Форумы ANCHEM.RU: Нюансы пробоподготовки (витамин А) для анализа методом ВЭЖХ

Российский химико-аналитический портал

химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов

карта портала ::: расширенный поиск

ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Нюансы пробоподготовки (витамин А) для анализа методом ВЭЖХ >>>

  Ответов в этой теме: 14
  Страница: 1 2
  «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]

Автор

Тема: Нюансы пробоподготовки (витамин А) для анализа методом ВЭЖХ

ZanziBar
Пользователь
Ранг: 30

22.04.2025 // 13:43:32

Друзья, прошу разъяснить.

Витамин А определяем в растительном масле, или рыбьем жире в темном помещении, охлаждая быстро на разных этапах пробу до комнатной температур, или ниже ее.
1. Щелочное омыление (вода, КОН и этанол) при какой температуре нужно проводить, чтобы витамин А не растерялся по пути?
2. Антиоксидант аскорбиновую кислоту нужно добавлять к витамину А? Если да, то в каком количестве, и на каком этапе (при взвешивании навески витамина А, или на этапе добавления КОН и этанола)?
3. Экстракцию гексаном в делительной воронке проводить интенсивным встряхиванием, или спокойным перемешиванием? В каком случае потери витамина А будут минимальны?

ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

Pleh
Пользователь
Ранг: 291

23.04.2025 // 9:06:18

1. "Навеску пробы указанной массы (табл.4) помещают в кониче-
скую колбу вместимостью 100 см3, соединенную с обратным холо-
дильником, добавляют 10 см3 водного 9%-ного раствора аскорбино-
вой кислоты (п.8.3.2), 20 см3 9%-ного этанольного раствора гидро-
ксида калия (п.8.3.1) и выдерживают на водяной бане при темпера-
туре 85 - 90°С в течение указанного времени, периодически пере-
мешивая и избегая интенсивного кипения и прямого попадания сол-
нечного света."
2. "Приготовление градуировочной смеси №1
В коническую колбу вместимостью 100 см3, соединенную с об-
ратным холодильником, помещают 0,5 см3 исходной смеси витами-
нов (п.8.3.4.3), добавляют 10 см3 водного 9%-ного раствора аскор-
биновой кислоты (п.8.3.2), 20 см3 9%-ного этанольного раствора
гидроксида калия (п.8.3.1) и выдерживают на водяной бане при тем-
пературе 85 - 90°С в течение 60 мин, периодически перемешивая и
избегая интенсивного кипения и прямого попадания солнечного све-
та. Гидролизат охлаждают, добавляют 10 см3 дистиллированной во-
ды и хорошо перемешивают..."
3. "Поскольку витамины, особенно ретинол, легко разрушаются
при повышенной температуре, под действием света и кислорода
воздуха, а также в присутствии следов кислот, необходимо соблю-
дать специальные меры предосторожности, защищающие соедине-
ния от воздействия этих факторов:
• избегать попадания прямых солнечных лучей;
• использовать посуду, тщательно отмытую от следов кислот;
• хранить растворы и экстракты в холодильнике;
• свести до минимума контакт с кислородом воздуха (пере-
мешивать осторожно, хранить в подходящей по объему по-
суде)."

ZanziBar
Пользователь
Ранг: 30

23.04.2025 // 9:43:45

Pleh пишет:
1. "Навеску пробы указанной массы (табл.4) помещают в кониче-
скую колбу вместимостью 100 см3, соединенную с обратным холо-
дильником, добавляют 10 см3 водного 9%-ного раствора аскорбино-
вой кислоты (п.8.3.2), 20 см3 9%-ного этанольного раствора гидро-
ксида калия (п.8.3.1) и выдерживают на водяной бане при темпера-
туре 85 - 90°С в течение указанного времени, периодически пере-
мешивая и избегая интенсивного кипения и прямого попадания сол-
нечного света."
2. "Приготовление градуировочной смеси №1
В коническую колбу вместимостью 100 см3, соединенную с об-
ратным холодильником, помещают 0,5 см3 исходной смеси витами-
нов (п.8.3.4.3), добавляют 10 см3 водного 9%-ного раствора аскор-
биновой кислоты (п.8.3.2), 20 см3 9%-ного этанольного раствора
гидроксида калия (п.8.3.1) и выдерживают на водяной бане при тем-
пературе 85 - 90°С в течение 60 мин, периодически перемешивая и
избегая интенсивного кипения и прямого попадания солнечного све-
та. Гидролизат охлаждают, добавляют 10 см3 дистиллированной во-
ды и хорошо перемешивают..."
3. "Поскольку витамины, особенно ретинол, легко разрушаются
при повышенной температуре, под действием света и кислорода
воздуха, а также в присутствии следов кислот, необходимо соблю-
дать специальные меры предосторожности, защищающие соедине-
ния от воздействия этих факторов:
• избегать попадания прямых солнечных лучей;
• использовать посуду, тщательно отмытую от следов кислот;
• хранить растворы и экстракты в холодильнике;
• свести до минимума контакт с кислородом воздуха (пере-
мешивать осторожно, хранить в подходящей по объему по-
суде)."

Большое Вам спасибо!

Fisher11
Пользователь
Ранг: 24

23.04.2025 // 11:13:33

от себя добавлю:

- на водяной бане температуру лучше сделать 65-75град.С, в токе азота или аргона, колбы темного стекла или обернуть фольгой.

- экстрагировать гексаном можно интенсивно

- упаривать гексан в токе азота или аргона не досуха, оставлять примерно 3-5мл, остаток упаривать вне бани также в токе инертного газа

ZanziBar
Пользователь
Ранг: 30

23.04.2025 // 13:32:24

Fisher11 пишет:
от себя добавлю:

- на водяной бане температуру лучше сделать 65-75град.С, в токе азота или аргона, колбы темного стекла или обернуть фольгой.

- экстрагировать гексаном можно интенсивно

- упаривать гексан в токе азота или аргона не досуха, оставлять примерно 3-5мл, остаток упаривать вне бани также в токе инертного газа

Благодарю за ответ!! Собираю информацию по крупицам. Это точно пригодится.

ZanziBar
Пользователь
Ранг: 30

23.04.2025 // 13:35:25

ZanziBar пишет:

Fisher11 пишет:
от себя добавлю:

- на водяной бане температуру лучше сделать 65-75град.С, в токе азота или аргона, колбы темного стекла или обернуть фольгой.

- экстрагировать гексаном можно интенсивно

- упаривать гексан в токе азота или аргона не досуха, оставлять примерно 3-5мл, остаток упаривать вне бани также в токе инертного газа
Благодарю за ответ!! Собираю информацию по крупицам. Это точно пригодится.

Использую вакуумный испаритель. Интересно, как витамин А переживает такое упаривание.

Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

ОКБ Спектр, ЗАО
Фирма «ОКБ Спектр» создана в 1989 году на базе КБ спектральных приборов АО ЛОМО. Основное направление деятельности – спектральное приборостроение.

Fisher11
Пользователь
Ранг: 24

23.04.2025 // 13:43:02

ZanziBar пишет:

ZanziBar пишет:

Fisher11 пишет:
от себя добавлю:

- на водяной бане температуру лучше сделать 65-75град.С, в токе азота или аргона, колбы темного стекла или обернуть фольгой.

- экстрагировать гексаном можно интенсивно

- упаривать гексан в токе азота или аргона не досуха, оставлять примерно 3-5мл, остаток упаривать вне бани также в токе инертного газа
Благодарю за ответ!! Собираю информацию по крупицам. Это точно пригодится.
Использую вакуумный испаритель. Интересно, как витамин А переживает такое упаривание.

на ротационнике самое то, просто нужно в токе инертного газа упаривать, а когда останется 3-5мл, поднять колбу из бани и подождать пока растворитель не улетит полностью

ZanziBar
Пользователь
Ранг: 30

23.04.2025 // 15:25:39

Fisher11 пишет:

ZanziBar пишет:

ZanziBar пишет:

Fisher11 пишет:
от себя добавлю:

- на водяной бане температуру лучше сделать 65-75град.С, в токе азота или аргона, колбы темного стекла или обернуть фольгой.

- экстрагировать гексаном можно интенсивно

- упаривать гексан в токе азота или аргона не досуха, оставлять примерно 3-5мл, остаток упаривать вне бани также в токе инертного газа
Благодарю за ответ!! Собираю информацию по крупицам. Это точно пригодится.
Использую вакуумный испаритель. Интересно, как витамин А переживает такое упаривание.
на ротационнике самое то, просто нужно в токе инертного газа упаривать, а когда останется 3-5мл, поднять колбу из бани и подождать пока растворитель не улетит полностью

Спасибо большое Вам! Попробую так сделать.

OldBrave
VIP Member
Ранг: 1349

23.04.2025 // 16:52:13

ZanziBar пишет:
Спасибо большое Вам! Попробую так сделать.

Как показала практика, слухи о необходимости использования инертного газа сильно преувеличены. Необходимость использовать колбы из темного стекла, как и обертывание их фольгой - из той же оперы.
Можно спокойно упаривать на роторе почти досуха, а потом откачивать на форвакуумном насосе.
Все эти меры предосторожности нужны при анализе каротинойдов.

ZanziBar
Пользователь
Ранг: 30

24.04.2025 // 8:32:48

OldBrave пишет:

ZanziBar пишет:
Спасибо большое Вам! Попробую так сделать.
Как показала практика, слухи о необходимости использования инертного газа сильно преувеличены. Необходимость использовать колбы из темного стекла, как и обертывание их фольгой - из той же оперы.
Можно спокойно упаривать на роторе почти досуха, а потом откачивать на форвакуумном насосе.
Все эти меры предосторожности нужны при анализе каротинойдов.

Спасибо за ответ.

Обязательно от искусственного света пробы с витамином А защищать? Светильники потолочные ультрафиолет излучают в таком количестве, чтобы вред витамину нанести? Или он только солнечного света боится?

У меня сходимости по площадям витамина А нет. То больше получается, то меньше. Все перепробовал. И без света искусственного, и со светом, и с аскорбинкой, и без, все равно прыгает туда сюда. Где искать потери, пока не пойму.

OldBrave
VIP Member
Ранг: 1349

24.04.2025 // 18:41:24

ZanziBar пишет:
Обязательно от искусственного света пробы с витамином А защищать? Светильники потолочные ультрафиолет излучают в таком количестве, чтобы вред витамину нанести? Или он только солнечного света боится?

У меня сходимости по площадям витамина А нет...

Следует избегать прямого солнечного света. Обычные светильники в помещении на результаты не влияют. Обычно оставлял упаренные и откачанные пробы на ночь и анализировал на следующий день. В нативных растительных маслах витамина А нет, вы анализируете пробы с введенным витамином. Витамин А, как правило, вводится в виде ацетата/пальмитата ретинола. Отсюда, возможные потери за счет недостаточного омыления. Окончание омыления следует самостоятельно определить, добавляя к смеси небольшого количества воды. Появление мути указывает, что процесс еще не завершен...


Ответов в этой теме: 14 Страница: 1 2 «« назад \|\| далее »»	Ответ на тему

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU: [ Все новости ]

Размещение рекламы / Контакты