Российский химико-аналитический портал  химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов  
карта портала ::: расширенный поиск              
 



ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...
  1. Аналитический форум | Список форумов | Войти в систему | Регистрация | Помощь | Последние темы | Поиск

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

ВЭЖХ примесей полипептида. На каком приборе? >>>

  Ответов в этой теме: 26
  Страница: 1 2 3
  «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]


ATem
Пользователь
Ранг: 624


30.11.2019 // 10:41:28     
Честно говоря - не знаю... Вопрос в том, какой у него рабочий диапазон масс. Не хочу обманывать... Тут лучше спросить Игоря Александровича, все же у него этот прибор в работе
А вопрос о каких концентрациях идет, к слову?) Может и не нужен будет СИМ)
Реклама на ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
Размещение рекламы
Andrew
VIP Member
Ранг: 1291


02.12.2019 // 8:38:39     
Редактировано 1 раз(а)


ATem пишет:

А вопрос о каких концентрациях идет, к слову?) Может и не нужен будет СИМ)

Концентрации основного вещества большие. Растворимо хорошо. Содержание примесей в в нем интересует от 0,2 до нескольких процентов. Самая интересная примесь в разных образцах - 0,2 - 2 %. Больше по молекулярной массе чем основное вещество на 111.
Кстати, в старттопике ошибка. ММ основного вещества не 9500, а 6500 Да. И стоИт задача препаративно выделить из него несколько десятков мг примеси, которая на 111 Да тяжелее, чтобы использовать ее как стандартный образец.
Для начала. естественно требуется отработать разделение в аналитическом масштабе, оглядываясь (на всякий случай) на имеющуюся препаративную колонку с С18. Единственная известная методика определения этой примеси делается на катионообменнике с рассолом (7%) в качестве подвижной фазы. что никак не вяжется с МС и плохо вяжется с будущим препаративным разделением. Причем разрешение с основным пиком всего лишь около 1,5 и методика очень не робастная.
voodensky
Пользователь
Ранг: 39


02.12.2019 // 8:45:06     
Редактировано 1 раз(а)


Andrew пишет:
Плохо представляю, как уложиться в 1500. Или даже в 2000. Хотя....

Вот первая статья в поиске
https://pubs.acs.org/doi/abs/10.1021/bc990181y
Определяют антитела на электроспрее с квадруполем.
Максимальный пик с зарядом +28 (картинка 4). m/z примерно 1750.
Примесь в одну аминокислоту им поймать вряд ли удастся, но у Вас и масса гораздо меньше.
Andrew
VIP Member
Ранг: 1291


02.12.2019 // 8:53:19     

voodensky пишет:

Andrew пишет:
Плохо представляю, как уложиться в 1500. Или даже в 2000. Хотя....

Вот первая статья в поиске
https://pubs.acs.org/doi/abs/10.1021/bc990181y
Определяют антитела на электроспрее с квадруполем.
Максимальный пик с зарядом +28 (картинка 4). m/z примерно 1750.
Примесь в одну аминокислоту им поймать вряд ли удастся, но у Вас и масса гораздо меньше.
К сожалению, у меня нет доступа к Full Text, но то что Вы написали обнадеживает. Надо пробовать. Если будут хорошие 4-8 зарядные ионы, то шансы немаленькие. На 800 - 1600 Da поймать разницу в 13 - 28 Da, думаю получится.
virtu
VIP Member
Ранг: 2115


03.12.2019 // 18:20:53     

Andrew пишет:
Вопрос: какой MS-детектор нужен, чтобы сделать методику для аналитического, а затем - для препаративного выделения этой примеси?.
Любой масс-анализатор до 1500-2000 m/z, разрешением > 1000 FWHM и ESI (при наличии выбора лучше выбирать импульсное железо - IT, TOF). Тут больше проблем будет с хроматографией.
Реклама на ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
Размещение рекламы
Аккредитованный Аналитический Центр ООО «НТО «Оргсинтез» Аккредитованный Аналитический Центр ООО «НТО «Оргсинтез»
В области аккредитации Аналитического центра – вода питьевая, метионин кормовой, сульфат натрия, ксантогенаты, монометиланилин и добавки к автомобильным бензинам на его основе, сероуглерод, анилин, нитробензол и другие продукты химической промышленности. Применяемые методы анализа: титриметрия, фотометрия, хроматография, атомноабсорбционная спектроскопия
vmu
Пользователь
Ранг: 399


04.12.2019 // 7:01:27     
Редактировано 1 раз(а)


Andrew пишет:
Кстати, в старттопике ошибка. ММ основного вещества не 9500, а 6500 Да. И стоИт задача препаративно выделить из него несколько десятков мг примеси, которая на 111 Да тяжелее, чтобы использовать ее как стандартный образец.
Единственная известная методика определения этой примеси делается на катионообменнике с рассолом (7%) в качестве подвижной фазы.

Сдается мне, что речь идет об апротинине и N-пироглутамилапротинине.
Andrew
VIP Member
Ранг: 1291


04.12.2019 // 7:56:41     
Есть опыт работы с ним?
voodensky
Пользователь
Ранг: 39


04.12.2019 // 8:07:57     

virtu пишет:

Andrew пишет:
Вопрос: какой MS-детектор нужен, чтобы сделать методику для аналитического, а затем - для препаративного выделения этой примеси?.
Любой масс-анализатор до 1500-2000 m/z, разрешением > 1000 FWHM и ESI (при наличии выбора лучше выбирать импульсное железо - IT, TOF). Тут больше проблем будет с хроматографией.


Andrew пишет:
Есть опыт работы с ним?
Посмотрите
https://onlinelibrary.wiley.com/doi/pdf/10.1111/j.1467-7652.2008.00321.x
их не напрягает на многозарядных ионах работать
vmu
Пользователь
Ранг: 399


04.12.2019 // 8:49:52     
Редактировано 1 раз(а)


Andrew пишет:
Есть опыт работы с ним?
Было дело. По фармакопейным методикам работал. Методика на пироглутамилапротинин (ПГА) действительно неробастная. Интересно, что в Евр.Ф. и в Амер.Ф. методика одна и та же, но требования к разрешению в одной 1.5, в другой 1.0 (или 1.2, точно не помню). В методике на олигомеры апротинина в Евр.Ф. указана нерабочая колонка с неподходящим диапазоном молекулярных масс.
Не проще ли синтезировать ПГА из апротинина, чем выделять эти доли процента из условно чистого апротинина?
Andrew
VIP Member
Ранг: 1291


04.12.2019 // 10:56:31     
Опытный синтетик говорит, что получатся 4 продукта очень близких по свойствам, которые все равно придется разделять, а он это не сможет сделать. Лучше синтезировать "с нуля". Но у нас такой возможности нет. Кто это может сделать в РФ не знаю, а заказывать буржуям - слишком дорого. Вот и ищу возможность выделить из того, что есть.

  Ответов в этой теме: 26
  Страница: 1 2 3
  «« назад || далее »»

Ответ на тему



ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU:      [ Все новости ]

ЖУРНАЛ ЛАБОРАТОРИИ ЛИТЕРАТУРА ОБОРУДОВАНИЕ РАБОТА КАЛЕНДАРЬ ФОРУМ

Copyright © 2002-2009
«Аналитика-Мир профессионалов»

Размещение рекламы / Контакты