно, то могу рассказать что и как.
Тимоген - (глютамил-триптофан) дипептид обладающий мощным иммуностимулирующим действием. При синтезе возможно возникновение двух рацемических форм, обладающих прямопротивоположным действием. Т.е L-форма - стимулятор имунной системы, а вот D-форма - наоборот, подавитель имунной системы. В принципе при соблюдении условий синтеза и использовании веществ, предотвращающих рацемизацию приводит к желаемому результату. Но все равно, активность готового тимогена проверяют биологическими тестами. ВЭЖХ контролируют только наличие примесей, которые проистекают из синтеза и продукты деградации в готовой форме. За мою практику в качестве примесей определяется триптофан и его окисленные формы(при очень дерьмовом сырье) но примеси нормируются 3 %,а в качестве продуктов деградации - индол и глютаминка. А если асептически его разлить не получилось(ну прокол какой-нибудь на производстве), то в ампулах тимоген обнаружить невозможно - микробы сжирают его вмиг.
По ТУ ВЭЖХ проводился в двух вариантах , поскольку ТУ было тоже два:
1. 0,1 % ТХУ 35 % ацетонитрила (изократика).
2. 0,05 М триэтиламина фосфат рН=3,5, линейный градиент ацетонитрила от 10% до 60%.
Я же при разработке собственного АНД остановился на изократике (поскольку градиента приборно создать не мог), правда, в раствор добавил 0,005 М гептилсульфоната натрия и увеличил долю ацетонитрила до 40 %.

Олег
Пользователь
Ранг: 529

24.02.2006 // 15:45:37

Редактировано 1 раз(а)

[По ТУ ВЭЖХ проводился в двух вариантах , поскольку ТУ было тоже два:
1. 0,1 % ТХУ 35 % ацетонитрила (изократика).
2. 0,05 М триэтиламина фосфат рН=3,5, линейный градиент ацетонитрила от 10% до 60%.
Я же при разработке собственного АНД остановился на изократике (поскольку градиента приборно создать не мог), правда, в раствор добавил 0,005 М гептилсульфоната натрия и увеличил долю ацетонитрила до 40 %.

Игорь, спасибо! А применяют ТХУ или ТФУ? Какую колонку рекомендуют и на какой длине волны?

Олег
Пользователь
Ранг: 529

26.02.2006 // 20:13:19

Игорь! Посылал Ва письмо на igor

dpharm.dp.ua не принимается почта может дадите новый адрес? oleg

techline.ru

Кирилл
Пользователь
Ранг: 40

02.03.2006 // 14:15:46

Спасибо всем огромное за обсуждение.
Статью Леонида прочитал дважды, очень содержательно, сейчас осмысливаю.
После праздников устраиваю семинар для коллег, так что очень вовремя.

))

Garry
VIP Member
Ранг: 1076

03.03.2006 // 13:53:21

Олег пишет:
Игорь! Посылал Ва письмо на igordpharm.dp.ua не принимается почта может дадите новый адрес? olegtechline.ru

Извините, думал об одном, написал иное. Конечно же не ТХУ (трихлоруксусная кислота) а ТФУ (трифторуксусная кислота). Очень извиняюсь. И как это меня угораздило


Ответов в этой теме: 41 Страница: 1 2 3 4 5 «« назад \|\| далее »»	Ответ на тему

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU: [ Все новости ]

Размещение рекламы / Контакты