| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Методика определения аскорбиновой кислоты для ВЭЖХ >>>
|
 |
|
Jktym Пользователь Ранг: 15 |
 18.08.2009 // 12:30:40
Редактировано 4 раз(а) Garry! Признательны за ответ.колонку разбирали, почистили сколько было возможно, фильтр заменили, на малых скоростях (до 80-85мкл/мин) на ацетонитриле и смесях Ац:вода идет без давления, снова что-то делить не пробовали и вообще ее пока убрали. Увеличиваем скорость - растет давление. Обычно если меняется фильтр, но колонка "села" - плохое деление, несимметричные пики и т.п. Что дает давление - сорбенту?Предколонку не использовали. Центрифугат был достаточно прозрачный. рН элюента слабо кислый, доля метофосфорной в центрифугате 0,6мг/15мл, объем пробы 8мкл. Может ли она повлиять на сорбент? |
|||||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
||||||
|
Korvet Пользователь Ранг: 1114 |
18.08.2009 // 12:51:22
Такие пробы все же лучше не только центрифугировать но и фильтровать. я думаю что проблема в полисахаридах, которые могут быть в виде глобул вполне растворены в воде, и даже прозрачны, но оседают на фильтре колонки либо в ней самой. |
|||||
|
M@X Пользователь Ранг: 129 |
18.08.2009 // 13:08:49
Редактировано 3 раз(а) Jktym! Ваша тема обсуждается уже 5 дней, при этом проблема так и не решена, ИМХО. Может пора уже нормально сформулировать вопрос, и описать подробнее что и как вы делаете и что не получается (какая колонка, какие условия пробоподготовки и проведения анализа)? Это сильно повысит шансы на успех. Или "коммерческая тайна"? А то уважаемые форумчане вытаскивают из вас информацию, как преподаватель на экзамене у плохо подготовившегося студента. Это как? Совсем без давления? Это обычное явление. Странно, если было бы наоборот. Какая именно скорость? И какое давление? А зря... Не всегда достаточно просто оценить прозрачность "на глазок". Фильтрация через .45 мкм фильтр лишней не будет. Тем более растительный экстракт. Почитайте, пригодится: (Особенности эксплуатации колонок для ВЭЖХ) Желаю удачи. |
|||||
|
DSP007 VIP Member Ранг: 2228 |
18.08.2009 // 14:17:17
Редактировано 1 раз(а) У вас милихром? Знаете еще что может быть- была неправильно ( не в упор) установлена колонка изначально, и игла автосемплера раздавила тефлоновый уплотнитель. При этом давление на входе может быть совершенно офигенным, а из колонки едва капать, мне такое тоже встречалось. Проходимость уплотнителя иногда удается восстановить , надавив в место бывшей дырки швейной иглой. "Голову " лучше для этой операции снять и зажать тисках , потому как при тычке "в никуда" фильтр в худшем случае выпихивается иглой , а при тычке "в сорбент" фильтр иногда пробивается, он хоть и титановый, но в милихромовских колонках тонюсенький как фольга. СПЕЦИАЛЬНО ДЛЯ НЕПОНЯТЛИВЫХ. ЭТО ОТНОСИТСЯ ТОЛЬКО К МИЛИХРОМУ (!!!) |
|||||
|
Jktym Пользователь Ранг: 15 |
18.08.2009 // 14:21:37
Адаптировали методику определения АК разработанную Барам Г.И, Глызиной О.Ю. и Федотовой Г.А. Разумеется давление зависит от скорости подачи элюента. его вязкости, однако 150мкл/мин средняя скорость и принудительной остановки насоса в норме быть не должно, а мы как раз столкнулись с этим. |
|||||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|||||
|
Jktym Пользователь Ранг: 15 |
18.08.2009 // 14:24:42
СПАСИБО! не подумали о уплотнителе, попробуем разобраться.Да, имеем дело с Милихромом |
|||||
|
Garry VIP Member Ранг: 1076 |
18.08.2009 // 16:05:36
Редактировано 1 раз(а) В Милихроме бывает и завальцовка пор фильтра иглой, если она установлена неверно. В этом случае на фильтре (кстати он должен выпадать при разборке верхнего узла колонки) будет вмятина и под микроскопом поры - сплошное месиво. Тут можно приподнять иглу регулировочным винтом иглодержателя, либо если имеется самплер, то регулировочным винтом коромысла с иглой. Есть там такой шпиндель-ограничитель вворачивающийся. Потом, расход 150 мкл/мин для ПФ, содержащих менее 40 % ацетонитрила - довольно экстремальный. Датчик давления близок к ауту. Поэтому самым оптимальным будет расход 100 мкл/мин - максимально. Больший расход не советую. Любая колонка "сядет" - т.е. вверхней части появится в лучшем случае лунка-вмятинка. В худшем случае 2-3 мм пустота. Случалось "лечил" я такие колонки. Но это как временная помощь. Для залипших биополимерами (полисахариды) колонок - самое радикальное "лекарство" - удаление части сорбента 2-3 мм и самостоятельное "вмазывание" этих 2-3 мм свежим сорбентом с разобранных старых колонок, но взятым снизу старой колонки. Сорбент обычно замешивается на изо-пропаноле и ввиде сметаны шпателем "вталкивается" в положенное место. Предвижу массу недовольных реплик по этому поводу, НО... предупреждаю.... эти советы больше от бедности чем от куражу  . В моей практике еще не было случая, чтобы они приводили к гибели колонки. Если у хроматографиста руки растут из нужного места, то проблем не бывает.
|
|||||
|
Jktym Пользователь Ранг: 15 |
18.08.2009 // 16:50:59
Garry! конечно мы довели колонку, анализы шли хорошо и это ослабило бдительность Пустота конечно же образовалась, попробуем дозаполнить. А насчет полисахаридов.....?Может больше водорастворимый пектин, да и в листьях его не много. Ясно, что готовить пробу надо тщательнее. Приятно с Вами общаться! |
|||||
|
Serga Пользователь Ранг: 1806 |
18.08.2009 // 21:03:45
Вы там шпионов ловите или анализы делает? Бдительность они утратили.
А если ясно, то чего ж игнорируете элементарные вещи? На русский авось понадеялись? |
|||||
|
Serga Пользователь Ранг: 1806 |
18.08.2009 // 21:05:28
Маленький вопрос. Что у вас проходит под ником "метафосфорная кислота"? |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 26
|
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
