Российский химико-аналитический портал  химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов  
карта портала ::: расширенный поиск              
 



ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...
  1. Аналитический форум | Список форумов | Войти в систему | Регистрация | Помощь | Последние темы | Поиск

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Гель проникающая хроматография >>>

  Ответов в этой теме: 40
  Страница: 1 2 3 4
  «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]


Автор Тема: Гель проникающая хроматография
olyamalblwka
Пользователь
Ранг: 30

28.03.2017 // 16:19:47     
Подскажите, знатоки гель -проникающей хроматографии, кто сталкивался с проблемой смещения времен удерживания? Есть ли какие-то особенности ухода за гель-колонкой? В паспорте на колонку только указаны максимально-допустимый расход , pH, возможные элюенты .
Реклама на ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
Размещение рекламы
SergeyK
Пользователь
Ранг: 193


28.03.2017 // 18:39:52     

olyamalblwka пишет:
Есть ли какие-то особенности ухода за гель-колонкой?
Какие-то есть.
Каталожный номер колонки может быть назовете?
olyamalblwka
Пользователь
Ранг: 30


28.03.2017 // 20:29:39     
Колонка Ultrahydrogel 250, фирмы Waters
SergeyK
Пользователь
Ранг: 193


28.03.2017 // 21:32:22     

olyamalblwka пишет:
Колонка Ultrahydrogel 250, фирмы Waters
Тут нет того, что нужно?
https://www.waters.com/webassets/cms/support/docs/wat011556.pdf
olyamalblwka
Пользователь
Ранг: 30


29.03.2017 // 6:20:27     
Такое руководство есть, соблюдаем условия , которые там указаны. Однако про смещение времен удерживания там нет информации (((
SergeyK
Пользователь
Ранг: 193


29.03.2017 // 8:05:40     
Редактировано 2 раз(а)


olyamalblwka пишет:
Такое руководство есть, соблюдаем условия , которые там указаны. Однако про смещение времен удерживания там нет информации (((
Тогда вам придется подробнее рассказать о своей проблеме, с хроматограммами. Лучше так: https://www.opennet.ru/docs/RUS/smart_question/
Реклама на ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
Размещение рекламы
Лаборатория стереохимии сорбционных процессов (ЛССП) ИНЭОС РАН Лаборатория стереохимии сорбционных процессов (ЛССП) ИНЭОС РАН
Анализы различных классов соединений (органический синтез, биотехнология, загрязнения почвы, воды, анализ энантиомерного состава) методами ВЭЖХ и ГХ.
Garry
VIP Member
Ранг: 1048


29.03.2017 // 8:53:17     

olyamalblwka пишет:
Подскажите, знатоки гель -проникающей хроматографии, кто сталкивался с проблемой смещения времен удерживания? Есть ли какие-то особенности ухода за гель-колонкой? В паспорте на колонку только указаны максимально-допустимый расход , pH, возможные элюенты .
Оля, если Вы хорошо представляете, какой принцип заложен в основу ГПХ, то должны искать причины, которые приводят к нарушению механизма ГПХ. Во-первых, в состав водных элюентов для ГПХ, если они к тому же не содержат ацетонитрила и метанола обычно добавляют в обязательном порядке консерванты типа азида натрия (0,01 %) или хлорэтанола во избежание контаминации колонок всевозможными микроорганизмами, особенно при использовании фосфатных буферов. Во-вторых, на процесс постоянства времен удерживания влияет термостатирование колонок и нормальная стабильная работа насосных систем. Так что проверьте постоянство поддержания температуры в термостате колонок и, соответственно постоянство заданного расхода элюента.
В-третьих, если есть проблемы с точностью определения молекулярных масс, то обычно используют в качестве параметров калибровки так называемые относительные времена удерживания. Для этого в анализируемые растворы добавляют потоковые маркеры. Что это значит ? Например, Вы определяете молекулярную массу декстранов или ГЭКов. Для повышения точности к раствору образца и стандартных растворов, предназначенных для калибровки системы добавляют раствор глюкозы или этиленгликоля. В результате хроматографирования, Вы получите пик стандарта или пик анализируемого полимера и дополнительно пик потокового маркера. При построении калибровки заносят не времена удерживания в максимуме пика, а величину соотношения Tmax/Tpm (время удерживания в максимуме пика/времени удерживания потокового маркера). Соответственно для расчета молекулярных масс исследуемых образцов оперируют такими же отношениями времен удерживания фракций (секций) пика полимера к времени удерживания потокового маркера. Использование потокового маркера полностью компенсирует все проблемы со стабильностью потоков и температур в хроматографической системе.
В-четвертых, в системах для ГПХ никогда не применяйте расходы элюента более 1 мл/мин! Большие расходы приведут к проседанию геля в колонках, увеличению мертвого объема, размыванию пиков (потеря эффективности), могут привести к образованию так называемых войдов (трещин и пустот), что непременно скажется на процессе ГПХ.
В-пятых, к смещению времен удерживания может приводить процесс нарушения механизма ГПХ за счет появления адсорбционных проявлений, которые могут быть генерированы накопившимися примесями из образцов, особенно, полный состав которых Вам не ведом. В этом случае необходимо применять защитную предколонку в обязательном порядке.... Ну и периодически подвергать колонку специальной промывке например, растворами ДМСО (зависит от типа предполагаемых загрязнителей)
SergeyK
Пользователь
Ранг: 193


29.03.2017 // 9:41:27     
В-шестых, всегда меняйте колонку на малом потоке насоса, и так, чтобы воздух не попадал в колонку.
olyamalblwka
Пользователь
Ранг: 30


29.03.2017 // 10:38:17     
Спасибо, Garry,за ваш очень информативный комментарий 😊 давайте по Вашим пунктам: мы используем раствор 0,1 М NaNO3. По поводу консервантов не слышала раньше. И в инструкции на колонку этого нет((( обязательно попробуем
2) расход проверяли,. Термостат также работает в норме. 3) по поводу маркеров - попробуем подобрать.4) расход 0.8 используем, 5) предколонка имеется, промывку водой делаем, т.К анализируем водные растворы, 6) не совсем понятна процедура замены колонки при расходе. Поясните, пожалуйста
SergeyK
Пользователь
Ранг: 193


29.03.2017 // 11:11:35     

SergeyK пишет:
В-шестых, всегда меняйте колонку на малом потоке насоса, и так, чтобы воздух не попадал в колонку.
Примерно вот так: www.pss-polymer.com/fileadmin/custom_documents/TT_HowtoInstallGPCcolumns_022014.pdf
olyamalblwka
Пользователь
Ранг: 30


29.03.2017 // 12:22:12     
SergeyK, спасибо. Правильно ли я поняла из данного документа, что если воздух в колонке, то надо обратным ходом промывать при маленьком расходе?

  Ответов в этой теме: 40
  Страница: 1 2 3 4
  «« назад || далее »»

Ответ на тему



ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU:      [ Все новости ]

ЖУРНАЛ ЛАБОРАТОРИИ ЛИТЕРАТУРА ОБОРУДОВАНИЕ РАБОТА КАЛЕНДАРЬ ФОРУМ

Copyright © 2002-2009
«Аналитика-Мир профессионалов»

Размещение рекламы / Контакты