| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Низкий процент извлечения ТФЭ метанефринов на слабых катионитах - пути повышения процента экстракции >>>
|
 |
| Автор | Тема: Низкий процент извлечения ТФЭ метанефринов на слабых катионитах - пути повышения процента экстракции | |||||
|
Dionisii Пользователь Ранг: 377 |
 23.10.2017 // 12:26:38
Глубокоуважаемые коллеги! Мне очень нужен совет знающего человека, поскольку я столкнулся со сложностями в разработке метода твердофазной экстракции метанефринов из мочи. В мировой научной литературе рекомендуют извлекать их с помощью слабых катионообменнитков. Мы закупили картриджи Strata X-CW, 30 mg/3 mL (полимерный карбоксикатионит). Пробовали извлекать метанефрины из воды - экстракция была 100%, аналогично из плазмы крови. Попробовали извлекать из мочи - получили 50%. Дальше играли с pH, составом буферных растворов, но не смогли поднять коэффициент извлечения больше чем 65%. В связи с этим хотел бы задать вам вопрос - какие существуют способы увеличения процента экстракции на слабых катионитах? Может ли тут помочь изменение ионной силы растворов, концентрации буферных солей, варьирование pH. Или же в случае с данной матрицей мы "уперлись в потолок", слабые катиониты на большее не способны и нам нужно просто принять это как данность? |
|||||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
||||||
|
SergeyK Пользователь Ранг: 2168 |
 23.10.2017 // 12:57:43
Что с pH делали и чем, что наблюдали? |
|||||
|
Dionisii Пользователь Ранг: 377 |
23.10.2017 // 15:08:43
Редактировано 3 раз(а) В публикациях на картриджи сажают метанефрины из мочи, которая разбавляется ацетатным буфером с pH 6,5 -7. Первоначально мы использовали pH 6,5, затем стали спользовать рН 7,0 (доводили гидроксидом аммония), кроме того стали подщелачивать мочу до рН 7,0 (доводили гидроксидом аммония). В результате незначительно повысили процент извлечения(не более чем на 10-15%). |
|||||
|
SergeyK Пользователь Ранг: 2168 |
23.10.2017 // 15:22:14
Так работаете? Попробуйте без промывок протокол повторить, чтобы понять, аналит не садится или смывается. https:// Картриджей с Плексой нет под рукой? |
|||||
|
Dionisii Пользователь Ранг: 377 |
23.10.2017 // 15:40:21
Проверяли на предмет "не садится / не смывается", измеряли содержание в жидкости после посадки, а также после промывки. Обнаружили, что именно плохо садится. Часть пролетает при первом прохождении, часть смывается при отмывке. |
|||||
|
Dionisii Пользователь Ранг: 377 |
23.10.2017 // 15:43:26
Плекса есть. И презентация эта есть. Непонятно, чем там они клинап мочи делали. Там стадия предочистки присутствует. |
|||||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|||||
|
SergeyK Пользователь Ранг: 2168 |
23.10.2017 // 16:01:28
Редактировано 2 раз(а) Похоже, так: For total measurements, samples (500 µL) were hydrolyzed with 25 µL of 6N HCl, mixed, incubated at 90 °C for 15 minutes, then cooled at room temperature. For free measurements, samples were used as is. The SPE procedure was as follows: 1. Pretreat sample: To 0.5 mL urine, add 40 µL internal standards mix and 0.8 mL diphenyl-boronate complexing agent; adjust to pH 7.5 to 9.5 with NH4OH. 2. Condition the SPE cartridge (Agilent Bond Elut Plexa, 30 mg, 3 mL, p/n 12109303) with 1 mL methanol and 1 mL aqueous wash buffer (0.2 M NH4Cl/NH4OH). 3. Add pretreated samples. 4. Wash with 1 mL of 5 % methanol wash buffer, and then dry at full vacuum for 5 minutes. 5. Elute with 1 mL of 5 % formic acid in water, then apply a 5 inch Hg vacuum for 30 seconds. 6. Transfer to an autosampler vial, and inject into the LC/MS/MS system. |
|||||
|
SergeyK Пользователь Ранг: 2168 |
23.10.2017 // 17:12:53
Редактировано 1 раз(а) 60% садится, по 20% смывается и не садится? Что лечить-то будем, что выгоднее? |
|||||
|
Dionisii Пользователь Ранг: 377 |
23.10.2017 // 17:31:49
Хочется, чтобы садилось всё. Или почти всё. |
|||||
|
SergeyK Пользователь Ранг: 2168 |
23.10.2017 // 20:52:59
Редактировано 1 раз(а) Ну мне тоже много чего хочется, где больше потерь, спрашиваю, на проскок или на промывку? Или везде по 20% точно, как в аптеке? Сольватируете сорбент и уравновешиваете как и чем? |
|||||
|
SergeyK Пользователь Ранг: 2168 |
23.10.2017 // 21:25:31
Редактировано 11 раз(а) Ну и это не натрий-ацетатный буфер, а 50 мМ ацетат аммония, правда? Потому как, что ацетат натрия, что ацетат аммония не могут буферить при таком pH. https:// Суньте свежекалиброванный pH-метр в мочу с "буфером", как хотите, но установите там pH=6,70 +/- 0,02 на фоне того же 50 мМ ацетата аммония. При этом как карбоксилы, так и ваши амины будут ионизованы, свяжутся и позволят помыть себя 100% органикой. Сорбент должен быть предварительно подготовлен: сольватирован органикой и уравновешен "буфером". Если не поможет, перенабейте сорбент из двух-трех патронов в один и повторите с тем же объемом пробы. Сорбенту можно давать просыхать между стадиями, но недолго, по 5-15 секунд, что бы там ни говорили производители. |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 34
|
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
