| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
ВЭЖХ: количественное определение фамотидина: колонка для НФ, ПФ для ОФ >>>
|
 |
|
SergeyK Пользователь Ранг: 2168 |
 12.09.2018 // 9:25:47
Редактировано 1 раз(а) Помимо силанолов, которых там ничтожное в космических масштабах количество, там ещё очешуительно толстая пленка воды на силикагеле, такая, что ваших силанолов не видно ни в микроскоп, ни в телескоп, ни в театральный бинокль. Вот в этой-то воде часть фосфорной и приютится. Просто статистически она там будет, вам вся фосфорная мира и не нужна. А смоете вы свой амин, повышая pH, это ведь градиентный метод? |
||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|||
|
Avet Пользователь Ранг: 1086 |
12.09.2018 // 9:31:47
Спасибо за ответ. Но механизм представить не могу: как фосфат-ион будет удерживаться силанольной группой. Ионизированный силанол заряжен отрицательно, и фосфат отрицательно. Неионизированный силанол не заряжен, тоже фосфат взаимодействовать вроде как не может. Аминогруппа аналита может взаимодействовать с фосфатом, если она будет в форме катиона. Мне тоже неясно, за счет чего амногруппа может ионизироваться. рН пф 5,0. Если это не затруднит, не могли бы Вы детализировать идею? |
||
|
Avet Пользователь Ранг: 1086 |
12.09.2018 // 9:34:00
Да в том-то же и еще одна загадка - это изократика. |
||
|
Avet Пользователь Ранг: 1086 |
12.09.2018 // 12:57:03
Уважаемый г-н Волгин, спасибо за информацию, почитаю. Но в данной методике метанол в концентрации 15% |
||
|
vmu Пользователь Ранг: 1330 |
12.09.2018 // 22:11:47
Какие признаки HILIC вы искали? Полярный сорбент тут имеется. Водно-органическая ПФ имеется. Метанол для HILIC использовать в принципе никто не запрещает. Просто у него гораздо большая элюирующая сила, чем у ацетонитрила + некоторые другие недостатки. Вещество ваше достаточно полярно для HILIC. У фамотидина полярных групп вагон и маленькая тележка. Многоие вещества можно делить и в HILIC, и в ОФ ВЭЖХ. Порядок элюирования только поменяется примерно на противоположный. Далее, для HILIC характерно снижение времен удерживания при росте доли воды в ПФ (потому воды в HILIC-элюентах обычно меньше половины). В PALC зависимость времен удерживания от доли воды в ПФ обратная (как и в ОФ ВЭЖХ). Тут с вашей методикой ясности нет. При желании можете сами поиграть с составом ПФ. В любом случае, как ни назови, в обсуждаемой методике возможны те же механизмы удерживания, что и в разделениях, именуемых как HILIC. Во-первых, адсорбция за счет взаимодействий (диполь-дипольных, водородных связей и т.п.) вещества непосредственно с поверхностью сорбента. Во-вторых, распределение вещества из основной части ПФ в приповерхностный слой ПФ, существенно обогащенный водой (адсорбированный слой воды). В-третьих, здесь как небольшое дополнение - ионный обмен за счет диссоциированных силанолов. |
||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
||
|
vmu Пользователь Ранг: 1330 |
12.09.2018 // 22:30:06
Силанолов там предостаточно. Уж если на ОДС в ОФ ВЭЖХ диссоциированные остаточные силанолы влияют на удерживание и форму пиков аминов, то тут и подавно. Конечно, ионный обмен на диссоциированных силанолах не являеся основным механизмом удерживания в обсуждаемой методике, но свой вклад он вносит. Какая связь между распределением в адсорбированный водный слой и ионообменной хроматографией? Где вы увидели ионный обмен? Любой катион, в т.ч. протонированный фамотидин, в ПФ не сам по себе плавает, а с противоионами (с фосфат-анионами). Точно так же он с этими фосфат-анионами в качестве противоионов будет распределяться в приповерхностный водный слой. Никакого ионного обмена в этом нет. С вашей интерпретаций ионообменной хроматографией можно было бы называть любой вариант хроматографии, где есть любой полярный сорбент, раствор любой соли в ПФ и ионогенные аналиты. |
||
|
vmu Пользователь Ранг: 1330 |
12.09.2018 // 22:34:07
В чем загадка-то? Изократика как изократика. Как в любом варианте ВЭЖХ. Если удерживается и делится все, что нужно, за приемлемое время, то градиент не нужен. |
||
|
vmu Пользователь Ранг: 1330 |
12.09.2018 // 22:37:29
Амин - основание. Была нейтральная молекула, присоединила ион водорода - стала катионом. |
||
|
OldBrave VIP Member Ранг: 1330 |
13.09.2018 // 0:30:30
Редактировано 6 раз(а) Не случалось делить амины на ТСХ на силикагеле? Амины на силикагель, особенно на активированный, садятся намертво. На дезактивированный, - их еще вода может двигать, но о разделении можно забыть. Добавление спирта (метанола, этанола) приводит возникновению больших хвостов. По этой теме, если не обращать внимания на особенности ТСХ, о механизмах и влиянии рН можно почитать (там-же есть информация и о растворимости силикагеля): В данном случае реализуется ион-парная хроматография на нормальной фазе. При этом буферный раствор будет составной частью неподвижной фазы, на которой при некотором рН будут делиться амины. При рН 5 ионизацией силанольных групп можно пренебречь. Фосфаты в Вашем случае являются анионоактивными ПАВ. |
||
|
Avet Пользователь Ранг: 1086 |
13.09.2018 // 10:50:10
Спасибо за разъяснение. Это, конечно, очень необычный механизм. Я, например, впервые встречаюсь с подобным механизмом удерживания. НФ - это НФ, ОФ - это ОФ. А тут смешалось все вместе. Причем, что интересно, для данного лек. препарата я не встретил других методик ВЭЖХ анализа. |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 33
|
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
) с докладом о "зеленой хроматографии". Так вот, при концентрациях спирта существенно меньше 1% в водно-этонольных смесях силикагель -у него - вел себя как обратная фаза. По вышеупомянутой причине не помню ни конкретных условий ни аналитов...