Российский химико-аналитический портал  химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов  
карта портала ::: расширенный поиск              
 



ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...
  1. Аналитический форум | Список форумов | Войти в систему | Регистрация | Помощь | Последние темы | Поиск

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Количественное определение фенилэфрин гидрохлорида >>>

  Ответов в этой теме: 20
  Страница: 1 2
  «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]


Звезда
Пользователь
Ранг: 11


06.11.2017 // 14:10:26     

vmu пишет:

Звезда пишет:
Берется исп (саше) переноситься в мерную колбу на 50 мл и растворяется в подвижной фазе. РСО берется навеска и переноситься в мерную колбу на 50 мл и также растворяем в п/ф. концентрации стараюсь соблюдать и делаю одинаковыми.
В какой ПФ растворяете? Вы порцию смеси 80/20 для растворения образцов отдельно готовите? Из вашего описания следует, что ПФ для разделения смешивается хроматографом из отдельных водного и органического компонентов. Концентрации веществ в анализируемых растворах какие? Уменьшить пробовали? Какие пики двоятся? Все?


Здравствуйте! Растворяю в ПФ : ацетонитрил:буфер , как я выше писала, а для образцов готовлю отдельно,на приборе да смешивается хроматографом. Концентрации веществ получается: в исп ( аскорб к-та- 0,5 мг/мл, фенилэфрина г/х – 0,01 мг/мл) РСО: аскорбиновой кислоты – 0,5 мг/мл, для фенилэфрина г/х – 0,01 мг/мл, конц . я подгоняю под испытуемый образец. Пики не то чтобы двоятся в испытуемом не разделяются так как вещества аскорб. К-ты и фенилэфрина г/х выходят практически в одно и тоже время, это стало понятно при отдельном прогоне стандартных образцов. Вы предлагаете уменьшить концентрации, я не думаю что это поможет просто вещества фенилэфрина г/х и так 10 мг в исп.образце))) . Можете еще что нибудь посоветовать ! Пожалуйста! Заранее спасибо!
Реклама на ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
Размещение рекламы
Звезда
Пользователь
Ранг: 11


06.11.2017 // 14:11:25     

vmu пишет:

Звезда пишет:
Берется исп (саше) переноситься в мерную колбу на 50 мл и растворяется в подвижной фазе. РСО берется навеска и переноситься в мерную колбу на 50 мл и также растворяем в п/ф. концентрации стараюсь соблюдать и делаю одинаковыми.
В какой ПФ растворяете? Вы порцию смеси 80/20 для растворения образцов отдельно готовите? Из вашего описания следует, что ПФ для разделения смешивается хроматографом из отдельных водного и органического компонентов. Концентрации веществ в анализируемых растворах какие? Уменьшить пробовали? Какие пики двоятся? Все?

Здравствуйте! Растворяю в ПФ : ацетонитрил:буфер , как я выше писала, а для образцов готовлю отдельно,на приборе да смешивается хроматографом. Концентрации веществ получается: в исп ( аскорб к-та- 0,5 мг/мл, фенилэфрина г/х – 0,01 мг/мл) РСО: аскорбиновой кислоты – 0,5 мг/мл, для фенилэфрина г/х – 0,01 мг/мл, конц . я подгоняю под испытуемый образец. Пики не то чтобы двоятся в испытуемом не разделяются так как вещества аскорб. К-ты и фенилэфрина г/х выходят практически в одно и тоже время, это стало понятно при отдельном прогоне стандартных образцов. Вы предлагаете уменьшить концентрации, я не думаю что это поможет просто вещества фенилэфрина г/х и так 10 мг в исп.образце))) . Можете еще что нибудь посоветовать ! Пожалуйста! Заранее спасибо!
vmu
Пользователь
Ранг: 76


06.11.2017 // 16:05:16     
Редактировано 1 раз(а)


Звезда пишет:
Имеется методика, которая хорошо себя зарекомендовала при количественном определении моего фенилэфрина в аналогах (тоже имеют 4 активных компонента в составе).
Вы воспроизводите условия разделения рабочей методики в точности, включая марку колонки? Если есть методика, которая позволяет разделить фенилэфрин и аскорбинку в аналогичных препаратах, то и с вашим препаратом принципиальных проблем быть не должно. Может быть, у вас просто колонка уже убитая? Возьмите такую же, но новую. Еще вариант - попробовать на другом хроматографе.

Попробуйте поиграть с соотношением количеств ацетонитрила и водной части в ПФ (начальное соотношение, профиль градиента). Снижение pH до 2.1 вряд ли сильно скажется на разделении, но можно попробовать. При pH 2.8 аскорбинка с pKa 4.1 уже на 95% в нейтральной протонированной форме, необходимой для нормального удерживания обращенно-фазовым сорбентом.

Можно поиграть с концентрацией октансульфоната. Кстати, вы берете именно то, что прописано в методике? В методике из Европейской фармакопеи - те же 3.25 г на 1000 мл, но там указано: октансульфоната натрия моногидрат.

Можно попробовать изменить темпертуру колонки. Не самое эффективное средство, но простое и иногда помогает. Можно сменить марку колонки: на этой C18 не делится - на другой C18 может поделиться.
Еще один более-менее радикальный вариант - сменить ион-парный агент, например на гептансульфонат или лаурилсульфонат.

Варьирование концентрации и природы ион-парника - наиболее эффективный способ достичь разделения проблемной пары веществ, поскольку указанные параметры будут влиять на удерживание фенилэфрина (положительные ионы) и практически не влиять на удерживание нейтральных при низком pH молекул аскорбинки.
Шушечка
Пользователь
Ранг: 213


07.11.2017 // 4:17:31     
действительно октансульфонат можно попробовать, с лаурилом я бы не связывалась.. не по душе он мне))
Сколько по времени уравновешиваете колонку? получается тут ион-парная хроматография?
Шушечка
Пользователь
Ранг: 213


07.11.2017 // 4:44:27     

Звезда пишет:

Шушечка пишет:
Прочтите внимательно методику в Европейке... особенно обратите внимание на колонку.
Здравствуйте! Благодарю ВАС за доброжелательность в мой адрес. я попробую еще раз изложить суть проблемы. имеется препарат в его составе 4 активных вещества: парацетамол, аскорбинка, фенирамин малеат, фениэфрин гидрохлорид. и вспомогательные: сахароза,лимонная кислота безводная, натрия цитрат дигидрат, натрия сахарин, ароматизатор сухой. Имеется методика, которая хорошо себя зарекомендовала при количественном определении моего фенилэфрина в аналогах (тоже имеют 4 активных компонента в составе). Методика следующая: Берется исп (саше) переноситься в мерную колбу на 50 мл и растворяется в подвижной фазе. РСО берется навеска и переноситься в мерную колбу на 50 мл и также растворяем в п/ф. концентрации стараюсь соблюдать и делаю одинаковыми. Подвижная фаза приготавливается из буфера и ацтонитрила в соотношении (80:20). Приготовление буфера: берется 3,25 гр натрия октансульфоната в колбу на 1000 мл и разводиться водой. далее подводим рН буфера до 2,8. Условия ВЭЖХ: температура колонки - 45 С, поток - 1 мл/мин, Обьем ввода - 10 мкл, Длина волны - 215 нм, П/Ф ставлю на градиент : порт С(ACN) 20% - порт D( буфер с рН 2,8). колонка Supelco ( Ascentis C18. cat#581324-U).
На выходе получаю раздвоенные пики или пик аскорбинки накладывается на пик фенилэфрина (это понятно при раздельном прогоне обоих стандартов).
Если кто имеет опыт, пожалуйста подскажите как подкорректировать методику, чтобы разделить пики или если есть возможность, предложите другие условия. Заранее спасибо!

у вас неправильно проходит растворение.... растворитель по методике берется 20-80 ( фаза В/А)
а подвижная фаза 10/90 и далее по градиенту.
вы просто невнимательно прочли методику , указанную в Европейке.
вы же этот номер методики гоняете: 01/2008:0632 corrected 7.0
Реклама на ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
Размещение рекламы
Рентгенофлуоресцентный анализатор МАГНИЙ-1 Рентгенофлуоресцентный анализатор МАГНИЙ-1
Рентгенофлуоресцентный анализатор с камерой вакуумирования для количественного анализа состава металлов и сплавов в диапазоне от Mg (магний) до Am (америций). Выпускается в носимом варианте.
[ Информация из каталога оборудования ANCHEM.RU ]
Шушечка
Пользователь
Ранг: 213


07.11.2017 // 4:51:38     

Звезда пишет:

vmu пишет:

Звезда пишет:
Берется исп (саше) переноситься в мерную колбу на 50 мл и растворяется в подвижной фазе. РСО берется навеска и переноситься в мерную колбу на 50 мл и также растворяем в п/ф. концентрации стараюсь соблюдать и делаю одинаковыми.
В какой ПФ растворяете? Вы порцию смеси 80/20 для растворения образцов отдельно готовите? Из вашего описания следует, что ПФ для разделения смешивается хроматографом из отдельных водного и органического компонентов. Концентрации веществ в анализируемых растворах какие? Уменьшить пробовали? Какие пики двоятся? Все?

Здравствуйте! Растворяю в ПФ : ацетонитрил:буфер , как я выше писала, а для образцов готовлю отдельно,на приборе да смешивается хроматографом. Концентрации веществ получается: в исп ( аскорб к-та- 0,5 мг/мл, фенилэфрина г/х – 0,01 мг/мл) РСО: аскорбиновой кислоты – 0,5 мг/мл, для фенилэфрина г/х – 0,01 мг/мл, конц . я подгоняю под испытуемый образец. Пики не то чтобы двоятся в испытуемом не разделяются так как вещества аскорб. К-ты и фенилэфрина г/х выходят практически в одно и тоже время, это стало понятно при отдельном прогоне стандартных образцов. Вы предлагаете уменьшить концентрации, я не думаю что это поможет просто вещества фенилэфрина г/х и так 10 мг в исп.образце))) . Можете еще что нибудь посоветовать ! Пожалуйста! Заранее спасибо!

и еще.. по поводу фазы: у вас одна бутыль должна быть состава АЦН/буфер ( 10/90) а вторая буфер/АЦН ( 90/10) и посмотрите как распределяется градиент... на старте 93% фазы а, затем понижение до 70 и опять возвращение до 93
Шушечка
Пользователь
Ранг: 213


09.11.2017 // 4:17:19     
ПРопал ТС куда то)) чем дело то кончилось?))
Звезда
Пользователь
Ранг: 11


13.11.2017 // 9:03:24     

Шушечка пишет:
ПРопал ТС куда то)) чем дело то кончилось?))

Здравствуйте! то что вы советовали еще не испробовала, в ближайшие дня сообщу, мне тоже интересно как пойдет процесс))) спасибо вам, я отпишусь))
Звезда
Пользователь
Ранг: 11


13.11.2017 // 9:05:30     

vmu пишет:

Звезда пишет:
Имеется методика, которая хорошо себя зарекомендовала при количественном определении моего фенилэфрина в аналогах (тоже имеют 4 активных компонента в составе).
Вы воспроизводите условия разделения рабочей методики в точности, включая марку колонки? Если есть методика, которая позволяет разделить фенилэфрин и аскорбинку в аналогичных препаратах, то и с вашим препаратом принципиальных проблем быть не должно. Может быть, у вас просто колонка уже убитая? Возьмите такую же, но новую. Еще вариант - попробовать на другом хроматографе.

Попробуйте поиграть с соотношением количеств ацетонитрила и водной части в ПФ (начальное соотношение, профиль градиента). Снижение pH до 2.1 вряд ли сильно скажется на разделении, но можно попробовать. При pH 2.8 аскорбинка с pKa 4.1 уже на 95% в нейтральной протонированной форме, необходимой для нормального удерживания обращенно-фазовым сорбентом.

Можно поиграть с концентрацией октансульфоната. Кстати, вы берете именно то, что прописано в методике? В методике из Европейской фармакопеи - те же 3.25 г на 1000 мл, но там указано: октансульфоната натрия моногидрат.

Можно попробовать изменить темпертуру колонки. Не самое эффективное средство, но простое и иногда помогает. Можно сменить марку колонки: на этой C18 не делится - на другой C18 может поделиться.
Еще один более-менее радикальный вариант - сменить ион-парный агент, например на гептансульфонат или лаурилсульфонат.

Варьирование концентрации и природы ион-парника - наиболее эффективный способ достичь разделения проблемной пары веществ, поскольку указанные параметры будут влиять на удерживание фенилэфрина (положительные ионы) и практически не влиять на удерживание нейтральных при низком pH молекул аскорбинки.


благодарю за подробность, попробую и ваши советы применить! надеюсь что нибудь получиться!
Шушечка
Пользователь
Ранг: 213


13.11.2017 // 11:39:47     

Звезда пишет:

Шушечка пишет:
ПРопал ТС куда то)) чем дело то кончилось?))
Здравствуйте! то что вы советовали еще не испробовала, в ближайшие дня сообщу, мне тоже интересно как пойдет процесс))) спасибо вам, я отпишусь))

прежде чем что то пробовать просто постарайтесь строго воспроизвести методику-оригинал.. именно так , как указано в ЕФ

  Ответов в этой теме: 20
  Страница: 1 2
  «« назад || далее »»

Ответ на тему



ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU:      [ Все новости ]

ЖУРНАЛ ЛАБОРАТОРИИ ЛИТЕРАТУРА ОБОРУДОВАНИЕ РАБОТА КАЛЕНДАРЬ ФОРУМ

Copyright © 2002-2009
«Аналитика-Мир профессионалов»

Размещение рекламы / Контакты