Форумы ANCHEM.RU: Низкий процент извлечения ТФЭ метанефринов на слабых катионитах

Российский химико-аналитический портал

химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов

карта портала ::: расширенный поиск

ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Низкий процент извлечения ТФЭ метанефринов на слабых катионитах - пути повышения процента экстракции >>>

  Ответов в этой теме: 34
  Страница: 1 2 3 4
  «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]

Dionisii
Пользователь
Ранг: 377

24.10.2017 // 10:59:41

SergeyK пишет:

Dionisii пишет:
Хочется, чтобы садилось всё. Или почти всё.
Ну мне тоже много чего хочется, где больше потерь, спрашиваю, на проскок или на промывку? Или везде по 20% точно, как в аптеке?
Сольватируете сорбент и уравновешиваете как и чем?

Действительно теряем на обеих стадиях примерно поровну. Причём не 20% /20%, а скорее 13% проскок, 13% при промывке дистиллировкой, 13% при промывке органикой (AcN/MeOH 50/50). Сольватируем также смесью AcN/MeOH (50%/50%).

ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

Dionisii
Пользователь
Ранг: 377

24.10.2017 // 11:06:47

SergeyK пишет:

Dionisii пишет:
ацетатным буфером с pH 6,5 -7.
Ну и это не натрий-ацетатный буфер, а 50 мМ ацетат аммония, правда? Потому как, что ацетат натрия, что ацетат аммония не могут буферить при таком pH.
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/28710594
Суньте свежекалиброванный pH-метр в мочу с "буфером", как хотите, но установите там pH=6,70 +/- 0,02 на фоне того же 50 мМ ацетата аммония. При этом как карбоксилы, так и ваши амины будут ионизованы, свяжутся и позволят помыть себя 100% органикой. Сорбент должен быть предварительно подготовлен: сольватирован органикой и уравновешен "буфером". Если не поможет, перенабейте сорбент из двух-трех патронов в один и повторите с тем же объемом пробы. Сорбенту можно давать просыхать между стадиями, но недолго, по 5-15 секунд, что бы там ни говорили производители.

Маленький вопросик - если ацетат аммония не буферит вовсе, то может быть использовать другие буферы? Не порекоммендуете альтернативу? E.g. цитратный, боратный, фосфатный, трис-HCl, трис-глицин, HEPES? Что здесь оптимально?

SergeyK
Пользователь
Ранг: 2168

24.10.2017 // 11:15:27

А детектор какой?

Dionisii
Пользователь
Ранг: 377

24.10.2017 // 11:32:10

SergeyK пишет:
А детектор какой?

Пока работаем с масс-детектором, но планируем адаптировать метод для ион-парной ВЭЖХ с амперметричесим детектированием.

SergeyK
Пользователь
Ранг: 2168

24.10.2017 // 11:41:42

Так выбор-то небольшой, бикарбонат аммония (лучше фосфатного, конечно, но тоже не сахар) на МС, на амперометрическом и фосфатный сойдет.

Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

Эконова, ЗАО Институт хроматографии
Новосибирское ЗАО Институт хроматографии «ЭкоНова» производит микроколоночные жидкостные хроматограф «Милихром® А-02» и «Альфахром»— уникальные приборы экспертного класса для проведения химического анализа.

Dionisii
Пользователь
Ранг: 377

24.10.2017 // 17:05:03

SergeyK пишет:
Так выбор-то небольшой, бикарбонат аммония (лучше фосфатного, конечно, но тоже не сахар) на МС, на амперометрическом и фосфатный сойдет.

Спасибо, будем пробовать.

Shoker
Пользователь
Ранг: 38

25.10.2017 // 11:32:11

Во-первых, коллеги SergeyK и Dionisii дело говорят про pH. Тут как ни крути, а нужно 6.5-7.0, иначе либо аналиты будут основной форме, либо среда образца нейтрализует активные центры сорбента. Во-вторых, насчёт картриджа могу поделиться необычным собственным опытом: для предварительной промывки картриджа мы использовали не буфер, а 1% гидроксид натрия в водно-метанольном растворе (50:50). После этого промывали трёхкратным объёмом воды для удаления остатков щёлочи и далее загружали образец в буфере. Картриджи использовали Copure WCX SPE (производство чайна, 60 мг/3 мл), поэтому было не жалко так экспериментировать. При этом добивались более 90% извлечения MN, NMN и 3-MT.

virtu
VIP Member
Ранг: 2135

26.10.2017 // 2:14:18

Dionisii пишет:
Или же в случае с данной матрицей мы "уперлись в потолок", слабые катиониты на большее не способны и нам нужно просто принять это как данность?

Боюсь, что в конкретной ситуации, рекавери 60-70% это уже хорошо. В целом, нужно больше работать над качеством очистки. Гоняться за рекавери нужно, когда в этом есть реальная необходимость. Если работаете только со свежей мочой, то можете попробовать такой трюк - замораживаете мочу, размораживаете, перемешиваете, центрифугируете (> 10000 RCF), отбираете супер для последующей очистки методом ТФЭ.

KSS17
Пользователь
Ранг: 199

26.10.2017 // 19:12:49

Редактировано 1 раз(а)

Здравствуйте!
Начну с характеристики аналита. Соединение гидрофильное и рКа=6,75.
Чтоб его засадить на сорбент с катионитом оптимальная рН=4,75.
Попробуйте фосфатные буферы не более 0,1М и рН 4,8 - 5,0.
Можно дополнительно после промывки буфером, применить промывку 0,1М уксусной кислотой, это должно снизить потери при дальнейшей промывке.

SergeyK
Пользователь
Ранг: 2168

26.10.2017 // 21:31:26

Редактировано 1 раз(а)

KSS17 пишет:
Здравствуйте!
Начну с характеристики аналита. Соединение гидрофильное и рКа=6,75.
Чтоб его засадить на сорбент с катионитом оптимальная рН=4,75.
Попробуйте фосфатные буферы не более 0,1М и рН 4,8 - 5,0.
Можно дополнительно после промывки буфером, применить промывку 0,1М уксусной кислотой, это должно снизить потери при дальнейшей промывке.

У какого аналита pKa=6,75?
У карбоксилов в патроне pKa=4,5.


Ответов в этой теме: 34 Страница: 1 2 3 4 «« назад \|\| далее »»	Ответ на тему

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU: [ Все новости ]

Размещение рекламы / Контакты