| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
ВЭЖХ полиаминов в биоматериале. >>>
|
 |
| Автор | Тема: ВЭЖХ полиаминов в биоматериале. | |||||
|
XG Пользователь Ранг: 10 |
 23.03.2005 // 14:48:13
Задача: провести определение количества полиаминов в биоматериале м-дом ВЭЖХ:прибор-Миллихром 5-3,градиентное элюирование, система метанол-вода, колонка С-18. Вопрос: возможно ли проведение анализа с использованием системы с ацетонитрилом? Если кто-либо может дать совет, знает методики или может подсказать где их можно поискать, то буду весьма признательна. |
|||||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
||||||
|
Garry VIP Member Ранг: 1076 |
23.03.2005 // 15:58:43
Вполне подойдет для анализа и ацетонтрил, но в меньшем количестве. Это раз, во-вторых, для успешного анализа полиаминов (кадаверин, путресцин и т.д.) на с18,рН раствора должно быть выше 8,0, а это для обычных С18 чревато разрушением сорбента, поэтому нужны колонки так называемые polimer coated или с полимерным сорбентом. Если такового не имеется, то используют обычно ион-парные механизмы. Разделение при этом проходит в более мягких условиях - рн=3-5, но для этого нужны ион-парные реагенты (для полиаминов - гексилсульфонат или гептилсульфонат натрия). Градиент для Милихромов (за исключением А-02)- с моей точки зрения неоправданное извращение - Вы измучитесь получать воспроизводимые результаты. |
|||||
|
Islander VIP Member Ранг: 1065 |
23.03.2005 // 16:53:00
А каким детектором Вы намерены пользоваться и какие концентрации определять? |
|||||
|
XG Пользователь Ранг: 10 |
23.03.2005 // 18:12:34
Уважаемый Islander, детектор УФ при 254 нм, предел определяемых концентраций - 300-1000 нмоль/мл. Спасибо. |
|||||
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
23.03.2005 // 18:46:02
Кадаверин-путресцин? В смысле? Я как-то себе полиамины не так представлял... Примерно как полиэтилендиамин или что-то в этом духе. И проблемы с детекцией тогда точно есть, т.к. у Милихрома стандартный детектор только УФ. И "биообъект" как-то очень странно выглядит... вряд ли эти пробы очень уж "чистые"... |
|||||
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
23.03.2005 // 18:47:44
Ксати, у 5-3 градиент ступенчатый, там нет смесителя. Я, правда, просто это отмечаю - ступеньки иногда лучше линии. |
|||||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|||||
|
Islander VIP Member Ранг: 1065 |
23.03.2005 // 20:51:35
Редактировано 1 раз(а) Без дериватизации не получится, да и о пробоподготовке надо подумать. Хроматография -вопрос важный, но без детектирования и пробоподготовки совершенно бесполезный. |
|||||
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
24.03.2005 // 10:10:36
(извиняюсь что вклиниваюсь) Евгений, а как там со статейкой? а то я помаленьку в следующую неделю хочу начать собирать материал, да и верстать помаленьку... |
|||||
|
Леонид VIP Member Ранг: 5266 |
24.03.2005 // 10:34:16
Полиамины, действительно, и разделить то в ОФ-режиме непросто, тем более на неэндкепированной колонке, а задетектировать - так вообще проблема. В свое время пробовал определять кадаверин и путресцин на С18 с добавкой в элюент 0,001 М сульфаниловой кислоты, которая играла роль и ион-парного реагента, и поглощающего фона для инверсного детектирования аминов. Кое что получилось, но только для относительно больших концентраций, да и системка оказалась достаточно капризной по отношению к чистоте пробы и в плане воспроизводимости. Так что в данном случае однозначно - предварительная деривация, например, с образованием поглощающих в УФ оснований Шиффа. Их и детектировать просто и хроматографическое поведение куда лучше, чем у свободных полиаминов. |
|||||
|
Islander VIP Member Ранг: 1065 |
24.03.2005 // 14:19:08
Прошу прощения, работа и грипп доконали, попробую в выходные... А для дериватизации я бы лично взял динитробензоилхлорид (одна из ссылок тоже про это), хотя выбор огромен. Есть, конечно, варианты и с послеколоночной дериватизацией, но лучше сразу облегчить решение обеих проблем - и детектирования, и разделения. Малополярные производные делить гораздо приятнее. |
|||||
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
25.03.2005 // 10:47:19
Со мной тоже что-то болезненное творится, вот кадаверин-путресцин перепутал с гистамином, а недавно цистин перепутал с цистеином.  По полиаминам есть отличная аппликашка на сате Дайонекса там все от лития до кадаверина за 30 минут на ионообменной колонке делится на градиенте метансульфоновой к-ты, детекция с супрессией. Эффективность и селективность очень высокие. Но к Милихрому, крнечно, никакого отношения этот метод не имеет. Кстати, одного из разработчика фазы, Криса Пола, я-таки уговорил написать статью по новым полимерным материалам для ВЭЖХ. Евгений, а Вы выздоравливайте поскорее! |
| |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
